O ensaio HET-CAM é um método acessível e de rápida execução, sendo uma alternativa ao
ensaio de Draize, questionado por questões metodológicas e éticas. A maioria dos estudos
utiliza os ovos férteis da galinha White Leghorn, uma raça comercial e difícil de encontrar em
sua linhagem pura. Estudos precisam ser conduzidos para validar o uso de ovos de galinhas
locais, como a Canela-Preta, no método HET-CAM, mostrando que estes ovos são
equivalentes aos ovos da raça utilizada como padrão-ouro. Dessa forma, o objetivo deste
trabalho foi comparar o uso dessas duas raças no método HET-CAM. Parâmetros físicos dequalidade interna e externa foram analisados em quintuplicata para ambas as raças: índice de
forma, área de superfície, unidade Haugh (UG), espessura da casca e %casca. O ensaio HET-
CAM foi realizado em quadruplicada utilizando ovos férteis de ambas as raças no 10º dia de
incubação. Foram utilizadas cinco amostras de surfactantes para realização do ensaio: Lauril
sulfato de sódio (LSS) 0,25%, Estearamidopropil Dimetilamina (DMT) 1%, Cloreto de
behentrimônio (BHA) 0,5%, Cocamidopropil betaína (CAPB) 3% e Lauril poliglucosídeo
(PL) 20%. Após aplicação, foram verificadas alterações (hemorragia, hiperemia e congestão)
durante 5 minutos e graduado para efeitos irritantes. As amostras foram classificadas em não
irritante, irritante leve, moderado ou severo. Para análise de parâmetros vasculares, as
membranas de 10 ovos foram expostas e analisadas em estereomicroscópio e fotografadas.
As imagens foram processadas e os cálculos da área relativa e da dimensão fractal (Df) dos
vasos foram realizados através do software Fiji. Em relação aos parâmetros físicos, não
houve diferença estatística significativa entre as raças, contrariando que ovos de galinhas
nativas são inferiores nesses parâmetros, o que é apontado por muitos estudos. Houve
concordância de classificação em três dos cinco tensoativos, gerando uma sensibilidade e
valor preditivo positivo de 75%, especificidade e valor preditivo negativo de 0% e acurácia
de 60%, demonstrando que o modelo apresentou alguma capacidade para identificar amostras
classificadas como irritantes pelo método de referência, mas falhou em reconhecer
corretamente as não irritantes. Em relação aos parâmetros vasculares, a média da área relativa
dos vasos foi de 15.386 ± 0,975% para Canela-Preta e 12.453 ± 0,606% para White Leghorn
com diferença estatística significativa; a média da dimensão fractal foi de 1.707 ± 0.008 paraCanela-Preta e 1.720± 0.008 para White Leghorn. Essa diferença na área vascular relativa
com manutenção da Df equivalente entre os grupos sugere que as diferenças se manifestam
principalmente na extensão ou densidade da vascularização e não nos princípios
organizacionais. Dessa forma, o ensaio HET-CAM utilizando ovos da raça nativa Canela-
Preta mostrou resultado promissor, mas com limitações devido a pequena amostra de
tensoativos testada. Portanto, é necessária uma investigação com uma quantidade maior de
ovos, para aumentar o poder estatístico e diminuir a influência de variações biológicas
individuais, e um acervo maior de tensoativos testados, consolidando assim a proposta do
modelo alternativo.