Urospermia é a contaminação do sêmen com urina e uma condição que pode reduzir a fertilidade do garanhão. A contaminação de ejaculados com urina nos garanhões podem ocorrer esporádica ou consistentemente. Os efeitos deletérios da urina sobre os espermatozóides são devidos a alterações no pH e aos efeitos tóxicos da uréia. O objetivo foi avaliar a viabilidade do sêmen contaminado com urina através da avaliação quanto à motilidade e à função espermáticas. No primeiro experimento, foram realizadas 5 coletas de sêmen de 8 garanhões, totalizando 40 ejaculados. No segundo experimento, foram realizadas 5 coletas de sêmen de 5 garanhões, totalizando 25 ejaculados. Imediatamente após a coleta do sêmen, foi mensurado o pH, os níveis de uréia, creatinina e determinada a concentração espermática. O sêmen foi então alocado em frascos cônicos de 50 mL. Adicionou-se 10 ml de sêmen fresco ao frasco “controle” (CON), 8 ml de sêmen fresco ao frasco de "baixa contaminação" (LOW) e 5 ml de sêmen fresco ao frasco de "alta contaminação" (HIGH). Foram adicionados 2 ml de urina a cada frasco de "baixa contaminação" LOW, e 5 ml de urina foram adicionados a cada frasco de "alta contaminação" HIGH. Uma vez que o sêmen foi exposto à urina por 2 minutos, cada um dos frascos foi estendido para 40 ml com um extensor de sêmen. Em seguida, adicionou-se 1 ml de solução de cushion no fundo de cada frasco cônico. Todos os tubos foram então centrifugados. Após a centrifugação, o sobrenadante e a solução de cushion foram aspirados e descartados; para o segundo experimento, foi preparado um gradiente de densidade em cada frasco e o gradiente centrifugado, após o que o sobrenadante foi descartado. O sedimento de esperma remanescente foi ressuspenso para uma concentração final de 200 milhões de espermatozóides / mL. O sêmen foi então carregado manualmente em palhetas de 0,5 mL e depois arrefecido a 5 ° C durante 20 minutos. Para congelamento, o sêmen foi então colocado a 4 cm acima do nitrogênio líquido durante 15 minutos antes de ser mergulhado em nitrogênio líquido. Em ambos os experimentos, houve uma redução significativa na motilidade total e progressiva do sêmen com aumento da contaminação da urina pré-congelamento, mas não houve uma redução significativa nos resultados para VCL (Velocidade curvilínea) e VAP (Velocidade trajetória). No primeiro experimento, a viabilidade do sêmen pós-descongelamento foi significativamente menor no grupo HIGH do que nos grupos CON ou LOW, enquanto que no segundo experimento, a viabilidade do sêmen pós-descongelamento foi semelhante nos grupos CON, LOW e HIGH. No segundo experimento, foi verificado uma maior seleção de células espermáticas morfologicamente normais após a centrifugação com o gradiente de densidade. Conclui-se que a centrifugação com gradiente de densidade pode melhorar a qualidade do sêmen contaminado com urina.