O babaçu é uma palmeira explorado como um bem extrativista, suas potencialidades são inúmeras e um dos produtos que pode ser aproveitado a partir dele é o “extrato aquoso de amêndoa de babaçu”, também conhecido no Norte e Nordeste do Brasil como “leite de coco babaçu (LCB)”. O objetivo foi avaliar as poterncialidades da amendoa de coco babaçu (Orbignya phalerata Mart.) a partir da torta e de seus derivados, aplicados à produção de alimentos para a nutrição humana. O levantamento bibliográfico foi realizado para determinar o aproveitamento do babaçu. A metodologia aplicada esta descrita no artigo publicado, “Potencialidade na aplicação de complexos poliméricos em extrato vegetal do coco babaçu (Orbignya sp.)”, Capitulo 1. Em função de projeto aprovado junto FINEP teve inicio o processo produtivo do Extrato vegetal do babaçu para ser aplicado no desenvolvimento de produtos alimentares. Em Paralelo, outros editais para financiamentos de ideias inovadoras foram apresentados. A proposta do projeto de doutorado foi submetido e aprovado inicialmente no Edital Centelha/FAPEPI/FINEP. Este projeto considerado inovador abriu as portas para inumeras outras proposta conforme descrito no artigo publicado “Empreendedorismo acadêmico: uma experiência de empreender na Pós-Graduação” Capitulo 2. O LCB foi obtido após a extração do óleo das amendoas, utilizando-se a torta que foi suspensa em água formando o extrato vegetal. A partir desta solução aquosa foram feitas as formulações dos produtos alimentícios. Os aspectos tecnológicos, industriais e econômicos da produção do coproduto “extrato vegetal” foram analisados durante o desenvolvimento do produto. A terceira etapa (Capítulo 3), foi a caracterização do extrato quanto as seguintes análises: caracterização Sólidos Solúveis Totais (SST), potencial hidrogeniônico (pH), acidez, texturométricas, composição centesimal (umidade, cinzas, proteínas, lipídios),  difração de Raios-X, Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e as caracterizações Térmica (TG) e Termogravimetria Derivada (DTG), além das caracterisação microbiologicas de Salmonella, Enterobacteriaceae, Bolores e Levedur as, descritos no Artigo publicado “Desenvolvimento e caracterização de um extrato vegetal à base de amêndoas de babaçu (Orbignya phalerata Martius) Capitulo 3. A revisão bibliográfica mostrou que o babaçu ainda tem potencialidades para gerar produtos (artigos e/ou patentes). A geração de produtos alimenticios inovadores e isentos de restrições alimentares permitiu a aprovação em projetos e a captação de recursos para implementação da empresa e comercialização dos alimentos (Projetos: Centelha, PEIEX, Catalisa I, II, II, Mulheres Empreendedoras, IDEIAZ, Banco do Nordeste. A caracterização do extrato vegetal apresentou os resultados adequados e de acordo com  a instruções normativas n° 161, de 01 de julho de 2022,  sendo indicado ao consumo alimentício.    

A goma do cajueiro é um polissacarídeo de cadeia longa extraído do exsudato do caule de Anacardium occidentale L. e apresenta diversos efeitos benéficos ao trato gastrointestinal, incluindo ação antidiarreica. O objetivo da presente tese é identificar o método de extração e purificação da goma do cajueiro que apresente melhor desempenho para formulação de uma solução de reidratação oral à base de goma do cajueiro que possua ação reidratante e antidiarreica. O capítulo 1 realizou um levantamento científico sobre os efeitos das principais gomas de exsudatos de plantas no trato gastrointestinal. No capítulo 2 realizou-se isolamento e purificação de cinco diferentes métodos de obtenção da goma do cajueiro, bem como caracterização quanto aos parâmetros físico-químicos e estudo dos parâmetrosfarmacocinéticos e toxicológicos dos seus principais componentes. No capítulo 1, demonstrou-se que as gomas de exsudatos de plantas aumentam a saciedade e promovem a entrega demedicamentos direcionados ao trato gastrointestinal. Eles fornecem proteção para vários órgãosdo sistema digestivo e influenciam positivamente as mucinas e a microflora intestinal. Já no capítulo 2, na análise fitoquímica foi identificada a presença de ácidos orgânicos em todas as amostras; na Espectroscopia do Infravermelho Transformada de Fourier (EITF) identificou-se para todas as amostras as bandas semelhantes às da goma extraída pelo método tradicional, assim como características relacionadas à massa molar, solubilidade e umidade. Foram identificados compostos fenólicos e identificou-se o percentual de ácido galacturônico em cada amostra, além de apresentarem grupo metil da ramnose. Essa goma demonstrou características biocompatíveis. Assim, existem diversas gomas que desempenham efeitos benéficos no organismo, contudo a goma do cajueiro vem se destacando. O método de isolamento e purificação da goma do cajueiro deva ser escolhido com base no objetivo de cada uso, levando em conta as características físico-químicas de cada um e o custo e tempo de produção. Essagoma tem excelente potencial biotecnológico.

A periodontite é uma infecção bacteriana dos tecidos, ligamentos e ossos específicos que envolvem e sustentam os dentes, coletivamente conhecidos comoperiodonto, afeta milhões de pessoas em todo o mundo, por muitas vezes sendo negligenciada. Tendo isso em vista, o objetivo deste estudo foi desenvolver um gel à base de bromelaína e avaliar seus efeitos nos tecidos periodontais e fígado em um
modelo de periodontite induzida por ligadura em ratos. Tratando-se dos Métodos, o gel à base de bromelaína (derivado de Ananas comosus) foi formulado em duas concentrações (1% e 10%). Foram utilizados 10 animais por grupo, separados em 6 grupos da seguinte forma: Controle, Periodontite, Periodontite + Gel Neutro, Periodontite + Gel de Bromelaína 1%, Periodontite + Gel de Bromelaína 10% e Periodontite + Gel de Clorexidina 2%. Os géis foram aplicados topicamente com uma seringa de ponta fina, iniciando o tratamento no mesmo dia a indução da periodontite e, posteriormente, uma vez ao dia por 15 dias. Os parâmetros clínicos de mobilidade dentária (MD), índice de sangramento gengival (ISG) e índice deprofundidade de sondagem (IPS) foram avaliados antes da eutanásia, e após a eutanásia a gengiva e tecido hepático foram coletados por biópsia para avaliação bioquímica da mieloperoxidase (MPO), malonaldeído (MDA), Glutationa (GSH) e as mandíbulas para análise morfométrica da altura do osso alveolar. Como resultados, observou-se que este é o primeiro estudo na literatura que verificou a ação do gel de bromelaína orabase em um modelo de periodontite induzida com ligadura. Os parâmetros clínicos de MD, ISG e IPS dos grupos tratados com o gel de bromelaína apresentaram redução significativa (MD = 67,04%, ISG = 67,72% e IPS = 41,22%) quando comparados ao grupo periodontite. Os resultados para dosagem de MPO no tecido gengival mostraram diferenças estatisticamente significantes entre os grupos, sendo os grupos bromelaína com níveis reduzidos em relação ao grupo periodontite (p<0,05), MDA e GSH apresentaram resultados promissores nos grupos tratados com géis nas dosagens. Os resultados para AOA mostraram diferenças significativas quando os grupos que receberam tratamento com gel. Concluindo então que o gel orabase de bromelaína avaliado na periodontite induzida por ligadura em ratos apresentou resposta positiva para os seguintes parâmetros MD, ISG e IPS, MPO, MDA e AOA dos tecidos orais, prevenindo a reabsorção óssea alveolar causada pela doença, destacando o potencial como tratamento da periodontite, além dereduzir os efeitos sistêmicos no tecido hepático.

A polianilina (PANI) é um polímero que pode apresentar diferentes estados de
oxidação, onde em sua forma dopada, obtida em meio ácido, apresenta alta
condutividade elétrica. Neste trabalho foram sintetizados dois polímeros inéditos
(PANI NS e PANI NSAg), no entanto a desdopagem foi necessária, para posterior
utilização de filme em experimento de regeneração óssea. O processo de
desdopagem, em meio básico, garante a permanência de boa estabilidade térmica. A
inclusão de nanopartículas de prata (AgNPs) foi avaliada através da comparação entre
os quatro tipos de PANI sintetizados, com a inclusão da norbixina. As AgNPs
apresentam propriedades antimicrobianas, sendo confirmado neste trabalho, que sua
inclusão não demonstrou propriedades tóxicas, citotóxicas e genotóxicas. As
sementes (200g) de urucum (Bixa orellana L.) foram submetidas a dois processos de
refluxo, utilizando o sistema Soxhlet. O primeiro, produzindo uma fração oleosa e o
segundo, para a obtenção da bixina. A conversão da bixina em norbixina ocorreu com
a adição de ácido sulfúrico (P.A), até a obtenção de precipitado, com mudança de
coloração. A pesquisa visou obter um polímero que trouxesse boa condutividade
elétrica e térmica, assim como características antimicrobianas e antioxidantes. As
análises térmicas e espectrofotométricas dos compósitos do novo polímero, trouxeram
resultados semelhantes com os encontrados na literatura. As medidas térmicas das
novas PANI’s, mostraram ótima estabilidade, com o final da degradação ocorrendo
próximo de 700°C; confirmadas pela análise por Calorimetria Exploratória Diferencial
(DSC). Os novos polímeros, mostraram que os picos de absorbância e seus
comprimentos de onda, são semelhantes aos da PANI NS; na análise por
Espectroscopia na região do Ultravioleta Visível (UV-vis); evidenciando o uso deste
compósito em suas sínteses. As bandas encontradas na análise por Espectroscopia
no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) mostraram grupos

característicos dos compósitos da nova PANI, como C=C e C=O da norbixina, - NH-
ligado aos anéis benzênicos da polianilina, em aproximadamente, 1500 cm-1 para

anéis benzóides e 1416cm-1 para anéis quinóides, e - CON- (amida), para a ligação
entre a norbixina e a polianilina. A caracterização biológica envolveu os testes de
toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade; onde foram observados a ausência de
qualquer uma destas características mencionadas. Sendo a toxicidade avaliada pelo
método de Meyer com o uso de artêmias salinas e os demais avaliados por Allium
sepa L. No tratamento estatístico, utilizou-se os softwares, Origin 9.6 e BioEstat 5.3.

A crisina é um componente ativo natural pertencente à classe flavona de flavonoides, é encontrada em várias espécies vegetais e estudos atuais exibem uma ampla gama de propriedades farmacológicas. Apresenta relativa baixa taxa de absorção pela mucosa intestinal, limitando sua eficácia devido a sua baixa solubilidade aquosa e consequente baixa biodisponibilidade para a ação no organismo. Adjuvantes são substancias que possuem diversas funções diante dos fármacos a qual são apresentados, possuem funções como aumentar a solubilidade, suspender, aumentar a viscosidade, diluir, lubrificar, estabilizar, promover fluxo, aglutinar, desintegrar, conservar e modificar a liberação de fármacos. Um dos adjuvantes que vem sendo utilizado em pesquisas farmacêuticas é o SBA-15, pois as mesmas possuem propriedades físico-químicas com grande potencial como adjuvante de mucosas.Este estudo centrou seu foco na análise do processo de reparação ósseo de tíbias de ratas Wistar, com osteoporose induzida por ovariectomia, submetidas à utilização do flavonoide crisina e da peneira molecular SBA-15 por via oral. Foram utilizados neste estudo 36 ratas divididas em 6 grupos com seis animais sendo Grupo 1: Controle (C) com osteoporose induzida; Grupo 2: Atividade Física (PA) com osteoporose e pratica de natação com carga resistida; Grupo 3: Crisina (CH) com osteoporose e ingesta de 1 dose de 50g/dia do flavonoide crisina; Grupo 4: Crisina mais Atividade Física (CH + PA) com osteoporose e com Atividade Física e Ingesta de Crisina; Grupo 5: Crisina mais SBA-15 (CH + SBA) com osteoporose e ingesta de Crisina complexada com a Sílica Mesoporosa SBA-15; e Grupo 6: Crisina mais SBA-15 mais Atividade Física (CH + SBA + PA) com osteoporose e com ingesta de Crisina complexada com a Sílica Mesoporosa SBA-15 e prática de Atividade Física.

A Samanea tubulosa (Benth) apresenta distribuição em vários países da América do Sul, como Paraguai, Argentina, Bolívia e em alguns estados brasileiros. Pertence à família Leguminosae e é conhecida como Bordão-de-Velho, cultivada para fins ornamentais, industriais e principalmente utilizada de forma empírica na medicina popular para tratar processos inflamatórios, infecções cutâneas, inflamações gástricas e infestações parasitárias. O objetivo desse estudo foi desenvolver um emulgel a partir das vagens inteiras de Samanea tubulosa Benth com atividade anti- inflamatória e antinociceptiva. As vagens foram trituradas e preparado o extrato etanólico, que foi submetido ao fracionamento, obtendo-se frações semi-purificadas. A fração hexânica do extrato (FHEX), adicionada de 5% de Tween 80 para solubilização, foi adicionada ao emulgel para a obtenção da formulação farmacêutica semi-sólida. Em seguida, foram avaliadas as características organolépticas, pH, condutividade, microscopia óptica, espalhabilidade, teor e testes de estabilidade preliminar. As atividades anti-inflamatória e antinociceptiva foram estudadas em modelos in vivo. A atividade anti-inflamatória foi avaliada utilizando-se os modelos de edema de pata (coxim plantar direito de camundongos Swiss, 30-35 g) induzidos por carragenina a 1%, com medição por pachymeter digital. A avaliação da atividade antinociceptiva foi realizada pelo Teste de Von Frey induzido, por Carragenina a 1% em camundongos (coxim plantar direito de camundongos Swiss, 30-35g). Os dados foram submetidos à análise estatística através de análise de variância (ANOVA) seguida pelo teste de Tukey. O pré-tratamento com emulgel da Samanea tubulosa Beth, reduziu significativamente o edema de pata induzido por carragenina nas 6 h de observação na dose de 200 mg/kg quando comparado com o grupo controle, chegando em torno de 65% de redução no edema da pata. O mesmo ocorreu no grupo tratado com 100 mg/kg, no entanto, a redução foi observada nas 2ª, 3ª, 4ª e 5ª horas em comparação com o grupo controle, com redução também  65%. Usando-se 50 mg/kg foi observada uma redução significativa de 36% do edema de pata nas 2ª, 3ª e 4ª horas quando comparado ao grupo controle. O limiar nociceptivo mecânico dos animais tratados o emulgel contendo FHEX, na dose de 100 mg/Kg, aumentou significativamente, em até três vezes na 3ª hora, quando comparado com o grupo veículo. Também, houve um aumento do limiar nociceptivo mecânico dos animais tratados com 50 e 200 mg/kg de FHEX, porém não significativo nas horas observadas quando comparado com o grupo veículo. Conclui-se que o emulgel formulado com FHEX de Samanea tubulosa (Benth) apresenta-se dentro das caracteristicas físicas e organolépticas compatíveis com ums formulação semi-sólida para uso tópico, assim como atividade anti-inflamatória e antinociceptiva.

O diabetes é um distúrbio do metabolismo cuja principal característica é a hiperglicemia crônica, que resulta de defeitos na secreção e/ou na ação da insulina. Um grupo de compostos naturais que tem se mostrado promissor na pesquisa sobre o tratamento da doença são os monoterpenos, dos quais destacam-se o R-(+)-Limoneno e o (–)-Carveol. O R-(+)-Limoneno vem sendo estudado para comprovação de seus efeitos hipoglicemiantes e antioxidantes no tratamento da diabetes tipo 1 (DT1), ao passo que sobre o (–)-Carveol os estudos são ainda incipientes. Este estudo objetiva analisar a relação estrutura-atividade e avaliar os efeitos do R-(+)-Limoneno e do (–)-Carveol sobre os parâmetros metabólicos e vasculares em modelo experimental de DT1. No Capítulo I os monoterpenos, enquanto agentes antidiabéticos, foram pesquisados através da avaliação de estudos recentes in vitro e
in vivo relatados na literatura científica. Foram coletados dados por meio das bases de dados especializadas PubMed, Scopus, Web of Science e Science Direct entre os anos de 2014 e 2022. No Capítulo II pesquisou-se a literatura sobre o diabetes e a aplicabilidade de produtos naturais no seu tratamento, enfatizando especificamente a atividade dos monoterpenos R-(+)-Limoneno e (–)-carveol. Foi realizada uma revisão narrativa, agrupando os artigos selecionados que tratavam da fisiopatologia do diabetes e do uso dos referidos monoterpenos como antidiabéticos. O estudo in silico descrito no Capítulo III investigou as propriedades físico-químicas, farmacocinéticas, farmacodinâmicas e toxicológicas do R-(+)-Limoneno e do (–)-Carveol, através de predições e docking molecular. No estudo ADMET ambos os monoterpenos foram aprovados como candidatos a fármaco. No teste de docking molecular foi verificado que o (–)-Carveol e o R-(+)-Limoneno apresentaram afinidade de ligação com os alvos antidiabéticos cotransportador de sódio-glicose 2 (SGLT2) e alfa glicosidase (AG), com destaque para a maior afinidade de (–)-Carveol para estes alvos. No Capítulo IV foi realizado um estudo in vivo para avaliação dos efeitos do R-(+)-Limoneno e do (–)-Carveol sobre o DT1 em ratos induzidos por STZ. O R-(+)-Limoneno e o (–)-Carveol demonstaram efeito hipoglicemiante, anti-glicação, hepato e vasoprotetor, além de um incremento nas defesas antioxidantes pesquisadas. Entrentanto, (–)-Carveol apresentou resultados mais expressivos, principalmente no que se refere à ação vasoprotetora. Em conjunto, os resultados obtidos nos estudos in silico e in vivo habilitam os monoterpenos pesquisados como potenciais candidatos a fármacos antidiabéticos multialvo.

A espécie Lutzomyia longipalpis é considerada de importância na transmissão da
leishmaniose visceral. A criação de flebotomíneos em laboratório é de difícil manutenção ou
baixa produtividade. Tentativas ainda são incertas, observadas altas taxas de mortalidade que
não acontecem em seu habitat natural, principalmente em suas fases imaturas. Este estudo
tem como objetivo principal desenvolver estratégias e tecnologias para otimizar colônias de
L. longipalpis. Testes de atrativos sintéticos para viabilizar as capturas de flebotomíneos, a
escolha de uma boa dieta para larvas, alimentação sanguínea que garanta a vitelogênese,
alimentação de insetos adultos com carboidratos para assegurar as atividades, são
fundamentais como estratégias para o estabelecimento da colônia. Para isso, foi utilizado um
feromônio sintético em conjunto a armadilha tipo CDC, foram testados quatro tipos de dietas
para larvas, dieta artificiais de sangue bovino, soro, e dietas artificiais em alimentador
artificial para insetos adultos e por fim utilizou-se mel natural e frutas para testar a
preferência alimentar por carboidratos para insetos adultos. O feromônio sintético com e
armadilha CDC e sem fonte de energia, não obteve bons resultados de capturas de
flebotomíneos. Com a alimentação de larvas, a dieta tradicional composta por fezes de
coelho, dieta de coelho e fígado bovino, já usada na rotina, obteve melhores respostas. Na
alimentação com alimentador artificial, usando membrana de pinto, o sangue bovino mostrou
melhor resultados que as proteínas artificiais. Na alimentação com carboidratos o mel natural
também usado na rotina da colônia foi a melhor escolha, a alimentação com frutas não
garantiu muitos dias de sobrevivência dos insetos. Considerando todos os testes realizados
durante todo o trabalho, embora bastante promissores, pode-se concluir que ainda são
necessários mais testes para o aprimoramento da colônia.

Mesalazina (MSZ) é um fármaco anti-inflamatória para tratamento das Doenças Inflamatórias Intestinais (Colite Ulcerativa e Doença de Crohn), que acomete principalmente o cólon. Este fármaco tem como fatores limitantes a baixa absorção no cólon e alta absorção sistêmica que favorece efeitos adversos. Este estudo se propôs a encapsular MSZ em nanopartículas obtidas de polímeros naturais não-tóxicos, biocompatíveis, biodegradáveis e mucoadesivos, sendo elas a Goma do cajueiro Acetilada (NP-GCA), um polissacarídeo extraído do tronco da árvore Anacardium Ocidentale, purificadoe modificado e a Zeína (NP-ZN), proteína encontrada no milho classificada no grupo das prolaminas. As NP foram sintetizadas pelo método de Diálise (NP-GCA) ou Dessolvatação (NP-ZN) seguida por secagem em liofilizador ou mini spray-dryer, respectivamente, variando as proporções polímero-fármaco no momento da síntese. As NP-GCA-MSZ apresentaram tamanho 273±6,76nm, índice de polidispersão (IPD) 0,10±0,02 e potencial zeta -43,2±8,15mV e as NP-ZN-MSZ apresentaram tamanho 266,6±52 nm, IPD 0,14±1.1 e Potencial zeta -36,4±1.5 mV o que sugere uniformidade e estabilidade coloidal das NP. A quantificação de MSZ nas NP foi realizada através de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) onde NP-GCA-MSZ (10:1) demonstrou eficiência de encapsulação (EE) 99% edrug-loaded24μg/mL e NP-ZN-MSZ (1:20) EE 45% edrug-loaded43,8μg/mg de NP. Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) demonstraram morfologia esférica com variação de tamanho de 240 a 500nm (NP-GCA-MSZ) e 220 a 400nm (NP-ZN-MSZ). EspectroscopianoInfravermelhoporTransformadadeFourier(FTIR)nãomostraram espectros do fármaco nas NP em relação a mistura física o que sugere e confirma a encapsulação do fármaco. As análises termogravimétricas (TGA) demonstraram Estabilidade térmica das NP-ZN-MSZ até 300°C e ausência de pico endotérmico, que indica estado amorfo nas nanopartículas. Difração de Raio X (DRX) demonstrou que a incorporação do fármaco em nanopartículas poliméricas amorfas de NP-GCA torna-o mais estável ao reduzir a sua cristalinidade. Estudos de liberaçãoin vitrodemonstraram gastrorresistência, com baixa liberação após 2h em pH 1,2, e a mudança para pH 6,8 durante 4h aumentou a liberação para 62,08 ± 6,03 das NP-GCA e 54,83 ± 1,30% das NP-ZN que se manteve em pH 7,4, onde observa-se liberação sustentada do fármaco 95,61 ± 3,25% NP-GCA-MSZ em 24h, e 97,67 ± 0,32% NP-ZN-MSZ em 120h. Estudos de citotoxicidadein vitrousando a linhagem de células CT26.WT (carcinoma de cólon murino)onde diferentes concentrações de NPs foram expostas por 72h demonstrou ausência de citotoxicidade basal até 131μg/mL NP-GCA (com ou sem MSZ), ou 500μg/mL (NP-ZN). O estudo de estabilidade coloidal em 120 dias não mostrou diferença de tamanho, IPD e potencial zeta, indicando NPs com menor tendência a formar agregados.TaisNPsfornecemevidênciaspromissorascomoveículoparaaliberação sustentada de Mesalazina no cólon com foco na otimização do Tratamento das Doenças Inflamatórias Intestinais.

Os fungos endofíticos são fontes de produtos naturais com atividades biológicas para formulações farmacêuticas. Dentre estes, a citrinina, isolada do fungo endófito Penicillium citrinum, se destaca por possuir atividades citotóxicas, antioxidantes e neuroprotetoras, porém, com conhecidos efeitos adversos, tais como, nefrotoxicidade, falta de seletividade e hepatotoxicidade. Nesse sentido, a utilização de nanotecnologia pode ser uma ferramenta interessante para melhoria das atividades farmacológicas de produtos naturais. Assim, o estudo objetivou o desenvolvimento de carreadores nanoestruturados tipo nanolipossomas contendo citrinina (LP-CIT) e sua avaliação nanotoxicogenética, antioxidante/oxidante e antitumoral em estudos in vitro (diferentes células tumorais humanas) e modelos in vivo para câncer de mama, com monitoramentos comportamentais, bioquímicos, hematológicos, histopatológicos e genotóxicos. No primeiro capítulo, os nanossistemas foram preparados e caracterizados utilizando os seguintes parâmetros: aspectos macroscópicos, pH, diâmetro de partículas, índice de polidispersão, potencial zeta e percentual de incorporação da molécula no carreador nanométrico. As avaliações in vitro, com o intuito de verificar citotoxicidade, foram realizadas utilizando-se o ensaio de MTT com as linhagens normais (L929 - fibroblastos) e tumorais (CT26 – carcinoma de cólon, S180 – sarcoma murino, MCF7 e MDA-MB-231 – câncer de mama humano) e por fim, a avaliação antioxidante/oxidante com Saccharomyces cerevisiae. Nanoformulações contendo citrinina, cujos parâmetros avaliados apresentaram relevantes resultados de tamanho de partícula, distribuição, carga de superfície e alta taxa de incorporação do ativo no carreador (92,8%) fazem desses nanossistemas uma opção para incorporação deste derivado fúngico para testes in vitro e in vivo. Citrinina lipossomal bem como a citrinina forma livre (não estruturada) apresentaram efeitos citotóxicos para todas as linhagens celulares avaliadas, com resultados mais eficientes de citotoxicidade e seletividade para a citrinina nanoestruturada, demonstrados pelo coeficiente de citotoxicidade e índice de seletividade tumoral, respectivamente. Além disso, tanto a citrinina livre, mesmo nas concentrações mais baixas, como nas preparações de citrinina lipossomal apresentaram capacidade antioxidante demonstrada pela capacidade protetora e reparadora diante dos danos oxidativos do peróxido de hidrogênio. No segundo capítulo, o câncer de mama em Mus musculus foi induzido pelo DMBA (6 mg/Kg, v.o.). O câncer de mama foi caracterizado como carcinoma mamário invasivo pela análise histopatológica. Foram utilizadas nos testes antitumorais, a citrinina livre (2 μg/Kg-1, v.o.), ciclofosfamida (25 mg/Kg-1, i.p.) como controle positivo e a LP-CIT nas concentrações de 2 e 6 μg/kg. A indução do câncer de mama ocorreu em onze semanas e a terapia com citrinina livre, Ciclofosfamida e LP-CIT em 3 semanas. Nenhuma alteração comportamental, hematológica e bioquímica foi observada quando os animais foram tratados com LP-CIT, porém, a citrinina livre reduziu o número de monócitos e causou hepatotoxicidade. Tanto citrinina livre como LP-CIT foram capazes de reduzir significantemente o tamanho do tumor quando comparados ao tratamento com DMBA, sendo os resultados mais significativos com a citrinina lipossomal. Estudos adicionais mostraram que a citrinina livre induziu efeitos genotóxicos em células tumorais de mama, fígado, medula óssea e células sanguíneas, porém, quando na forma LP-CIT demonstrou melhores resultados, devido menor efeito genotóxico observado diante das células normais. Ademais, os mecanismos de reparo de DNA das células sanguíneas tiveram a capacidade de diminui os danos causados pela CIT e suas nanoformulações, ao contrário do que ocorreu com os danos induzidos pela CPA nessas células. Ainda para efeitos toxicogenéticos, a CPA induziu efeitos mutagênicos pela formação de micronúcleos em células tumorais, fígado e medula óssea, porém, a CIT livre e suas nanoformulações não causaram tal efeito clastogênico, com exceção para a CIT-LP (6 ug/mL) em células neoplásicas de mama. As duas concentrações da citrinina lipossomal (2 e 6 μg/kg) apresentaram atividade anticâncer possivelmente relacionadas com a capacidade citotóxica e genotóxica demonstrada no presente estudo. Assim, a citrinina é uma molécula promissora para uso em sistemas de liberação de ativos farmacêuticos, sendo a nanoestruturação do tipo lipossomal uma forma viável para aumentar a capacidade antitumoral e reduzir os efeitos adversos do metabólico fúngico em questão.

A periodontite é uma doença inflamatória crônica resultante do acúmulo de placa bacteriana no sulco subgengival, com consequente degradação dos tecidos periodontais e reabsorção óssea. Pesquisas utilizando espécies botânicas para o tratamento da doença vêm recebendo destaque na literatura devido custos reduzidos e menor apresentação de efeitos colaterais. Uma planta que tem potencial para ser utilizada na terapêutica da periodontite é a Libidibia ferrea (popularmente conhecida como Jucá) pois há relatos que apresenta atividades contra doenças orais. Portanto, este trabalho objetiva avaliar as atividades do jucá e seu potencial terapêutico do na periodontite induzida em ratos. Foram realizados os seguintes ensaios in vitro: teste de citotoxicidade; avaliação das atividades antibacteriana, utilizando Staphylococus aureus, Enterococus faecalis e Streptococus mutans; atividade antibiofilme; antioxidante, ABTS e DPPH, e análise fitoquímica. A atividade anti-inflamatória, foi observada por meio da avaliação clínica, dosagem de mieloperoxidase(MPO) e análise da interleucina 1-β e do fator de necrose tumoral- α. In vivo, foram utilizadas 70 ratos Wistar divididos em 7 grupos de 10 animais cada: Controle, Periodontite 20 dias, periodontite e clorexidina, periodontite e gel neutro, periodontite e gel de Jucá a 2,5%, periodontite e gel de Jucá a 5% e gel de jucá a 7,5%. A indução da periodontite foi realizada com aplicação de fio de nylon ao redor dos primeiros molares inferiores do animal. Após 20 dias de tratamento, foi realizada a análise clínica periodontal. Foram coletadas do plexo retro-orbital dos animais amostras de sangue para as dosagens bioquímicas dos marcadores de lesão hepática, lesão renal. Em seguida, os animais foram pesados e eutanasiados. Foram armazenados os tecidos gengivais, hepático e renais para análises histológicas e bioquímicas de glutationa (GSH), malondialdeído (MDA), nitrato (NO3), nitrito (NO2) e dosagens de MPO da gengiva. As mandíbulas foram coletadas e armazenadas para a análise da estrutura do osso alveolar por histomorfométria da região de furca dos primeiros molares inferiores dos animais. Por fim, foi feita a análise estatística. As análises realizadas com o extrato demonstraram bons resultados para as atividades antibacteriana, atividade antioxidante e antibiofilme. As análises clínicas feitas com o gel obtiveram resultados significantes sobre o tecido periodontal, os grupos tratados quando comparados com o grupo periodontite apresentaram pouca alteração periodontal. Indicamos a realização de outros testes para a confirmação da atuação do extrato de L. ferrea sobre os periodontopatógenos. Especialmente realizando o teste de atividante antibiofilme de amostras retiradas diretamente dos ratos com indução de periodontite e análise do fluído subgengival.

O câncer de mama é uma doença que mais acomete as mulheres em todo mundo, isso ocorre tanto em países de primeiro mundo quanto em países em desenvolvimento. No Brasil, para o biênio 2020 a 2021, foram estimados 66.280 casos novos de câncer de mama e cerca de 15.000 mortes de mulheres pela doença, com um risco estimado de 43,64 casos novos para cada 100 mil mulheres. Entretanto há estratégia para se reduzir a mortalidade por câncer de mama. A mamografia é um exame radiológico que gera uma imagem em tons de coloração cinza da mama, que o especialista analisa e identifica de forma visual a localização da lesão, sendo este tipo de exame o padrão para detecção precoce deste tipo de neoplasia, o que facilita a identificação na sua fase inicial, em particular pela sistematização internacional para avaliação mamária conhecida por Breast Imaing Reporting and Data System (BI-RADS), que é de suma importância na abordagem terapêutica. Todavia, trata-se de um sistema de classificação de imagens de lesões mamográficas que apresenta um resultado de falso negativo em cerca de 15%, taxa que pode ser reduzida por sistemas computacionais utilizando as redes neurais. A presente pesquisa desenvolveu um método de redes neurais para classificar nódulos mamários no padrão BI-RADS nas categorias 4 e 5. Esta tese foi estruturada em dois capítulos: O capitulo I realizou uma busca de anterioridade dos registros de programa de computador que faz uso de redes neurais artificiais aplicadas ao diagnóstico de câncer de mama, por meio de uma prospecção tecnológica, a qual foi realizada em três bases de depósitos de patentes: European Patent Office (EPO), World Intellectual Property Organization (WIPO) e United States Patent and Trademark Office’s (USPTO). Utilizando as seguintes combinações de palavras-chave: software AND image processing, software AND breast câncer, software AND BI-RADS, software AND neural networks, software AND image processing AND breast cancer AND BI-RADS AND neural networks. As bases de depósitos de patentes que mais se destacaram foram WIPO e USPTO. Encontrou-se um total de 24 patentes, sendo 22 na WIPO e 2 na USPTO, relacionadas a imagens de câncer mamário e sistema BI-RADS. Ressalta-se que a busca feita na base de dados EPO não retornou registros relacionados ao tema pesquisado, demostrando a necessidade de desenvolvimento de software para o diagnóstico do câncer de mama. O capítulo II exibe as técnicas de redes neurais para desenvolver uma ferramenta computacional capaz de classificar lesões das categorias 4 e 5 do padrão BI-RADS. Os resultados adquiridos pelo software, observaram que o melhor classificador no que diz respeito à taxa de acerto acurácia, foi o Deep Learning, atingindo um percentual de 82,60%, o Support Vectors Machine - SVM teve um percentual de 73,97%. Isto demostra que as técnicas de redes neurais utilizadas no projeto do software mostram uma eficácia na tarefa de classificação das lesões.

Apesar das propriedades promissoras dos óleos essenciais (OEs), sua alta volatilidade, baixa solubilidade em água e a suscetibilidade à degradação por agentes físicos e químicos, comprometem sua atividade biológica e fomenta a necessidade de novas formas de aplicação, como encapsulação para garantir a proteção e liberação controlada dos componentes ativos. Nesse contexto, se propondo a melhorar as características físicoquímicas dos OEs de cravo (Syzygium aromaticum L.; 85,93 % de eugenol e 12,19% de βcariofileno) e canela (Cinnamomum verum J. Presl.; 86,50 % de eugenol e 3,85 % de βcariofileno) e visando aplicações biotecnológicas, desenvolvemos nanoemulsões do tipo óleo em água estabilizadas com polissacarídeo de goma de caju (GC) e utilizando um método ultrassônico. As formulações sintetizadas apresentaram eficiência de incorporação em torno de 50% e boa estabilidade em estocagem por 6 meses, tamanho de nanométrico (236,6±2,13 para nanoemulsão de cravo e 310±2,31 nm para canela), morfologia esférica em micrografia obtida por Microscopia de Força Atômica (MFA) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET). Além disso, os nanoformulados revelaram um perfil lento de liberação in vitro por difusão não-Fickiana, de acordo com o modelo matemático de Korsmeye-Pepas (1981), e melhoram (p<0,05) a atividade antioxidante em comparação com os OEs livres (método ABTS: nanoemulsão do cravo com TEAC de 202,40±0,10 µM/ml de óleo incorporado no sistema e nanoemulsão de canela TEAC de 201,70±0,02 µM/ml, método DPPH: CI50 de 11,65±6,10 µg/ml para nanoemulsão de cravo e 13,22±8,52 µg/ml para nanoemulsão de canela) e antibacteriano contra Staphylococcus aureus ATCC 29213 (CIM em 400 µg/ml e MBC em 800 µg/ml), Staphylococcus aureus resistente à meticilina COL e Staphylococcus epidermidis (MIC e MBC em 800 µg/ml). As nanoemulsões também mostraram atividade antifúngica contra Candida albicans e não albicans (MIC em 357 a 780 µg/ml). Em sua maioria, as nanoformulações mostraram um baixo CI50 no ensaio de citotoxicidade em células tumorais e não tumorais, principalmente a nanoemulsão de OE de cravo que apresentou resultados mais potente, com o menor valor de CI50 em 22,08 µg/ml para a linhagem celular de leucemia promielocítica HL60. Todos estes resultados apontam como promissora a formulação proposta para aplicação no setor alimentício, sanitário e farmacêutico, uma vez que emprega ingredientes com eficácia conhecida e baixo custo.

O nistagmo é o movimento involuntário dos olhos de forma rítmica e oscilatória, relacionado
com a investigação de diversas disfunções do sistema vestibular. A investigação do nistagmo
pode ser realizada por diversos sistemas, dentre estes, a vectoeletronistagmografia e a
videonistagmografia. Embora estes exames sejam os mais conceituados para o diagnóstico, eles
necessitam de análise do médico mediante aos dados fornecidos e o examinador dispende de
um período para a preparação do paciente. Diante disso, o este estudo propõe apresentar um
sistema completo de diagnóstico da vestibulopatia periféria com base em vetores de
características que apresentam padrões de movimento ocular denominado Smart
Nistagmography. Para esta proposição, foram recrutados 22 participantes saudáveis e 22 com
vestibulopatia periférica e submetidos a vectoeletronistagmografia a fim de gerar um conjunto
de dados representativos ao pré-processamento de dados e desenvolver o modelo de
inteleligência artificial. O sistema obteve uma acurácia de 96% para o modelo, o que demonstra
uma eficiência dos procedimentos para o diagnóstico da disfunção vestibular. Conclui-se que o
sistema proposto é capaz de classificar as disfunções vestibulares, com diagnóstico confiável.

O aplicativo desenvolvido é um software de simulação de farmacocinética em anestesia geral (para Propofol, Remifentanil e Sevoflurano) que envolve a entrada de dados (nome, sexo, idade, peso e altura do paciente adulto), processamento, armazenamento e saída de informações médicas com interface de listagem de dados das simulações realizadas, bem como, da geração de gráficos interativos sobre as informações processadas. O aplicativo possui uma tela de listagem de dados com um menu inicial no qual é possível encontrar as opções para criar uma nova simulação e uma outra opção para limpar os dados previamente armazenados no banco de dados, além de listar os casos processados pelo aplicativo. Há, também, uma tela de entrada de dados no campo para cadastros de informações. Caso essa tela seja invocada por algum item previamente cadastrado, esses campos serão automaticamente preenchidos com as informações armazenadas no banco de dados local. Nesta tela há um botão que gera a simulação desejada, com a opção de detalhar o gráfico das informações geradas. O aplicativo é compatível com dispositivos móveis que utilizam a plataforma do Sistema Operacional Android.

O número de pessoas que apresentam debilidade motora é cada vez maior nos membros
superiores. Estas enfrentam deficiências funcionais, dependendo de terceiros para realizar
suas atividades de rotina, o que impacta negativamente na sua qualidade de vida. A
reabilitação motora é caracterizada por uma rotina diária de deslocamento para as clínicas,
exercícios físicos repetitivos e um lento processo de recuperação funcional, o que torna o
tempo de tratamento muito longo, levando o paciente à falta de compromisso e abandono do
tratamento. Nesse contexto, soluções de gameterapia têm sido utilizadas para a reabilitação
motora, em que se utilizam cenários interativos de jogos sérios para potencializar a
humanização do tratamento e a experiência do paciente durante a execução de exercícios de
recuperação das funções motoras. Este trabalho tem como objetivo apresentar o Rehabilite
Game, um jogo sério baseado em gestos para reabilitação motora de membros superiores, a
partir do uso de modelos de visão computacional e aprendizado de máquina integrados a
tecnologias com ampla inserção social, como câmeras embutidas em notebooks,
computadores desktops ou integradas em TVs. Para implementação do jogo sério, foram
utilizadas as tecnologias web, HTML, CSS e JavaScript, incorporando a biblioteca
TensorFlow e o pacote MediaPipe para controlar os movimentos do paciente nos cenários do
jogo. Um protocolo experimental com 33 participantes (21 fisioterapeutas e 12 pacientes),
com uso do User Experience Questionnaire (UEQ) para avaliação de usabilidade e
experiência do usuário, aponta que o nível de satisfação com o jogo é positivo, com uma
pontuação NPS excelente (ou seja, maior ou igual a 7,5) em 85,7% dos fisioterapeutas e 100%
dos pacientes. Em análise comparativa com outros 452 estudos, a solução apresenta níveis,
bom e excelente, para todos os critérios avaliados. O jogo sério desenvolvido vem contribuir
para tornar a gameterapia uma técnica presente e viável em clínicas de reabilitação e
ambientes domiciliares, uma vez que sua inserção não depende de custos associados com a
tecnologia ou adaptações de infraestrutura no ambiente.

Soluções não invasivas de avaliação postural têm sido utilizadas para auxiliar
profissionais no processo avaliativo e no monitoramento da progressão de desvios
posturais. Diferentes ferramentas manuais e baseadas em visão computacional, incluindo
aplicações móveis baseadas em imagens e sensores, ajudam a otimizar o processo de
avaliação postural. No entanto, o desempenho dessas soluções pode apresentar limitações
na demarcação manual os pontos anatômicos, dependentes da experiência do examinador
durante o processo de marcação dos pontos anatômicos. Diante desse contexto, o objetivo
do presente estudo foi desenvolver e validar um sistema móvel de avaliação postural
baseado em imagem (NitLab Measurer – NLMeasurer). NLMeasurer é um aplicativo
móvel para profissionais de saúde capaz de registrar avaliações individuais que são
compostas pela identificação de marcos anatômicos e medidas de ângulo de alinhamento
corporal, identificados a partir de imagens corporais em vista frontal. Este aplicativo foi
desenvolvido usando IONIC Framework e aproveitando a interface de programação
PoseNet, um modelo de visão computacional fornecido pelo TensorFlow.js. Isso inclui a
função singleEstimatePose, usada para estimar a pose humana de uma imagem, usando
marcos anatômicos como referência. O NLMeasurer foi comparado a um software de
biofotogrametria já validado, o Software de Avaliação Postural (SAPO) e os resultados
das análises revelaram que os métodos foram concordantes. Além disso, houve boa
confiabilidade inter e intravaliador para as medidas realizadas, exceto para a ângulo da
cabeça e do tornozelo, nas análises das fotos em que os participantes não estavam usando
marcadores externos. Nesse contexto, entende-se que o NLMeasurer é uma promissora
solução para avaliação postural de forma automatizada, no entanto, orienta-se o uso de
marcadores externos nas orelhas e tornozelos, a fim de aumentar a confiabilidade das
avaliações.

O Omeprazol é um fármaco da terapêutica gástrica, e com uso prolongado pode acarretar instabilidade genética. O estudo objetivou avaliar os efeitos toxicogenéticos do Omeprazol (genotóxicos, apoptóticos, oxidativos e tóxicos) em células de mucosa bucal, estomacal (corpo e antro) e sanguíneas, de pacientes com gastrite, bem como, suas correlações com fatores de risco para instabilidade genética. Participaram da pesquisa 137 pacientes submetidos a endoscopia digestiva alta, atendidos no Hospital Getúlio Vargas, Teresina – PI, no período de maio a outubro de 2017, os quais foram separados em grupos: sem gastrite (26 pacientes); gastrite (23 pacientes); gastrite + H. pylori (16 pacientes); sem gastrite + omeprazol (22 pacientes); gastrite + omeprazol (25 pacientes); gastrite + H. pylori + omeprazol (25 pacientes). Foram aplicados questionários de saúde. A avaliação genotóxica e apoptótica foi feita com o Ensaio Cometa, e a tóxica em sangue periférico. O Omeprazol induziu genotoxicidade em células do antro, corpo e mucosa bucal comparado ao grupo sem gastrite, sem diferenças em relação a coinfecção com H. pylori. Esses danos podem ser atribuídos a estresse oxidativo, como observado pelo aumento da superóxido dismutase e catalase e pelas correlações estatísticas dessas enzimas com aumento de danos ao DNA, bem como com o uso de fármacos, substâncias químicas e etilismo. Em células sanguíneas não foram observados efeitos tóxicos. Os resultados apontam que o OME induz instabilidade genética, e que o biomonitoramento clínico é uma estratégia para a segurança terapêutica em relação aos riscos de câncer de estômago.

A leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose associada a diversas manifestações clínicas que podem comprometer órgãos internos, em especial, fígado, baço, gânglios linfáticos e medula óssea, podendo ocasionar morte. Apesar da exposição masculina ser igual ou menor, quando comparada à feminina, a predisposição dos homens para a doença é evidente, elevando-se no período pós-puberdade. As diferenças sexuais na função imunológica estão diretamente relacionadas aos níveis hormonais de esteroides circulantes, as quais determinam o tipo de exposição, a patogenicidade, a infectividade de micro-organismos e a manifestação clínica da doença. Neste sentido, considera-se que a ação da testosterona e dihidrotestosterona (DHT) podem modular a resposta imunológica, apresentando efeitos sobre os mecanismos de defesa próinflamatórios contra as infecções parasitárias. Assim, este estudo objetivou avaliar os níveis entre testosterona total (TT) e DHT e a gravidade da leishmaniose visceral em homens. No capítulo 1, realizou-se revisão bibliográfica sobre o papel do sexo e dos hormônios sexuais na resposta imune das doenças infecciosas, com ênfase nas leishmanioses. Apresentaram-se resultados de artigos in vivo, in vitro e em humanos. Concluiu-se que os andrógenos estão associados a efeitos imunossupressores para maioria das infecções, enquanto os esteroides apresentam características imunomoduladoras. O capítulo 2 apresenta estudo longitudinal com 134 participantes (I - 113 doentes e II - 21 saudáveis), em que foram avaliadas variáveis epidemiológicas, manifestações clínicas, probabilidade de morte e concentração sérica dos hormônios. A idade média dos doentes foi de 36,5 anos. Os principais sintomas relatados foram febre (88,5%), esplenomegalia (87,3%), perda de peso (73,5%), fadiga (73,5%), hepatomegalia (65,7%) e palidez cutânea (61,1%). Sete pacientes (6,2%) evoluíram para óbito. As pessoas com a doença apresentaram menor concentração de TT (µ=502,2 ng/dL, p<0,001) e concentrações mais elevadas de DHT (µ=709,6 pg/mL, p=0,022). Os níveis séricos de DHT foram mais baixos nos doentes que apresentaram sintomas como vômitos (p=0,021), diarreia (p=0,025), dispneia (p=0,005) e sangramento gengival (p=0,049), além de apresentarem relação significativa com a probabilidade de morte acima de 10% (p<0,001). Sugere-se que o elevado nível de DHT encontrado na LV seja consequência da hipoalbuminemia, típica da doença, resultando em maior concentração de testosterona livre e mais síntese de DHT. Os dados sugerem que o DHT pode justificar a atenuação do quadro clínico e da gravidade, a maior mortalidade de idosos e a maior incidência de LV em homens adolescentes e adultos. O capítulo 3 teve como objetivo associar os níveis séricos das citocinas com a TT, DHT manifestações clínicas e probabilidade de morte na LV. Os homens com LV apresentaram maior concentração de IL-10, IL-6 e IFN-γ com diferença significativa em comparação aos saudáveis (p<0,001). Os sintomas vômitos, petéquias, epistaxe e hepatomegalia foram associados à algumas das citocinas. A concentração de IL-6 em níveis elevados apresentou associação significativa (p=0,035) com a probabilidade de morte ≥10%. A correlação entre os hormônios sexuais masculinos e as citocinas mostrou correlação negativa entre TT e DHT com IL-8. Considerando que pacientes com LV, mesmo que em estágios iniciais da doença já apresentam níveis elevados de IL-6, esta interleucina mostra a importância de considera-la na pré-disposição de morte para antecipar terapias e o não agravamento da doença.

A espécie Megathyrsus maximus (Jacq.) B. K. Simon & S.W.L. Jacobs é uma forrageira tropical exótica de ambientes com qualidades diversas que possuem atributos para serem adaptadas a ambientes como região do semiárido. O objetivo desse trabalho é a caracterização da coleção de acesso de Megathyrsus maximus da Embrapa Caprinos e Ovinos e o Uso de ferramentas biotecnológicas para auxiliar na adaptação e produtividade desses acessos em ambientes com pluviosidade irregular como em ambiente semiárido. Para a caracterização genética foram realizados dois experimentos um em campo aberto ourto em casa de vegetação, 24 acessos foram estabelecidos no campo experimental da Fazenda Três Lagoas, área pertencente à Embrapa Caprinos e Ovinos em Sobral, Ceará, Brasil. Para a caracterização morfoagronômica foram avaliados a produtividade e a qualidade nutricional dos 24 acessos por meio de 22 caracteres quantitativo, o delineamento foi em blocos completos casualizados com três repetições. Os dados correspondentes foram estatisticamente investigados empregando-se a análise de componentes principais, a análise de agrupamento, pelo método aglomerativo de UPGMA, e a análise de variância (univariada), associada ao critério de Scott Knott para comparar as médias dos grupos identificados. Foram estabelecidos sete grupos de acessos similares. Para a caracterização genética, realizou-se experimento em casa de vegetação pertencente a unidade Embrapa Caprinos e Ovinos, sementes de 24 acesso foram semeados em bandejas com solo autoclavado, temperatura ambiente de 28ºC, folhas frescas de plantas na fase jovem foram coletadas e mantidas em sacos de papel com sílica para desidratar. Após a desidratação, foram mantidas em local seco, fresco e ao abrigo de luz até o momento da extração de DNA. Foram avaliadas presenças de locus polimórficos por meios de primers para cpDNA e rnDNA. Na caracterização genético-molecular foram considerados 24 acessos da coleção, utilizando-se nove primers microssatélites (SSR), a detecção dos fragmentos de DNA obtidos via PCR (reação da polimerase em cadeia) foi feita por meio da técnica de eletroforese. Concluiu-se que os genótipos possuem potencial para a utilização nos sistemas agrícolas da região semiárida, com diferentes porte e potencial agronômico para a produção de biomassa, destaque para o acesso PM37, por apresentar alta Rf/c, maior capacidade de rebrota e persistência.Identificou-se polimorfismo em diferentes regiões do DNA da espécie, os loci identificados pelos diferentes tipos de marcadores de DNA cloroplastídico e nuclear, possuem relevância para a pesquisa. A análise de filogenética apresentou diversidade entre os indivíduos, indicando potencial de adaptação da espécie em ambientes diversos.

No Brasil, toneladas resíduos sólidos são produzidos, entre eles, os resíduos de podas de arvores, entre elas a mangueira (Mangifera indica). A mangueira é uma fonte de baixo custo para obtenção de celulose, um polímero natural muito utilizado na síntese de compósitos adsorventes. Os compósitos a base de celulose podem ser utilizados no tratamento primário quimicamente assistido (CEPT ou CAPS) de efluentes. Os CEPTs são bastante eficientes na remoção de poluentes e possuem aplicabilidade no tratamento de efluentes contaminados que ocasionam inúmeros problemas ambientais. Diante o exposto, este trabalho tem por objetivo desenvolver a partir da celulose de podas de Mangifera indica, melamina e sílica um compósito de baixo custo com aplicações para o tratamento de efluentes. Para tanto, o compósito foi sintetizado com celulose, melamina e sílica. Para aplicação na remoção de corantes foi feito o planejamento composto central. O compósito também foi testado na remoção de ferro e amônia em chorume. O FTIR evidenciou que o compósito sintetizado apresentou a banda característica para a melamina em 815 cm-1 . O MEV e o MET mostraram que as fibras de celulose da Mangifera indica são uniformes, altamente rugosas. O EDS do compósito indicou a presença de N2 proveniente da melamina, Si e Na oriundos do catalizador. O TG mostrou que o compósito é termicamente mais estável que a celulose. O potencial zeta revelou que a partir do pH 5 o compósito apresenta maior estabilização e incremento do caráter aniônico. A massa de compósito de 60 mg e tempo de 30 minutos proporcionou a remoção de 88,6 ± 3,5% da concentração inicial do azul de metileno. O estudo do pH mostrou que acima de pH 5 o compósito é mais eficiente. O processo de adsorção do corante pelo material tem bom ajuste ao modelo de Langmuir (R2 = 0,9921). Cerca de 75,7% do ferro e 76,6% de nitrogênio amoniacal foi removido do chorume, com concentração final foi de 3,6 ± 0,1 e 23,5 ± 5,5 ppm, ambas, dentro dos parâmetros estabelecidos pelo CONAMA. O compósito é reutilizável com 69,1% de eficiência na segunda etapa. Nesse contexto, o compósito desenvolvido utilizando a celulose oriunda da madeira de poda da Mangifera indica foi eficaz na remoção do corante azul de metileno, apresentando-se como um material de baixo custo, biodegradável e eficiente com potencial para ser aplicado no tratamento primário quimicamente assistido de efluentes.

Conhecer para valorizar, para proteger e consequentemente gerar vantangens às sociedades humanas, com esse foco a presente pesquisa contribuiu com o setor da agropecuária quanto ao seu novo desafio que é produzir mais em áreas cada vez menores e com o mínimo de impacto ambiental e social. Desta forma, foi investigada a bioatividade do óleo fixo extraído das sementes da Annona coriacea Mart., espécie conhecida popularmente como “araticum”, pretence a família Annonaceae, a qual apresenta potencial uso em biotecnologia, e onde o gênero Annona tem sido o mais investigado para o desenvolvimento de novos produtos. Assim, o processo de obtenção do óleo foi otimizado e o perfil químico deste foi avaliado, bem como suas atividades carrapaticida, inseticida, fungicida, antimicrobiana, anticolinesterásica e citotóxica. Para estudo do processo adotou-se o planejamento fatorial 22 , definindo a avaliação da influência do solvente utilizado e o tempo de extração. A avaliação química foi realizada através de cromatografia gasosa acoplada a espectometria de massas, atividade oxidativa, análise termogravimétrica e espectroscopia de infravermelho por transformada de fourier. O óleo do “araticum” foi testado in vitro frente Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Tribolium castaneum, Neoscytalidium dimidiatum, Fusarium sacchari, Staphylococcus aureus, S. epidermides, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans e C. krusei, enzima acetilcolina e em macrófagos de camundongos. O planejamento fatorial indicou que a extração feita utilizando etanol 99,8% por um período de 4h é preferível e suficiente para conseguir resultados satisfatórios. Os principais constituintes identificados foram ácido palmitoleico (40,01%), ácido araquidônico (28,35%) e ácido linolênico (18,21%). O óleo foi considerado estável, pois atendeu o critério de exposição à programação de teste no Rancimat. A estabilidade do óleo extraído com etanol ocorreu até aproximadamente 25 °C, enquanto que o óleo extraído com hexano foi de aproximadamente 110 °C. Os dados espectrais mostraram que os óleos contém hidrocarboneto sp2 , hidrocarboneto sp3 , grupo carbonil, grupo alquenico e ligação éster, portanto pode ser confirmado como um triglicerídeo. O óleo fixo puro ou diluído em 20% de etanol mostrou-se promissor para o controle de carrapatos bovinos na concentração de 0,5%. Também mostrou- se inibidor da enzima acetilcolinesterase, com inibição variando de 37 a 84%. Apresentou concentração citotóxica moderada contra macrófagos de camundongos, o que dá segurança de uso desse óleo em células de mamíferos. Foi inativo contra bactérias gram-positivas, gramnegativas e fungos. Permitiu controles de crescimento micelial de N. dimidiatum nas cinco doses testadas. Não foi observado controle significativo contra F. sacchari, as doses 1, 2 e 3 apresentaram porcentagens baixas de inibição, enquanto as doses 4 e 5 apresentaram controle. No ensaio inseticida, o óleo, na maior concentração, matou todo os Tribolium castaneum, após 24 horas de exposição, enquanto a menor concentração apresentou o efeito tóxico mais baixo, durante as 48 horas. Pode-se concluir que o óleo fixo das sementes de “araticum” é um forte candidato ao desenvolvimento de biopesticidas e fármacos alternativos, entretanto, estudos adicionais são necessários para desenvolver formulações apropriadas e métodos de aplicações de biocidas e fármacos à base de A. coriacea contra pragas do setor pecuarista, de produtos armazenados e de fungos patogênicos.

A doença inflamatória intestinal (DII) compreende um espectro de doenças que se caracterizam por uma inflamação crônica do trato gastrointestinal (TGI) sem uma causa ou patógeno específico. Dentre estas DIIs encontra-se as a retocolite ulcerativa (RCU), na qual apresenta alterações nas concentrações de substâncias importantes durante o desenvolvimento do processo inflamatório intestinal. Além disso, há aumento de substâncias inflamatórias que atuam na via dos endocanabinóides (ECB), que são importantes para a proteção do cólon durante o desenvolvimento do processo inflamatório intestinal. Assim, experimentalmente algumas biomoléculas com potenciais terapêuticos como os polissacarídeos (PLSs) de vegetais, são estudados na tentativa da reversão da inflamação colônica. Uma fonte desses PLSs são as plantas medicinais, dentre as quais está inclusa a Morinda citrifolia Linn (noni). Assim, este trabalho objetiva analisar o efeito antiinflamatório do PLS do Noni na colite induzida por ácido acético em camundongos e observar se este mecanismo de ação se dá pela via farmacológica dos endocanabinóides. Foram usados camundongos swiss machos (25–30 g), divididos em grupos de 6 animais. A indução da colite foi realizada utilizando ácido acético (6%, 200 μL) e tratados i.p. com PLS do Noni nas doses de 0,1; 0,3; 3,0 mg/kg ou dexametasona (2,0 mg/kg, subcutânea – s.c.). Após isso, foram realizados ensaios experimentais para bloquear a ação dos receptores endocanabinóide CB1 e CB2 utilizando seus antagonistas AM 251 (3,0 mg/kg, i.p.) e AM 630 (1,0 mg/kg, i.p.), respectivamente. Os animais foram eutanasiados e uma amostra de 5 cm do cólon foi retirada para avaliação dos escores macroscópicos e microscópicos de lesão, peso úmido e análises bioquímicas onde foram verificados a atividade da enzima mieloperoxidase (MPO), níveis de glutationa (GSH) e malonildialdeídeo (MDA).Os grupos de animais que receberam apenas ácido acético intracolônico demonstraram um maior aumento do número de lesões inflamatórias intestinais apresentando aumentos significativos dos parâmetros inflamatórios macro e microscópicos, além de apresentar aumento significativo (p<0,05) do peso úmido do colón e da concentração de MPO no tecido intestinal, bem como apresentaram redução da formação de GSH e aumento nos níveis de MDA, citocina interleucina 1 - beta (IL1- β) e fator de necrose tumoral – alfa (TNF-α), concentração de óxido nítrico (nitrato/nitrito – NO3/NO2) e expressão de cicloxigenase-2 (COX-2) e óxido nítrico sintetase induzida (iNOS), quando comparado ao grupo salina. O tratamento com o PLS do Noni na concentração de 3,0 mg/kg reduziu significativamente os paramêtros inflamatórios (p<0,05) um melhor efeito na redução da lesão intestinal por diminuir a atividade da enzima MPO e dos marcadores de estresse oxidativo in vivo, citocinas (IL1- β e TNF-α), concentração de NO3/NO2 e expressão de COX-2 e iNOS, quando comparado ao grupo ácido acético. Preliminarmente, ainda foi visto uma possível participação dos receptores ECB, uma vez que após o seu bloqueio observou-se um aumento da inflamação do cólon do intestino. Os resultados mostram que o PLS do Noni na dose de 3,0 mg/kg reduz a inflamação no cólon causada pelo ácido acético, e seu efeito é provavelmente dependente da via dos receptores ECB.

Introdução. A manteiga extraída das sementes do fruto de Platonia insignis Mart. (Clusiaceae), apresenta dentre outras atividades, a capacidade antioxidante, gastroprotetora, neuroprotetora, imunomoduladora, leishmanicida, anti-inflamatória, além de ação vascular, aumentando a responsividade de preparações de artéria aorta à  acetilcolina de animais tratados com BBI. Assim, a manteiga da semente de bacuri (BBI) é um material promissor para o desenvolvimento de produtos farmacêuticos e para a produção de nanoestruturas farmacologicamente ativas, visto que possui uma complexa composição lipídica, permitindo a formação de sistemas emulsionados com núcleo sólido. Objetivo. Realizar investigação química e farmacológica da aplicabilidade da BBI ou suas frações polares no desenvolvimento de produtos farmacêuticos como Nanopartículas Lipídicas Sólidas. Material e Métodos. No Capítulo 1, foi realizada prospecção científica e tecnológica acerca do emprego de manteigas vegetais em nanotecnologia. No Capítulo 2, a análise da composição química dos ácidos graxos de BBI foi feita por derivatização dos compostos lipídicos, seguida de análise por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrômetro de Massa. As nanopartículas lipídicas sólidas (NLS) foram produzidas com o desenvolvimento de três protótipos, NLS/PL-1, NLS/PL-1,5 e NLS/TW-1,5 preparados com os tensoativos Pluronic F127 1% ou 1,5% e Tween 80
1,5%, respectivamente. No Capítulo 3, duas frações polares de BBI foram produzidas por métodos de precipitação (FBBI-1) e centrifugação (FBBI-2) e suas composições químicas foram investigadas por UFLC e por CG-MS. Foi realizado ensaio de viabilidade celular em macrófagos pelo teste de MTT e avaliação do efeito vasorrelaxante de FBBI-1 e FBBI-2 em anéis de artéria aorta isolada de ratas. No Capítulo 4, foram produzidas três formulações distintas de pomadas labiais, avaliando-se parâmetros organolépticos, físico-químicos e reológicos, além da estimativa de FPS in silico. A BBI foi submetida a um teste in vivo de irritabilidade cutânea em ratas. Resultados. Análise de BBI por CG-MS revelou a presença de seis tipos de ácidos graxos diferentes com destaque para os ácidos palmítico e oleico. A caracterização físico-química das NLSs apresentou carácter bimodal, com duas populações de tamanhos distintos, sendo as NLS/TW-1,5 as que tiveram menor tamanho de partícula. O índice de polidispersão em todos os protótipos apresentou valor acima de 0,40 e o Potencial Zeta variou de -24,89 a -38,37. A análise da citotoxicidade em macrófagos foi significativa acima de 12,5 µg∙mL -1, sendo CC 50 45,2 µg∙mL -1 para as NLS/TW-1,5 e 54,9 µg∙mL -1 para as NLS/PL-1,5; já a BBI apresentou CC 50 de 249,4 µg∙mL -1 e foi significativa apenas a partir de 200 µg∙mL. Na análise por UFLC de FBBI-1 não se detectou a molécula de - mangostina. Já FBBI-2 aponta um sinal no mesmo tempo de retenção desta molécula de interesse, o qual é expandido após dopagem da amostra com a solução do padrãomangostina, admitindo-se que FBBI-2 pode conter tal molécula em sua composição. Na análise por CG-MS foram detectados benzofenona e ácido benzílico como presentes em FBBI-1 e ácido palmítico como majoritário em FBBI-2. Para as análises de citotoxicidade por MTT, FBBI-1 e FBBI-2 apresentaram valores de CC 50 em 1034,906 µg/mL e 140,111 µg/mL, respectivamente. Na análise do efeito vasorrelaxante, FBBI-1 e FBBI-2 apresentaram tal propriedade, de modo independente da presença de endotélio vascular. Na produção de pomada labial contendo BBI os ensaios apresentaram resultados satisfatórios para os parâmetros analisados, sendo que o FPS estimado, conforme a metodologia utilizada, cumpriu com os padrões preconizados pela legislação vigente e a manteiga não causou irritabilidade cutânea. Conclusão: Foi possível desenvolver e caracterizar NLS contendo BBI, bem como obter frações polares deste material que apresentam propriedade vasorrelaxante independente de endotélio. Além disso, o emprego de BBI em formulações cosméticas inovadoras é oportuno e promissor. 

A leishmaniose visceral (LV) ou calazar é uma doença infecciosa grave se não tratada pode ser letal. Os aspectos clínicos apresentam desde formas assintomáticas e pode evoluir até o óbito, com quadro clínico caracterizado por febre, hepatoesplenomegalia, manifestações hemorrágicas, linfadenomegalia, anemia, caquexia, diarreia e pancitopenia na maioria dos casos. Os fatores associados ao maior risco de morte são anemia, problemas de coagulação, icterícia, edema, infecção bacteriana e coinfecção com HIV. A deficiência de micronutrientes, como vitamina A e zinco, podem interferir na resposta imune e inflamatória. Vitamina A tem atividade promotora e reguladora no sistema imunológico inato e na imunidade adaptativa. Zinco desempenha funções essenciais, para o metabolismo, reprodução, diferenciação celular e defesa imunológica. Por esse motivo, decidiu-se investigar se a suplementação desses dois micronutrientes modificaria os desfechos dos pacientes após tratamento do calazar. Objetivos do estudo: avaliar o estado nutricional e níveis de vitamina A e zinco de pacientes com calazar e contribuir para a compreensão do papel de desnutrição na doença; investigar se a suplementação desses dois micronutrientes modificaria os resultados dos pacientes após o tratamento específico do calazar em ensaio clínico randomizado duplo-cego e investigar o papel da proteína C-reativa como um diagnóstico e ferramenta de prognóstico para o calazar do Novo Mundo. Desenho de estudo: Ensaio clínico randomizado duplo-cego realizado no Instituto de Doenças Tropicais Natan Portela (IDTNP), na cidade de Teresina (PI). Os participantes do estudo foram 139 indivíduos internados no período de 25 de junho de 2018 a 28 de agosto de 2019, incluídos no estudo após confirmação diagnóstica de calazar. As capsulas contendo vitamina A, zinco ou placebo foram manipuladas no Departamento de Farmácia da Universidade Federal do Piauí. Como nenhuma correlação ou interação foi observada entre a vitamina A e o zinco nos quatro grupos dois grupos independentes foram alocados para análise: (a) com vitamina A versus sem vitamina A (com e sem zinco) e (b) com zinco versus sem zinco (com e sem vitamina A). O estudo resultou na produção de três artigos científicos: I) Estado nutricional de pacientes com calazar no Brasil, apresentou como resultados perda de peso e a desnutrição foram mais frequentes em adultos. O IMC para a idade, a área adiposa e a área muscular do braço foram significativamente associados à probabilidade de morte, a presença de HIV, hepatomegalia, esplenomegalia, número de leucócitos e linfócitos. II) Os níveis basais de vitamina A e zinco são os principais preditores das concentrações de 30 dias pós-tratamento e pós-suplementação em pacientes com leishmaniose visceral. Apresentou como resultados que a suplementação de vitamina A e zinco não afetaram os resultados clínicos e laboratoriais e a concentração de nutrientes. No entanto, a vitamina A e o zinco aumentaram significativamente após o tratamento. Identificou-se que os preditores mais importantes da concentração de vitamina A e zinco 30 dias após o tratamento foram os níveis basais, impressionantemente para vitamina A. III) Proteína C-reativa antes e depois do tratamento do calazar no Novo Mundo: dicas para clínicos. O estudo identificou que a proteína C-reativa estava muito alta antes do tratamento, 30 dias após o tratamento tornou-se expressivamente mais baixa, resultados que confirma a importância da proteína C-reativa para o calazar do Novo Mundo e para L. donovani do Velho Mundo.

Os produtos naturais têm sido reconhecidos ao longo do tempo como uma rica fonte que leva a descobertas de novos medicamentos. Atualmente, apenas doze dos 71 fitoterápicos derivados de plantas medicinais disponíveis na RENISUS são oferecidos à população, dentre as espécies constantes nessa relação encontra-se a Casearia sylvestris Sw. Das pesquisas realizadas com a espécie, a capacidade de risco sistêmico e ação antiinflamatória de uma Fração com Diterpenos Clerodânicos (FC) foi pouco explorada. Dessa forma o presente estudo teve como objetivo a investigação da toxicidade e seu potencial como anti-inflamatório. Para tanto, a presente tese foi dividida em dois capítulos. No primeiro capítulo, foi realizada a avaliação da toxicidade aguda e subaguda através de protocolos in vitro e in vivo. Os estudos in vitro demonstraram que a FC causou citotoxicidade em células humanas e animais, além de induzir danos ao DNA em leucócitos ex vivo e in vivo. Os testes in vivo revelaram que a FC nas doses de 100 e 400 mg/kg, vias intraperitoneal e oral, respectivamente, foi considerada tóxica e que no teste de 30 dias, a FC nas doses de 5 e 10 mg/kg, via i.p., causou mielossupressão, perda de peso, alterações bioquímicas e hematológicas, além de comprometimento hepático. O segundo capítulo avaliou a toxicidade subcrônica in vivo e ação anti-inflamatória da FC nas doses de 25 e 50 mg/kg, via i.p. e 50 e 100 mg/kg, via oral, através dos testes de edema de pata induzidos por carragenina, diversos compostos flogísticos, migração leucocitária e permeabilidade vesical. O teste subcrônico revelou ausência de toxicidade nos animais tratados por 90 dias com FC nas doses 5 e 10 mg/kg, via oral, através da análise de parâmetros bioquímicos, hematológicos e histológicos. Dos testes de inflamação, pôde-se inferir que a FC em todas as doses reduziu o edema de forma significativa no teste do edema por carragenina, além de modular negativamente o TNFα e a IL-1β, com esta última apresentando redução de forma significativa pelo grupo tratado pela via i.p. Foram realizadas análises histológicas das patas, com a inferência que os grupos tratados pela via i.p. diminuiu o edema e o infiltrado inflamatório de forma semelhante àqueles tratados por via oral. Em seguida, selecionou-se as menores doses de cada via e seguiu-se com os demais testes, como modelo de edema de pata por diversos agentes flogísticos (composto 48/80, PGE2, histamina e serotonina), teste de peritonite e o de permeabilidade vesical por azul de Evans. Os resultados dos testes de edema de pata, revelou uma ação antiedematogênica da FC administrada tanto por via oral, quanto por via i.p., no entanto, em alguns testes a via oral sobrepujou os resultados da via i.p na redução do edema. No teste de peritonite a FC também reduziu significativamente, tanto por via oral, quanto por via intraperitoneal o número de neutrófilos (57.7% e 86.5%, respectivamente), quando comparados com o grupo que recebeu o veículo e no teste de permeabilidade vesical por azul de Evans revelou que o pré-tratamento com FC 25mg/kg (i.p.) e FC 50 mg/kg (oral), trinta minutos ou uma hora, respectivamente, antes da administração de ifosfamida preveniu o aumento do extravasamento vesical causado por ifosfamida em torno de 38% e 48%, respectivamente. Possivelmente as ações antiedematogênicas sejam devido à diminuição da expressão dos mediadores pró-inflamatórios. Com isso, os resultados indicam possibilidades reais para esta espécie de planta como alternativa terapêutica aos estados patológicos com quadro inflamatório agudo, além de apresentar vantagens em relação aos ani-inflamatórios não esteroidais, principalmente no que se refere aos efeitos adversos no trato gastrointestinal.

O Sistema Renina-Angiotensina (RAS) é um sistema hormonal complexo que está diretamente associado a regulação fisiológica da pressão arterial sistêmica, bem como no equilíbrio hidroeletrolítico. A via da Enzima Conversora de Angiotensina II (ECA II), presente no sistema RAS, foi relacionada recentemente a vários efeitos benéficos no organismo. Esse eixo pode desenvolver funções ao longo de múltiplos tecidos e órgãos, incluindo a parte endotelial, os sistemas renal, cardíaco, reprodutor, tegumentar, nervoso e digestório. Além disso, A ECA II é responsável por converter a Angiotensina II (Ang II) em um peptídeo ativo denominado de Angiotensina 1-7 (Ang (1-7)) que por sua vez se liga a um receptor acoplado a proteína G, o receptor MAS. Comprovações científicas recentes demonstram que o Aceturato de Diminazeno (DIME), um tripanossomicida utilizado em animais, foi descrito como um potente ativador da ECA II. Tais achados sugerem que novos alvos farmacológicos possam surgir a partir da utilização desse metabólito ativo, o Ang-(1-7), principalmente a nível gastrointestinal, podendo auxiliar na resolução de determinadas doenças, tais como a diarreia. Com isso, o referido trabalho possui como objetivo avaliar o potencial terapêutico antidiarreico mediado pela ativação da via da ECA II/ Ang-(1-7)/MasR em camundongos. Para isso foram utilizadas metodologias de indução de processos diarreicos utilizando produtos laxativos, como o óleo de rícino, mediadores próinflamatórios como a Prostaglandina E2 (PGE2) e toxinas bacterinas, como a toxina do Vibrio cholerae. Foram testadas as doses de 7, 20 e 60 mg/kg de DIME (via oral), sendo a dose de 20 mg/kg considerada a dose mais eficaz para a realização dos demais testes. Foi comprovada a ação antidiarreica, por meio da ativação da via em estudo, na diminuição da diarreia induzida por óleo de rícino, na diminuição do número total de fezes líquidas, na redução do acúmulo de liquido intestinal (enteropooling), bem como na resistência elétrica transepitelial e permeabilidade epitelial; diminuição nos níveis de citocinas pró-inflamatórios e elevação dos níveis de citocinas próinflamatórias, diminuição da diarreia estimulada pela administração de PGE2, maior ativação e atuação da bomba de sódio e potássio, redução do trânsito gastrointestinal (evidenciando a não participação da via opioide); promoveu efeito relaxante em preparações de músculo liso. Além disso, a administração de DIME promoveu a diminuição do processo diarreico promovido pela toxina da cólera (looping em alças intestinais), bem como minimizou a liberação de íons cloreto para o lúmen intestinal. Ademais, a ativação do eixo em questão ainda foi capaz de diminuir a interação da toxina da cólera com o receptor gangliosídeo GM1 em ensaios imunoenzimáticos. Os resultados antidiarreicos promovidos pela ativação da via ECAII/Ang-(1-7)/MasR foram revertidos quando os animais foram pré-tratados com o antagonista do receptor Mas, o A-779 (5 mg/kg, via intraperitoneal). Todos os resultados apresentaram significância estatística (p<0,05), no qual foram utilizados testes paramétricos e não paramétricos para as devidas avaliações (Newman-Keuls, Tukey, Krusa-Wallis, Dunn, todos os testes foram realizados no programa graphpad prism ® 5-6). Mediante o exposto, conclui-se que, o DIME apresentou boas propriedades antidiarreicas (nos modelos estudados), e que sua proteção se dá, dentre outros fatores, pela ativação da via ECA II/Ang-(1-7)/MasR.

A goma de chichá (CH) é um heteropolissacarídeo aniônico natural com potencial uso na indústria farmacêutica e alimentícia, além de promissora aplicação em nanobiotecnologia. Alterações químicas na estrutura desse polímero vêm sendo executadas principalmente para a formulação de materiais para nanoencapsulação de fármacos com atividade antimicrobiana e antiparasitária, como a anfotericina B, no entanto, modificações químicas podem ser realizadas na estrutura deste polissacarídeo para conferir-lhe atividade antimicrobiana ou antiparasitária. Este trabalho objetivou modificar quimicamente a CH por reação de esterificação com o anidrido ftálico e avaliar a atividade antibacteriana de CH ftalada contra bactérias Gramnegativas, além de avaliar sua biocompatibilidade. Para tanto, inicialmente isolou-se a goma de chichá a partir do exsudato da planta para em seguida proceder-se ao processo de síntese dos seus derivados ftalados. A modificação química ocorreu em um sistema de refluxo, sob aquecimento e agitação constantes, onde inicialmente fundiu-se o anidrido ftálico e depois acrescentou-se a goma de chichá deixando-se a reação ocorrer por 30 min, para em seguida adicionar N,N-dimetilacetamida, para parar a reação, separando-se por centrifugação os derivados formados, lavando-os posteriormente com água destilada até atingir pH neutro. Duas proporções diferentes de goma para o anidrido foram utilizadas durante o processo de síntese, produzindo-se dois derivados (CF1/2 e CF1/5). A goma de chichá e seus derivados foram caracterizados por FTIR, análise elementar, TGA/DSC e DRX. Também foi calculado o grau de substituição do grupo químico introduzido na estrutura da goma e a hidrofilicidade pela medida do ângulo de contato com a água através do método da gota séssil. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de contato direto. A toxicidade aguda em Artemia salina foi investigada antes de se avaliar a biocompatibilidade em eritrócitos e macrófagos. Os métodos de caracterização utilizados neste estudo confirmaram a modificação da goma de chichá. Os derivados apresentaram promissora atividade antibacteriana contra Gram-negativas, chegando a 100% de efeito inibitório contra Pseudomonas aeruginosa e Klebsiella pneumoniae. Os materiais não apresentaram toxicidade aguda e apresentaram biocompatibilidade sobre as células testadas, sugerindo, deste modo, que os mesmos possam ser aplicados como ferramenta para o desenvolvimento de biomateriais com ação antibacteriana.

Estimar o intervalo de tempo compreende uma sucessão de eventos em diversas atividades de nossas vidas. Esse é modulado por diversos fatores, tais como o nível de atenção, as emoções, memórias e doenças, em especial a Doença de Parkinson (DP). Embora os estudos apresentem que pacientes com DP, estimam o intervalo de tempo mais longos do que àquelas pessoas sem a doença, ainda não foi estudado se há diferença entre os estadiamentos e níveis cognitivos na precisão com a interpretação do intervalo de tempo. Dessa forma, este estudo buscou analisar a precisão na interpretação da estimativa de tempo e as diferenças entre os estadiamentos e níveis cognitivos com a interpretação da na estimativa do tempo. Oito pacientes com DP no estadiamento 1,5 (unilateral e axial) e oito no estadiamento 2,5 (bilateral leve) do sexo masculino, realizaram uma tarefa de estimativa do tempo nos intervalos de 1s, 4s, 7s e 9s com duração de 10 minutos antes da coleta sanguínea. Os resultados do coeficiente de variação para respostas entre os dois estadiamentos demonstrou que os pacientes classificados no estadiamento 2,5 são menos precisos para estimar o intervalo de tempo. Enquanto para o erro absoluto, eles erraram 2,52 segundos a mais do que os do estadiamento 1,5 no intervalo de 9s (p < 0,0001). Também foi observado que os pacientes do estadiamento 1,5 subestimam o tempo em 6,84 segundos a mais do que os do estadiamento 2,5 (p < 0,0001) no intervalo de 9s. A diferença ente os estadiamentos e níveis cognitivos de maneira geral revelaram uma maior imprecisão em estimar o tempo à medida que o indivíduo piora seu quadro clinico motor e cognitivo. Por fim, nossos resultados conjuntamente com a literatura nos fazem pensar na possibilidade de utilização de tarefas de percepção do tempo como ferramenta avaliativa não invasiva da Doença de Parkinson.

O câncer de mama é a neoplasia que mais acomete as mulheres, sendo a principal causa de morte de mulheres por câncer em todo o mundo. No Brasil, para cada ano do triênio 2020-2022, foram estimados cerca de 66.280 casos novos de câncer de mama e 17.572 casos de morte pela doença. Contudo, tem sido sugerido que estratégias terapêuticas e prognósticas mais adequadas no câncer de mama podem ser desenvolvidas usando a expressão de genes que estão associados ao desenvolvimento, crescimento e agressividade da doença como biomarcadores, incluindo o gene IGF-1 que codifica uma proteína de mesmo nome. A propósito, alguns estudos tem analisado a expressão gênica do IGF-1 (mRNA do IGF-1) no câncer de mama, no entanto, muitos destes estudos mostraram resultados controversos e conflitantes. Assim, devido às controvérsias da expressão gênica do IGF-1 em estudos realizados em tumores mamários e, até onde investigamos, há ausência de estudos da expressão gênica de IGF-1 no sangue periférico de mulheres com câncer de mama recidivado, o que nos levou ao desenho do presente estudo. Esta tese foi estruturada em dois capítulos: O capítulo I teve como objetivo investigar por meio de um artigo de pesquisa envolvendo uma revisão sistemática, os níveis de expressão do gene IGF-1 em mulheres com câncer de mama. Esta revisão sistemática mostrou que níveis da expressão gênica do IGF-1 podem estar relacionados a fatores clínicos e histopatológicos, sobrevida livre de doença e sobrevida global de mulheres câncer de mama. O capítulo II teve como objetivo comparar a expressão do gene IGF-1 no sangue periférico de mulheres com câncer de mama sem recidiva (controle, n= 85) e com recidiva (estudo, n= 61), e mostrou que não houve diferença significante da expressão gênica do IGF-1 no grupo estudo em comparação ao controle (p = 0,98). No entanto, em pacientes sem metástases linfonodais, a expressão de mRNA do IGF-1 foi significantemente maior em mulheres do grupo controle do que no estudo (p = 0,02). Usando a mediana como ponto de corte, houve uma diferença estatisticamente significante em relação ao grau histológico tumoral apenas em mulheres com câncer mamário recidivado (p = 0,04). Assim, o presente estudo mostrou uma expressão gênica do IGF-1 significante maior em mulheres sem metástases linfonodais do grupo controle em comparação ao grupo estudo. Também, houve diferença significante da expressão mediana de IGF-1 em relação ao grau histológico tumoral somente no grupo de mulheres com recidiva do câncer de mama.

Alterações relevantes no estilo de vida da população, incluindo mudanças nos hábitos alimentares e elevados níveis de sedentarismo, transformou o padrão de morbimortalidade do brasileiro, que reduziu as doenças transmissíveis em oposição ao aumento das doenças não transmissíveis que geralmente são tratadas com o uso de polifarmácia. Uma alternativa a estes tratamentos é a utilização de alimentos ricos em nutrientes, de elevado valor nutricional e atividades farmacológicas, aliados a mudanças de estilo de vida. Existem várias matérias primas que podem ser utilizados como ingredientes na produção de novos alimentos funcionais e este trabalho se propôs utilizar o Buriti (Mauritia flexuosa), pelo seu potencial tecnológico e funcional. Assim os objetivos foram: investigar em protocolos utilizando camundongos swiss, a atividade antiinflamatória e analgésica de Mauritia flexuosa, bem como análise da influencia da ingesta deste extrato sobre o trânsito intestinal; analisar atividade antioxidante in vitro; descrever em protocolos utilizando ratas Wistar, possível potencial hipolipemiantes das amostras de epicarpo, mesocarpo e endocarpo bem como verificação de parâmetros bioquímicos de avaliação renal, hepática e cardíaca, além de identificar in vivo se o fruto de Mauritia flexuosa tem atividade antioxidante; desenvolver produto à base do fruto de M. flexuosa com potencial para uso como Alimento funcional. Inicialmente foram realizados protocolos de inflamação em pata de camundongos swiss induzido por carragenina (bem como análise histológica da pata edemaciada), composto 48/80, histamina, serotonina e prostaglandina E2, onde se verificou que o fruto de M. flexuosa teve um efeito antiinflamatório, principalmente a fração mesocarpo, com efeito anti-inflamatório mais significativo e duradouro na redução dos níveis de histamina no local da inflamação. Ainda sobre a avaliação da atividade anti-inflamatória, foi também induzido peritonite, onde se avaliou o número total de leucócitos e níveis de citocinas pro-inflamatórias (IL-1β e TNF-α.) e os resultados deste protocolo demonstraram que houve redução no número total de leucócitos bem como nos níveis de TNF-𝜶. Verificou-se atividade anti-nociceptiva induzida por ácido acético (avaliação do número de contorções e o intervalo entre as mesmas) onde se identificou que o epicarpo foi a fração do fruto com melhor atividade analgésica; identificou se houve alteração na permeabilidade vascular vesical marcada com azul de Evans e os dados encontrados demonstraram que o fruto de M. flexuosa não alterou a permeabilidade vascular de modo significativo. Em seguida foram realizados protocolos in vitro para avaliar a atividade antioxidante frente a produção de radicais DPPH• , ABTS•+ , TBARS, nitrito e determinar o potencial redutor de Fe2+, onde se verificou que o epicarpo foi a fração com melhor atividade antioxidante in vitro. Em seguida em protocolo hipercalórico em ratas Wistar, onde foi identificado potencial hipolipemiantes de M. flexuosa, bem como possível efeito desse extrato sobre a avaliação renal, hepática e cardíaca e o perfil hepático in vivo de enzimas antioxidantes e de peroxidação lipídica. Por fim, foi analisado alterações no trânsito intestinal usando como marcador o carvão ativado, e se verificou que o fruto de M. flexuosa não o alterou de modo significativo. Os resultados apresentados expressaram ser a M. flexuosa uma matéria prima promissora para desenvolvimento de Alimento funcional com propriedades anti-inflamatórias, hipolipemiantes, antioxidante e com possível atividade cardioprotetora.

O presente estudo comparou o efeito da administração tópica de um gel de orabase contendo goma de caju (CG), um polissacarídeo complexo de Anacardium occidentale L. e clorexidina, um antibiótico conhecido, na transcrição do rRNA 16S, proteína de ligação a lipopolissacarídeo (Lbp), receptor Toll-like 2 (Tlr2), Tlr4, molécula adaptadora de receptor Toll-2 (Ticam2) e genes do fator regulador do interferon 3 (Irf3) relacionados a processos infecciosos, imunológicos e inflamatórios no tecido periodontal de ratos com periodontite induzida por ligadura. Ratas Wistar fêmeas foram submetidas à inserção de uma ligadura de nylon ao redor do primeiro molar inferior para induzir periodontite. Após a colocação da ligadura, os animais foram divididos aleatoriamente em grupos de 7 para receber aplicações tópicas diárias dos seguintes tratamentos: solução salina a 0,9% (grupo salina), gel veicular (grupo veículo), gel orabase contendo GC a 15% (grupo GC) e 2% de clorexidina em gel (grupo CHX). Um grupo sem periodontite induzida por ligadura foi incluído como controle (grupo saudável). Os tecidos gengivais ao redor da ligadura foram avaliados quanto à expressão gênica por transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (qRT-PCR; Ensaio de expressão gênica TaqMan). A periodontite induzida por ligadura foi acompanhada por um aumento significativo na expressão de mRNA dos genes 16S rRNA, Lbp, Tlr2, Tlr4, Ticam2 e Irf3 nos tecidos gengivais afetados dos animais, como evidenciado por comparações entre os grupos saudável e salina (P < 0,05). Não houve diferenças significativas entre o grupo salina e o grupo veículo em nenhum dos tratamentos e os valores médios da expressão do RNAm no grupo GC foram estatisticamente semelhantes aos apresentados pelo grupo CHX (P > 0,05). O tratamento com a formulação de orabase contendo CG impediu o aumento da expressão do mRNA de 16S rRNA, Lbp e Tlr2 na gengiva. Os níveis transcricionais de Ticam2 e Irf3 aumentaram significativamente após a indução de periodontite. No entanto, a aplicação tópica de CG ou gel de clorexidina a 2% não afetou significativamente a expressão de mRNA desses genes quando comparada ao grupo salina (P > 0,05). Tomados em conjunto, esses resultados reforçam a evidência de que uma formulação de orabase contendo CG previne danos nos tecidos inflamatórios associados à microbiota disbiótica na periodontite experimental. O tratamento com uma formulação de orabase contendo CG impediu a inflamação local e o crescimento bacteriano em animais com periodontite induzida por ligadura, possivelmente prejudicando a co-agregação bacteriana devido à alta concentração de unidades de D-galactose na GC. O perfil de expressão gênica observado na gengiva dos animais tratados com GC neste estudo e em comunicações anteriores do nosso grupo mostrou que o efeito protetor da formulação da orabase contendo CG em um modelo de periodontite induzida por ligadura era dependente de TLR2, mas independente do MyD88. Assim, esse efeito pode ser causado pela regulação da proteína adaptadora que contém o domínio receptor TLR2-Toll/interleucina-1 (TIRAP)- fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K) e não pela desativação da via de sinalização TLR2/TLR4- TICAM2-TICAM1-IRF3.

Os polímeros derivados de corantes antraquinonas têm sido propostos na literatura como exemplos de sistemas multieletrônicos, caracterizados pela alta estabilidade, capacidade de armazenamento de energia e eficácia comprovada no desenvolvimento de sensores e biossensores eletroquímicos. No presente trabalho, foi proposta uma rota de eletropolimerização do corante Vermelho de Alizarina S (VAS) altamente reprodutível, a qual resultou na formação do Poli-Vermelho de Alizarina S (PVAS), cujas propriedades despertaram o interesse de aplicação deste material no sensoriamento eletroquímico de esteroides anabolizantes androgênicos (EAAs). O PVAS foi obtido via eletropolimerização por Voltametria Cíclica (VC) na superfície de um Eletrodo de Grafite Pirolítico (EGP) e apresentou 07 (sete) pares redox estáveis e reversíveis (entre -0,6 e 0,5 V vs ECS). Este comportamento foi bastante diferente do observado para a sua forma monomérica (VAS), a qual apresentou apenas 01 (um) desses pares redox. Todos os processos redox do PVAS foram investigados e caracterizados eletroquimicamente quanto à estabilidade eletroquímica, influência do pH eletrolítico durante a avaliação do comportamento Nernstiano, efeito da velocidade de varredura, mecanismo eletroquímico, entre outros parâmetros. O número de prótons e elétrons envolvidos em cada par redox foi estimado experimentalmente por VC e Voltametria de Pulso Diferencial (VPD). Por DFT (do inglês Density Functional Theory), diagramas de distribuição de energia HOMO e LUMO foram construídos tanto para o VAS, quanto para os seus possíveis enatiômeros (VAS E1 e VAS E2). A partir dos dados experimentais e teóricos, um mecanismo de oxirredução para os principais processos do PVAS foi proposto. Em etapas posteriores, ensaios preliminares mostraram a eficácia do EGP/PVAS na detecção de oxandrolona (OXA) em urina artificial, com um limite de detecção da ordem de 0,49 nmol L-1 , com taxa de recuperação próxima de 100% em urina artificial. Os mecanismos de interação entre o PVAS e a OXA também foram sugeridos, baseando-se em cálculos computacionais (DFT). Além da aplicação como sensor, o sistema EGP/PVAS é caracterizado como um produto de baixo custo, com viabilidade para diferentes aplicações eletroquímicas a exemplo de baterias, eletrocatálise, entre outras.

A secreção cutânea dos anfíbios é uma fonte natural de peptídeos bioativos com potencial para aplicações biotecnológicas e efeitos farmacológicos diversos. Portanto, este estudo objetivou caracterizar, bem como  investigar os peptídeos obtidos a partir da secreção cutânea do anfíbio Leptodactylus vastus como uma fonte de moléculas bioativas por meio da avaliação da atividade antibacteriana e antioxidante com aplicação  neuroprotetora. Inicialmente, espécies adultas de L. vastus foram manualmente capturadas na Região do Delta do Parnaíba, Ilha Grande, Piauí, Brasil. A secreção cutânea foi extraída com uma estimulação elétrica (9 V) e a seguir o extrato total liofilizado foi purificado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência de Fase  Reversa. O peso molecular foi confirmado usando espectroscopia de massa do tipo MALDI-TOF/TOF. A  confirmação de suas sequências de aminoácidos foi realizada por degradação de Edman e depois foram  manualmente sintetizados em fase sólida utilizando a estratégia Fmoc (9-fluorenilmetoxicarbonil). A
estrutura secundária dos peptídeos foi analisada por dicroísmo circular. A atividade antibacteriana dos  peptídeos foi analisada contra estirpes de Escherichia coli ATCC 25922 e Staphylococcus aureus ATCC  25923. Além disso, foi avaliado o potencial antioxidante in vivo em hipocampo de camudongos com  determinação dos níveis de marcadores do estresse oxidativo como malondialdeido (MDA), glutationa (GSH), nitrito e superóxido dismutase (SOD). Foi analisada a capacidade dos peptídeos em inibir a ativação de NF-kB induzida com lipopolissacarideo (LPS) em micróglia. A seguir, neurônios hipocampais foram  incubados com o meio condicionado com micróglia tratada com LPS na presença dos peptídeos. Além disso, a atividade hemolítica foi testada usando hemácias humanas, de forma que a morfologia dessas células foi confirmada pela técnica de Microscopia de Força Atômica. Os resultados mostram que os peptídeos obtidos possuem as sequências de aminoácidos GVVDILKGAAKDLAGH e GVVDILKGAAKDLAGHLASKV, com massa monoisotópica de [M + H] ± = 1563.8 Da e [M + H] ± = 2062.4 Da, respectivamente. As moléculas foram caracterizadas como sendo peptídeos da classe das ocellatinas e foram nomeados como Ocellatina-K1(1-16) e Ocellatina-K1(1-21). Tais peptídeos tendem a possuir uma formação de alfa-hélice na presença de 2,2,2-trifluoroetanol. A busca por atividade biológica revelou que Ocellatina-K1(1-16) e Ocellatina-K1(1-21)  possuem fraca atividade antibacteriana. Contudo, o tratamento dos camundongos com tais ocellatinas in vivo reduziu o conteúdo de nitrito e a formação de MDA. Além disso, a atividade enzimática de SOD e a  concentração de GSH foram aumentadas no hipocampo de camundongos. As ocellatinas foram efetivas em inibir a ativação de NF-kB na micróglia. Ambos os peptídeos reduziram o estresse oxidativo em neurônios hipocampais. Tais ocellatinas demonstraram baixa citotoxicidade em hemácias humanas. Em conclusão,  estas observações sugerem que Ocellatina-K1(1-16) e Ocellatina-K1(1-21) podem formar a base para a descoberta e desenvolvimento de novos agentes que podem controlar a produção de EROs e a ativação microglial, a fim de tratar ou prevenir o estresse oxidativo associado a doenças neurológicas.

As leishmanioses são doenças causadas por parasitas protozoários pertencentes ao gênero Leishmania, que se manifestam desde lesões cutâneas até a forma visceral, de maior morbidade e mortalidade. Segundo a Organização Mundial as Saúde, 350 milhões de pessoas habitam em áreas de risco para infecção, são previstos em todo o mundo um aumento crescente, sendo esperado de 1.0 a 1.5 milhões de novos casos de leishmaniose tegumentar e 500 mil casos de leishmaniose visceral. Os principais recursos usados no tratamento das leishmanioses são baseados em antimoniais pentavalentes, tratamento que possui diversas limitações como efeitos colaterais severos devido à toxicidade, surgimento de cepas resistentes, longo período de tratamento e vias de aplicações dos fármacos intramuscular ou endovenosa. Desta forma é notória a necessidade da identificação de novos tratamentos para as leishmanioses como alternativas economicamente mais viáveis, como bioprodutos a bases de produtos naturais. O presente trabalho buscou padronizar a produção de extratos vegetais de Chenopodium ambrosioides, Boerhavia diffusa, Cecropia peltata, Jatropha curcas e Aloe arborescens para a avaliação da atividade leishmanicida in vitro frente a formas promastigotas de Leishmania amazonensis. Para tanto foram avaliados o desempenho do processo extrativo, otimizando os parametros como método, liquido extrator e tempo. Essa combinação foram sumetida a um planejamento experimental a partir do modelo quadrático fatorial completo com 2 níveis, totalizando 9 experimentos para cada tipo de extração. Os extratos fluidos aquosos e hidroalcoólicos das plantas utilizadas foram caracterizados quanto às propriedades físico-químicas: resíduo seco, pH, densidade, atividade antioxidante in vitro, perfil fitoquímico qualitativo (flavonóides, taninos, alcaloides e saponinas), perfil fitoquímico quantitativo (fenólicos totais e flavonoides totais), Cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os extratos fluídos foram sumetidos a secagem por aspersão em aparelho de spray dryer. Tanto as obtenções dos extratos fluídos como os extratos secos tiveram os seus processos padronizados em temperatura de entrada 120℃ e fluxo de alimentação em 3 ml/min. Os resultados evidenciaram os melhores parâmentros, sendo possível a padronização físico-química dos extratos fluídos e secos (aquosos e hidroalcoólicos). A padronização da produção de extratos é uma etapa importante para garantir a qualidade de novos produtos à base de plantas, possibilitando a homogeneidade das propriedades físicas, químicas e farmacológicas. Os extratos padronizados foram avaliados quanto à atividade leishmanicida in vitro utilizando a forma promastigota de Leishmania amazonesis. Os resultados obtidos servem como base para o desenvolvimento de potenciais fitomedicamentos para o tratamento das leishmanioses.

A diarreia é uma condição patológica onde o indivíduo apresenta cerca de três ou mais evacuações diárias, seguidas de alteração na consistência das fezes, geralmente de pastosas a líquidas. Atualmente é considerada um dos piores problemas em termos de saúde pública em todo mundo por inúmeros fatores, entre eles, o número de casos e óbitos, áreas afetadas, dificuldade de tratamento, entre outros. Diante desse cenário, o uso de produtos naturais se dá como alternativa para o desenvolvimento de novos fármacos e dentre essas possibilidades, o Farnesol (C15H26O) é um sesquiterpeno encontrado em diferentes espécies de plantas como flores, especiarias e ervas, tendo diversas atividades biológicas conhecidas e que pode ter sua biodisponibilidade melhorada com uma complexação em betaciclodextrina, como já observado em outras situações. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade antidiarreica do Farnesol (FOH) e seu complexo em beta-ciclodextrina (FOHB) em diferentes modelos. Inicialmente, a atividade antidiarreica de FOH e FOHB foi avaliada no modelo de diarreia aguda e enteropooling induzido por óleo de rícino, onde camundongos foram prétratados com FOH ou FOHB (6,25; 12,5; 25 e 50 mg/kg, v.o.) e depois de 1 h receberam óleo de rícino (10 mL/kg, v.o.). Os animais foram então colocados em gaiolas forradas com papel absorvente e observados durante 3 h e ao final do tempo, houve a contagem de escores de severidade diarreica. Na diarreia induzida por PGE2, os animais foram pré-tratados com FOH ou FOHB (50 mg/kg, v.o.) e imediatamente após a administração, a PGE2 foi administrada (100 µg/kg, v.o.). Após 30 minutos os animais foram eutanasiados e o volume do conteúdo intestinal foi mensurado. Para avaliar o trânsito gastrointestinal, os camundongos receberam óleo de rícino e 1 h depois foram tratados com FOH ou FOHB (50 mg/kg, v.o.). Após 1 h, todos os animais receberam 0,2 mL de carvão ativado por via oral. Vinte minutos mais tarde, os animais foram eutanasiados e a distância percorrida pelo carvão no intestino a partir do piloro até o ceco foi medida. A participação opióide e/ou antimuscarínica no trânsito gastrointestinal foi também investigada usando naloxona (2 mg/kg, s.c.; antagonista opióide) e betanecol (3 mg/kg, i.p.; agonista muscarínico), respectivamente. Para estudo do esvaziamento gástrico, camundongos foram tratados com FOH ou FOHB (50 mg/kg, v.o.) e 1 h depois receberam uma solução glicosada (5%) contendo vermelho de fenol (0,75 mg/mL). Após 20 minutos os animais foram eutanasiados e o esvaziamento gástrico foi mensurado por espectrofotometria. Além disso, o efeito do FOH ou FOHB (50 mg/kg, v.o.) na diarreia secretora foi investigado utilizando o modelo de secreção de fluido em alças intestinais isoladas de camundongos vivos tratados com toxina da cólera. O FOH ou FOHB foi avaliado quanto à sua capacidade em absorver fluidos em alças intestinais isoladas e interagir com receptores GM1 utilizando o método de ELISA. Todas as doses apresentaram significativo efeito na diarreia induzida por óleo de rícino (p<0,05), exceto a menor dose, inibindo a quantidade total de fezes e fezes diarreicas. A dose de 50 mg/kg de FOH ou FOHB exibiu os melhores resultados frente a severidade da diarreia (escores de diarreia) e enteropooling no modelo induzido por óleo de rícino, sendo adotada como dose padrão para os testes seguintes, reduzindo o trânsito gastrointestinal, a partir de mecanismos anticolinérgicos, sem interferir no esvaziamento gástrico. O FOH ou FOHB exerceu ação significativa no modelo de diarreia induzida por PGE2. Além disso, os mesmos obtiveram resultados significativos ao reduzir a geração de fluidos e perdas de íons Cl- , ao interagir diretamente com os receptores GM1 e a toxina da cólera no modelo de diarreia secretora. Diante dos resultados apresentados, comprova-se a atividade antidiarreica de FOH e FOHB por meio de ação anticolinérgica, antiinflamatória (via PGE2) e antissecretora, o que pode torna esse sesquiterpeno num candidato em potencial para o desenvolvimento de um novo fármaco para tratamento de doenças diarreicas.

Os nanocompósitos são uma classe de materiais de bastante destaque nas últimas décadas. Produtos naturais renováveis, como os biopolímeros, tem sido relevantes nesta área, e utilizados como matéria-prima na obtenção de novos (nano)materiais. Destes, os polissacarídeos são bastante conhecidos por atóxicos, de baixo custo, ampla disponibilidade, susceptíveis à modificação química, capacidade de interagir com outras espécies dispersas ou dissolvidas, entre outras. A utilização de nanopartículas de azul da Prússia (PBNP’s) também vem sendo bastante empregada como matéria-prima para este fim. O heteropolissacarídeo da goma do cajueiro (HGC), um polímero natural renovável extraído do exsudato do tronco do cajueiro (Anacardium occidentale L.), e uma potencial ferramenta para a obtenção de novos (bio)nanocompósitos. Neste trabalho, foi obtido um nanocompósito a base de polímero natural a partir da obtenção e incorporação in situ de PBNP’s à matriz molecular do biopolímero HGC (PBNP’s@HGC). Posteriormente, foi avaliada a potencialidade deste nanocompósito como camada ativa para o desenvolvimento de sensores eletroquímicos para detecção dos fármacos, tais como o metamizol (MTM), acetaminofeno (ACT) e metotrexato (MTX) a 100,0 mol L-1 . O nanomaterial obtido foi caracterizado por espectroscopia de absorção eletrônica na região do ultravioleta e visível (UV-Vis), e infravermelho (FTIR), Espalhamento Dinâmico de Luz (DLS), potencial Zeta, Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM), Difração de raios X (DRX), e Voltametria Cíclica (VC). Os resultados evidenciaram a formação de uma estrutura molecular ramificada, contendo PBNP’s de formato esfério, e tamanhos entre 5 e 13 nm, estruturalmente estáveis, bastante cristalinas, e homogeneamente distribuídas pela estrutura do biopolímero. Tais resultados mostraram que as PBNP’s são mantidas incorporadas ao HGC por interações supramoleculares. O eletrodo modificado com PBNP’s@(HGC 1,0%) teve boa eletroatividade, e estabilidade eletroquímica, o qual exibiu dois processos, Ipa1/Ipc1 (+ 0,16 V/ + 0,10 V) e Ipa2/Ipc2 (+ 0,86 V/+ 0,75 V), característicos das PBNP’s e já bem descritos na literatura. Os ensaios de eletro-oxidação dos fármacos MTM, ACT e MTX sobre a superfície do eletrodo modificado com PBNP’s@(HGC 1,0%) revelaram que este nanocompósito é um nanomaterial promissor com potencial para aplicações no desenvolvimento de sensores eletroquímicos.

Considerada um grave problema de saúde pública, a diarreia, é avaliada como a segunda causa de óbitos em crianças, representando em torno de 1,5 milhões de mortes/ano em menores de cinco anos. Diante disso e com base na ampla utilização da casca de Terminalia fagifolia Mart. & Zucc. (Combretaceae) na medicina popular do Piauí para o alívio e tratamento de distúrbios do sistema gastrintestinal, como diarreias, gastrites e úlceras gástricas. O objetivo do presente estudo foi avaliar a toxicidade e atividade antidiarreica in vivo do extrato etanólico (Tf-EtOHf) e Tf-Chá obtido das folhas de Terminalia fagifolia em camundongos bem como os possíveis mecanismos envolvidos. Inicialmente, avaliou-se a toxicidade aguda (dose única de 2000 mg/kg) e a caracterização química do extrato. Em seguida, a atividade antidiarreica do Tf-EtOHf no modelo de diarreia aguda e enteropooling induzido por óleo de rícino em camundongos Swiss, que foram pré-tratados com Tf-EtOHf (31,25, 62,5, 125 e 250 mg/kg, v.o ) e depois de 1 h receberam óleo de rícino (10 mL/kg, v.o.). Para avaliar o trânsito gastrintestinal, os camundongos receberam óleo de rícino e 1 h depois foram tratados com Tf-EtOHf (62,5mg/kg, v.o.) melhor resposta obtida no teste de enteropooling. Após 1 h, os animais receberam 0,20 mL de carvão ativado por via oral, e 20 min depois foram eutanasiados e a distância percorrida pelo carvão ativado no intestino foi mensurada. A participação opióide, muscarínica e/ou adrenérgica no trânsito gastrintestinal foi também investigada usando naloxona (2 mg/kg, s.c.; antagonista opióide), betanecol (3 mg/kg, i.p.; agonista muscarínico) e clonidina (0.1 mg/kg, i.p.; agonista adrenérgico, respectivamente). Na diarreia inflamatória, os animais foram pré-tratados com Tf-EtOHf (62,5 mg/kg, v.o.) e a diarreia foi induzida por PGE2 (100 μg/kg, v.o.). Após 30 minutos os animais foram eutanasiados e o volume do conteúdo intestinal foi mensurado. Além disso, o efeito do Tf-EtOHf (62,5 mg/kg, v.o.) na diarreia secretora foi investigado utilizando o modelo de secreção de fluido em alças intestinais isoladas de camundongos vivos tratados com toxina da cólera. O Tf-EtOHf foi avaliado quanto à sua capacidade na absorção de fluidos em alças intestinais isoladas e interação com receptores GM1. As doses testadas (31,25, 62,5, 125 e 250 mg/kg) apresentaram efeito antidiarreico significativo (p<0,05) no protocolo de enteropooling (57,75%; 66,26%; 52,58%; 96,96%; 96,65%, respectivamente). Sendo que a dose de 62,5 mg/kg do extrato etanólico exibiu o melhor resultado, sendo adotada como dose padrão para os testes seguintes. O Tf-EtOHf apresentou baixa toxicidade, pois não provocou a morte de 50% dos animais de ambos os sexos e não houve alterações significativas em relação ao peso corporal e análise dos órgãos de ambos os sexos quando comparado ao grupo controle. Tendo tido apenas alterações no consumo de alimentos e água quando comparado ao grupo controle. Em se tratando do trânsito gastrintestinal não houve redução a partir de mecanismos opióides e anticolinérgicos, mas sim por mecanismo adrenérgico e exerceu ação no modelo de diarreia induzida por PGE2. Também foi capaz de reduzir a geração de fluidos e perdas de íons Cl- , ao interagir diretamente com os receptores GM1. Assim, comprova-se a atividade antidiarreica do extrato etanólico por meio da redução da motilidade gastrintestinal na diarreia aguda através da ação adrenérgica, na diarreia induzida por PGE2 e na diarreia induzida pela toxina da cólera, tornando-o um forte candidato a constituinte de uma formulação para tratamento de doenças diarreicas.

A ovino e a caprinocultura representam atividades de extrema relevância na agropecuária nacional, uma alternativa, para as regiões áridas e semiáridas, pela adaptação às condições adversas. Apresentam grande importância cultural, social e econômica, permitindo o desenvolvimento regional, como fonte de renda para a população. Os criadores necessitam que seus rebanhos tenham um bom crescimento, desempenho de produção para atender, a médio e longo prazo, as demandas do mercado, ampliando a produtividade. Com isso, é de fundamental importância o processo de medição, visto que são caracterísicas herdáveis, sendo relevante a análise desses aspectos, os quais refletem na produção de carne e desenvolvimento corporal. Entretanto, os criadores ainda realizam essas medidas corporais nos animais, principalmente, por métodos manuais. Dessa forma, existe uma demanda crescente para o uso de inovações tecnológicas que proporcionem o monitoramento do crescimento de ovinos e caprinos. Os dispositivos e softwares aplicados à pecuária são fundamentais e necessários, pois permitem um processo automatizado, eficiente e rápido. Este trabalho tem por objetivo, desenvolver um dispositivo computacional para automação de medidas corporais em ovinos e caprinos, por meio do software, obtendo-se as mensurações e armazenando-as em banco de dados, possibilitando o acompanhamento do histórico das medidas do animal. Para o desenvolvimento da solução proposta foi utilizado hardware e software, com a finalidade de automatizar a realização de atividade humana, por meio da captura, processamento e armazenamento de informações. Para a construção do dispositivo foi usada a tecnologia Arduino e sensores, e o software em RubyOnRails utilizando-se o banco de dados SQLite. A coleta dos dados, fase importante no processo de automatização das medidas corporais altura de cernelha, altura da garupa, perímetro torácico, comprimento do animal, profundidade e peso foi realizada, ao mesmo tempo, por meio do dispositivo computacional e dos equipamentos manuais, de forma comparada. Desse modo, foram verificados os erros relativos médios de 7,4 % para altura de cernelha, 7,6 % para altura de garupa, 7,2 % para perímetro torácico, 6,4 % para comprimento de corpo, 13,4 % para o peso e 10,7 % para a profundidade apresentando-se, a média e o desvio padrão das medições automáticas próximas à medições manuais. Conclui-se que as medições corporais realizadas de forma automatizada, permitem maior agilidade nas mensurações, em relação às medidas tradicionis, que exigem muito trabalho com o animal em postura correta de medição e demanda tempo. O dispositivo e o software desenvolvido são de fácil manuseio, e se constituem uma ferramenta computacional de alta aplicabilidade social, por facilitar o acesso dos produtores.

A pressão arterial elevada (PA), comumente chamada de hipertensão, é um importante problema de saúde mundial. Hipertensão tem sido definida como pressão arterial sistólica (PAS) de pelo menos 140 mmHg ou pressão arterial diastólica (PAD) de pelo menos 90 mmHg. O uso de drogas anti-hipertensivas busca reduzir derrames, infartos do miocárdio e insuficiência cardíaca. Dessa forma, o objetivo deste estudo é avaliar a biomolécula Sulcatona (6-metil-5-hepten-2-ona) caracterizando seu potencial citotóxico em células A7r5 e ação anti-hipertensiva em animais SHR e WKY. A Sulcatona é encontrada em frutas cítricas, está presente no óleo de citronela e é um ingrediente aromatizante pertence à classe dos hemiterpenos e também é considerada um ferormônio de insetos. Os testes de citotoxicidade foram realizados em células A7r5 (BCRJ 0034), utilizando o teste de viabilidade celular MTT nos tempos de 24, 48 e 72 horas de incubação. Os resultados demonstram que nos testes de citotoxicidade a Sulcatona não promoveu morte celular nas concentrações de 10- 10 a 10-3 M, somente na maior concentração de 10-2 M demostrou caráter citotóxico, podendo ressaltar que nas outras concentrações analisadas a Sulcatona aumentou a viabilidade celular, podendo sugerir que ela possui ação citoprotetora sobre as células dos músculo liso vascular. Nos experimentos da atividade anti-hipertensiva utilizaramse ratos Wistar kyoto (WKY) e espontaneamente hipertensos (SHR) (CEUA/UFPI - 275/16 e CEUA/USP – 338/2018) Os valores basais de pressão arterial média (PAM) de frequência cardíaca (FC) dos animais foram (WKY: PAM: 104,5±2,26; FC:302,6±11,89: e SHR: PAM: 161,9±4,0; FC:332,4±11,09 respectivamente). A administração venosa de Sulcatona induziu uma acentuada hipotensão; -14,72±0,89; mmHg seguida de uma resposta taquicardica nas doses (12,5 e 25 mg/kg) e uma bradicardia na dose (50mg/kg) em ambos os modelos (WKY: 18,55±1,62; - 29,68±1,18; -52,45±1,18 mmHg e SHR: (-14,72±0,89; -20,44±1,09; -39,59±2,31 mmHg), efeitos estes que duraram cerca de 10–15 s. Após os bloqueios farmacológicos esses efeitos foram mais acentuados como o bloqueio com atropina que atenuou a queda da PAM e praticamente aboliu a queda da FC de animais WKY e SHR em todas as doses. A Sulcatona na dose de 50 mg/kg atenuou a hipotensão e reverteu a bradicardia após bloqueio com ioimbina. E após o bloqueio com L-Name os animais WKY tiveram uma redução na PAM nas doses de 25 e 50 mg/kg e a FC foi revertida na maior dose. A Sulcatona na forma livre (100 mg/kg, v.o.) não foi capaz de diminuir a pressão arterial de animais SHR porém o complexo Sulcatona/b-CD na dose de (200 mg/kg, v.o) reduziu a pressão arterial a partir de 2 horas após administração com tempo de ação de 3 horas quando comparado com o controle. . Dessa forma podemos concluir que, a Sulcatona possui ação anti-hipertensiva envolvendo a participação dos receptores muscarínicos, a2-adrenérgicos e na produção de NO em modelos de animais WKY e SHR levando a queda da pressão arterial e o complexo Sulcatona/β-CD melhorou de forma significativa o efeito antihipertensivo em modelos de animais SHR, demonstrado assim a eficácia da β-CD em melhorar a solubilidade da substância testada. Com relação a atividade da Sulcatona sobre os receptores de adenosina A2A em células A7r5 verificamos a presença deste receptor nessas células através da técnica de rt-qPCR. Para averiguar a ação da Sulcatona sobre os receptores A2A e a enzima CYP1B1, utilizamos o In-Cell Western Blotting na qual verificamos que a sulcatona aumentou a expressão desse receptor de forma dependente de concentração (10-6 a 10-3 M), porém a Sulcatona não foi capaz de alterar a expressão da enzima CYP1B1 no estado basal. Assim os resultados obtidos demonstram que verificamos a presença dos receptores de adenosina A2A em células de músculo liso vascular (A7r5), bem como, a sulcatona age diretamente ou modulando os receptores de adenosina A2A em células de músculo liso vascular (A7r5) em todas concentrações que foram utilizadas (10-6 a 10-3 M) e no estado a basal a sulcatona foi capaz de atenuar a expressão da enzima CYP1B1 na concentração de 10-5 M.

Rosmarinus officinalis L. (alecrim) é uma planta medicinal, da família Lamiaceae, também utilizada como condimento e conservante de alimentos. O óleo essencial extraído de suas folhas é um líquido aromático conhecido por diversas propriedades medicinais, inclusive por seu poder anti-inflamatório e antioxidante. Entre seus constituintes estão os monoterpenos 1-8 cienol, borneol, limoneno, canfeno, cânfora e γ-terpineno, aos quais são atribuídas suas principais atividades biológicas. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial anticoagulante e antiagregante do óleo essencial de Rosmarinus officinalis L. (OERO) livre e complexado em β-ciclodextrina (β-CD) e do seu constituinte γterpineno, além de analisar o efeito do γ-terpineno sobre a reatividade vascular em artéria mesentérica superior isolada de rato. Para verificar a segurança na utilização do OERO foram realizados os testes de: citotoxicidade, in vitro, pelo ensaio de redução dos sais de brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl) 2,5- difeniltetrazólio (MTT) em macrófagos murinos; e testes bioquímicos e análise histológica (coloração com hematoxilina-eosina) de ratos fêmeas tratadas uma vez ao dia, por gavagem, durante 7 dias com OERO livre (grupo OERO) ou complexado em β-CD (grupo OERO+βCD). Um grupo controle recebeu somente o veículo (Tween 80) e água destilada. No teste de MTT, concentrações de 200, 400 e 800 μg/mL apresentaram somente pequena redução da viabilidade celular e avaliando a CC50 do OERO livre e complexado com β-CD as amostras foram consideradas não tóxicas. Na investigação de parâmetros bioquímicos houve uma redução estatisticamente significativa de colesterol e glicose no grupo OERO+βCD quando comparado aos grupos OERO e controle. Redução de ALT também ocorreu nos animais do grupo OERO+βCD em relação ao grupo controle. Estudo histopatológico apresentou padrões de normalidade, sem lesão significativa tanto no tecido hepático quanto no renal. Avaliação do efeito anticoagulante foi realizada pelos testes coagulométricos, Tempo de Protrombina (TAP) e Tempo de Tromboplastina Parcialmente Ativada (TTPA), após tratamento, por via oral, durante 7 dias com OERO livre (grupo OERO), OERO complexado em β-CD (grupo OERO+βCD) ou γ-terpineno (grupo γterpineno). Resultados demostram um aumento significativo do TAP nos grupos OERO (21,96 ± 0,45), OERO+βCD (20,46 ± 1,66), e γ-terpineno (19,34 ± 0,55) quando comparados ao grupo controle (9,22 ± 0,23). Não houve diferença nos valores de TTPA. Pesquisa sobre o efeito do OERO na agregação plaquetária foi realizada por dois protocolos diferentes. No primeiro, o OERO foi adicionado diretamente, no agregômetro (100µM), ao plasma de animais não tratados. O resultado demonstrou uma redução significativa da agregação plaquetária induzida por ADP. No segundo protocolo, os animais foram tratados por via oral, durante 7 dias, com OERO ou OERO+βCD. Neste teste não houve diferença estatística entre os grupos sobre a agregação induzida por ADP. Reatividade vascular foi avaliada na artéria mesentérica superior e os resultados demonstraram que o γ-terpineno promoveu efeito vasorrelaxante na presença (pD2=5,58 ± 0,02) e na ausência do endotélio vascular (pD2=5,34 ± 0,03) sobre contrações induzidas por fenilefrina. A pré-incubação com diferentes concentrações de γ-terpineno não atenuou as contrações induzidas por adição cumulativa de fenilefrina. Para avaliar a participação dos canais de potássio no efeito vasorrelaxante, incubou-se os anéis de artéria mesentérica com tetraetilamônio (TEA) e verificou-se uma atenuação do vasorrelaxamento induzido pelo γ-terpineno (pD2=3,75 ± 0,09). Conclui-se que o OERO e OERO+βCD não apresentaram toxicidade e reduziram os valores de glicose, colesterol e ALT. OERO, OERO+βCD e γ-terpineno demonstraram efeito anticoagulante, quando utilizados por via oral e OERO apresentou efeito antiagregante na concentração de 100µM. Conclui-se ainda que o γ-terpineno apresentou efeito vasorrelaxante provavelmente por mecanismos envolvendo a participação dos canais de potássio.

A presente pesquisa resultou em uma solicitação de registro de patente de sensor colorimétrico na região da luz visível e ultravioleta a base de nanopartículas de prata estabilizada com goma de cajueiro para detecção de herbicidas organofosforados – HOf. O sensor é de fácil construção elevadas robustez, precisão e sensibilidade, quando utilizado em conjunto com o equipamento, conhecido como UV-Vis na detecção em laboratório. O sensor também pode ser utilizado in loco para detecção de HOf, onde indicará qualitativamente a presença ou não do herbicida. O biopolimero, goma de cajueiro, pode ser obtido a partir do exsudato da espécie Anacardium occidentale. As nanopartículas de prata estabilizadas com a goma do cajueiro purificada – AgNP-GC apresentam resposta visual de tonalidade castanho acobreado, a cor inicial expressa uma absorção de radiação eletromagnética máxima nos comprimentos de onda próximos a 400 nanômetros (nm) e encontra-se na amplitude de 0,8UA. O procedimento de detecção se dá pela reação de dispersão ou agregação dos sistemas coloidais de AgNP-GC pelos agentes presentes em ambos os sistemas de análise. O primeiro sistema consiste na utilização de uma agente catalisador onde a amostra contaminada com HOf,provoca a agregação das AgNP-CG de modo a mudar a resposta visual. O segundosistema não apresenta o agente catalisador gerando uma contra prova através de uma resposta visual inversa ao sistema anterior. A reação com AgNP-GC pode ser calculada em termos percentuais, pela modificação da amplitude no comprimento de 400nm, ou na modificação na cor do sensor nanoparticulado (para analises qualitativas), gerada durante a reação com o organofosforado. A reação é proporcional à concentração do herbicida, e pode ser efetuada em amostras líquidas (água, sangue, urina), como também líquidos extraídos de compostos pastosos (alimentos, vegetais, etc.), onde o sensor pode ser mergulhado.

Os folículos ovarianos pré-antrais (FOPA) se constituem uma fonte potencial de oócitos para utilização in vitro na produção de embriões. No entanto, os fatores que estabelecem o microambiente essencial ao desenvolvimento folicular ainda são pouco compreendidos. Assim, o aprimoramento de sistemas de cultivo de FOPA tem sido objeto de investigação em diferentes espécies. As células-tronco mesenquimais (MSC) surgem como uma importante ferramenta para a realização de técnicas de cultivo associadas aos FOPA, devido ao seu potencial de induzir a proliferação e a sobrevivência de vários tipos de células bem como a facilidade de obtenção e sua expansibilidade in vitro. Esta pesquisa tem por objetivo avaliar o uso de MSC no desenvolvimento de folículos ovarianos pré-antrais caprinos, por meio de dois sistemas de cultivo, in situ, folículos inclusos em fragmentos de ovário e o isolado. Na primeira etapa, fragmentos do córtex ovariano foram fixados, imediatamente, (controle não-cultivado) ou distribuídos em quatro tratamentos: tecido ovariano cultivado em meio controle (α-MEM⁺); tecido ovariano cultivado em α-MEM⁺ suplementado com FBS (α-MEM⁺ + FBS); tecido ovariano co-cultivado com células-tronco em α-MEM⁺ (α-MEM⁺ + SC); e finalmente tecido ovariano co-cultivado com célula-tronco em α-MEM⁺ + FBS (α-MEM⁺ + SC + FBS). Foram analisadas as taxas de sobrevivência, a ativação e o diâmetro folicular e a taxa de proliferação celular. Já, na segunda etapa, os folículos secundários foram isolados e distribuídos em dois tratamentos: folículos ovarianos cultivados na ausência (controle) ou presença de células-tronco. Os folículos foram cultivados em placas de 24 poços com insert durante 18 dias, sendo 2 folículos por poço, com troca parcial do meio a cada dois dias e nos dias 6, 12 e 18 coletados para dosagem hormonal. Após cultivo, foram avaliadas a morfologia e taxas de crescimento folicular, formação de antro, produção de estradiol (E2), progesterona (P4) e Glutationa reduzida (GSH), bem como as taxas de viabilidade e de maturação oocitária. Foi observado, na primeira etapa, que após 7 dias, o tratamento co-cultivo com células-tronco apresentou um percentual de folículos pré-antrais morfologicamente normais superior (P<0,05) quando comparado aos demais tratamentos bem como uma maior (P<0,05) taxa de ativação em relação ao controle cultivado. Ademais, o diâmetro folicular foi maior no tratamento co-cultivo com células-tronco em relação ao co-cultivo com células-tronco acrescido de FBS. Na segunda etapa, o tratamento com células-tronco foi o único que apresentou um aumento significativo e progressivo no diâmetro folicular ao longo do cultivo bem como mostrou maior (P< 0,05) taxa de crescimento folicular diário. Além disso, embora o diâmetro oocitário tenha sido inferior no tratamento com células-tronco, as taxas de retomada da meiose e maturação oocitária foram semelhantes entre os tratamentos.  Neste estudo, observou-se pela primeira vez que as células-tronco mesenquimais da geléia de Wharton têm potencial para serem usadas como suporte para o crescimento dos folículos pré-antrais. O sistema in situ contribuiu para melhorar a taxa de ativação, manteve a sobrevivência folicular e desenvolvimento folicular in vitro e o isolado influenciou no crescimento folicular, embora a taxa de recuperação oocitária não tenha sido expressiva.

Objetivou-se efetuar: o levantamento científico e tecnológico sobre atividades e aplicações biológicas e/ou terapêuticas; a caracterização palinológica, toxicogenética e fenólica; bem como a investigação das atividades antioxidante, gastroprotetora e cicatrizante; e a aplicação biotecnológica do pólen de pote de Melipona compressipes fasciculata (Smith, 1854). Os achados (entre 2010-2018), nas bases científicas, apontaram 13 artigos, que revelaram atividades antioxidante, antibacteriana, antiproliferativa e antitumoral; não foram recuperadas patentes com a temática, nos bancos averiguados. Foram realizadas coletas, em colmeias, de amostras de pólen de pote na estação chuvosa (PPMF1) e seca (PPMF2). A caracterização palinológica mostrou que as amostras são monoflorais, com predomínio de tipos polínicos de Mimosa pudica L. e Mimosa caesalpiniifolia Benth., respectivamente. Pelo bioensaio toxicológico de Artemia salina L., as CL50 foram: PPMF1 - 1159 e PPMF2 - 1134 µg/mL, sendo atóxicas. No bioensaio Allium cepa L. (8, 24, 80 e 240 µg/mL) não provocaram efeitos tóxicos, citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos significativos. O conteúdo fenólico total foi de PPMF1 - 9,32 e PPMF2 - 6,59 mg de equivalente de ácido gálico/g. O perfil fenólico, por CLAE e CLAE-MS/MS, revelou, em ambas amostras, compostos com atividades antioxidante e gastroprotetora reportadas, como ácido cafeico, quercetina, miricetina e naringenina, sendo que o PPMF2 exibiu maior presença desses. A atividade antioxidante, in vitro, foi de PPMF1 - 62,93% e PPMF2 - 58,86% de eliminação de DPPH, sem diferença significativa (test t de Student). Na investigação da atividade gastroprotetora em modelos agudos de lesões gástricas induzidas por etanol, etanol acidificado e isquemia/reperfusão em ratos, o prétratamento, via oral, com PPMF2 promoveu redução significativa da área de lesão (p < 0,05, ANOVA, pós-teste Tukey) com proteção de: etanol (24 e 80 mg/kg - 52 e 54%), etanol acidificado (8, 24 e 80 mg/kg - 33, 35, 39%) e isquemia/reperfusão (8, 24, 80 mg/kg - 72, 77, 92%), indicando ação citoprotetora e contra radicais livres. PPMF2 (24 mg/kg), aumentou significativamente os níveis de muco (em 122%), grupos sulfidrílicos não-proteicos (SH-NP) (em 92%) e diminuiu malondialdeído (MDA) (em 36%), sugerindo efeito potencializador do sistema antioxidante. No modelo crônico de úlcera gástrica por ácido acético, em ratos, o tratamento por 7 dias, via oral, com PPMF2 em todas as doses (3, 8 e 24 mg/kg) reduziu significativamente o volume da úlcera, com índices de cicatrização de 36, 85 e 97%, respectivamente. Esse tratamento com PPMF2 não causou alterações no ganho ponderal, peso de órgãos e parâmetros bioquímicos, reduziu marcadores de danos hepáticos, glicemia e elevou o HDL. PPMF2 (24 mg/kg) promoveu regeneração tecidual gástrica, elevação dos grupos SH-NP (103%), diminuição de MDA (84%) e elevação de fibras colágenas. Com isso, conclui-se que o pólen de pote de M. compressipes fasciculata é monofloral, atóxico, não provoca riscos de instabilidades genéticas (nas concentrações testadas), apresenta fenólicos, atividades antioxidante, gastroprotetora e cicatrizante, potencializa defesas mucosais, melhora o perfil bioquímico e não causa sinais de toxicidade em ratos, sendo um potencial agente para uso na prevenção e/ou tratamento da úlcera gástrica, com viável aplicação em produtos biotecnológicos, alimentícios e/ou farmacêuticos.

O câncer de mama é a neoplasia que mais acomete mulheres em todo o mundo. No Brasil, a sua incidência vem aumentando significativamente, tendo sido estimado para o ano de 2018-2019 cerca de 59.700 novos casos e 14.206 mortes pela doença. O estudo de biomarcadores no carcinoma mamário vêm se destacando como uma ferramenta importante na avaliação de estratégias prognósticas e principalmente terapêuticas, pois os biomarcadores, tais como os relacionados à proliferação e metástases, apresentam a vantagem de sofrerem alterações em seus níveis antes de qualquer resposta clinica ao tratamento, e assim poderiam selecionar melhor as pacientes que se beneficiariam do tratamento adjuvante. A propósito, as metaloproteinase de matriz (MMP) têm sido sugeridas como potencial biomarcador no câncer de mama, em particular as metaloproteinase de matriz 2 (MMP-2) e metaloproteinase de matriz 9 (MMP-9), cujo papel é degradar o colágeno IV que reveste a matriz extracelular dos tecidos neoplásicos, favorecendo o crescimento e disseminação de células tumorais. A literatura sobre a matéria é escassa e controvertida. Todavia, a maioria dos estudos sobre a expressão das MMP-2 e MMP-9 no carcinoma mamário e fibroadenoma são comumente em níveis séricos, com escassez de comparação imunoistoquímica entre os dois tumores, o que nos levou à concepção do presente estudo. Esta tese foi estruturada em dois capítulos. O capítulo I que teve como objetivo detalhar na literatura estudos disponíveis em várias bases de dados que investigam o impacto dos níveis de expressão de MMP-2 e MMP-9 em mulheres com câncer de mama. As evidências científicas reunidas nesta revisão sugerem que o aumento da expressão de metaloproteinases pode levar a uma maior agressividade do tumor e, conseqüentemente, a um pior prognóstico do câncer de mama. O capítulo II teve como objetivo comparar a expressão das MMP-2 e MMP-9 em mulheres com câncer de mama e com fibroadenoma, que mostrou uma expressão positiva de MMP-2 em 41,67% e 86,11% em fibroadenoma e carcinoma mamário, respectivamente (p<0,0009), enquanto que a MMP-9 mostrou 66,67% e 93,33%, nos grupos controle e estudo, respectivamente (p <0,0138). O presente estudo mostra que a expressão da MMP-2 e MMP-9 foi significativamente maior no câncer de mama do que no fibroadenoma.

O câncer gástrico é a quarta neoplasia mais frequente no mundo, causando mais de 13.000 mortes por ano somente no Brasil. A maior parte das pesquisas voltadas para o estudo do câncer gástrico concentra-se em países com altas taxas de incidência, como o Japão. Estudos e políticas públicas são cada vez mais necessários para estabelecer um melhor manejo do câncer gástrico no Brasil uma vez que esta neoplasia é caracterizada por diversos fatores. A sobrevida relativa de indivíduos acometidos pela neoplasia gástrica é de cinco anos, sendo considerada baixa tanto para países desenvolvidos como em países em desenvolvimento. Este mal prognóstico deve-se principalmente pelo diagnóstico tardio que leva a poucas possibilidades de tratamento. Este trabalho tem o objetivo de investigar os genes regulados pelo oncogene MYC, de forma a estabelecer padrões de expressão gênica que guiem ferramentas para diagnóstico e prognóstico da neoplasia gástrica. Em uma primeira abordagem foi utilizada uma cultura de células estabelecidas a partir de pacientes com câncer gástrico do tipo metastático, para, por meio de silenciamento do gene MYC, Sequenciamento de Nova Geração e arranjos de PCR quantitativo em tempo real (qRTPCR), triar um painel de genes importantes regulados por MYC e seus perfis de expressão gênica. Do painel de 150 genes foram selecionados três genes regulados pelo oncogene MYC significativamente correlacionados ao estágio de metástase à distância do câncer gástrica, foram eles: UXT, MTA2 e CIAPIN1. Os três genes foram fortemente associados aos estágios mais avançados dessa neoplasia (P<0.0001). No entanto, apenas UXT e CIAPIN1 puderam detectar metástases à distância em pacientes em estágios iniciais da doença (P<0.0001) com alta sensibilidade (92.3% para UXT e 93.3% para CIAPIN1) e especificidade (90.7% para UXT e 96.2% para CIAPIN1). Além disso, a alta expressão de UXT e CIAPIN1 foi associada significativamente a uma baixa sobrevida global dos pacientes diagnosticados com câncer gástrico (P<0.0001). O estudo conclui que o oncogene MYC atua regulando milhares de genes na carcinogênese gástrica e alguns desses genes estão associados à estágios avançados do câncer, tal como em indivíduos que possuem metástases à distância. Dessa forma, tais genes marcadores podem ser utilizados para guiar o prognóstico e tratamento de pacientes acometidos com o câncer gástrico.

Os cânceres podem ser considerados como um tecido anormal que são caracterizados pelo crescimento de células desordenadas incapazes de formar estruturas funcionais estáveis. Infelizmente, na maior parte dos casos, o tratamento por medicamentos quimioterápicos leva a efeitos colaterais severos. Os derivados da 2-cloro-Narilacetamida pertencem a uma classe química amplamente utilizada como intermediários sintéticos para a obtenção de substâncias bioativas para fins medicinais e químicos. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito citotóxico de moléculas sintéticas da classe 2-cloro-n-arilacetamida, sendo dividida em 2 capítulos. No capítulo 1 foi abordado as atividades antiproliferativas de dez substâncias derivadas de 2-cloro-Narilacetamidas (1-10), frente a 5 linhagens tumorais e em culturas primárias de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) com o ensaio de Alamar blue, bem como sua atividade hemolítica frente a eritrócitos humanos. Com exceção dos compostos 6 (R = OCH3) e 9 (R = COOH), todos os compostos revelaram valores de CI50 variando de 4,9 μM (HL-60) a 50,1 μM (OVCAR-8). O composto 2 (CCL) foi o mais ativo contra três das cinco linhagens tumorais estudadas neste trabalho (HL-60, SF295 e HCT-116). Os compostos não causaram ação citolítica in vitro significativa em eritrócitos humanos. A maioria das moléculas também não foram citotóxicas na proliferação de CMSP humanas, e os valores de CI50 variaram de 11,8 a 44,6 μM. Um estudo toxicológico em duas doses (150 e 300 mg/kg) foi realizado observando parâmetros gerais de comportamento por screening hipocrático, assim como avaliação da atividade exploratória, coordenação motora e ansiedade por meio dos testes de campo aberto, rota rod e labirinto em cruz elevada. Foram observadas mortes somente na maior dose (300 mg/kg) nas três substâncias e não apresentaram alterações exploratórias e motoras. Para a avaliação do potencial antitumoral in vivo, as três moléculas foram administradas via intraperitoneal na dose de 25 mg/kg/dia, durante 15 dias consecutivos em camundongos imunodeficientes transplantados com células de carcinoma de cólon humano (HCT-116). Apenas os compostos CCL e CBR reduziram significativamente o crescimento tumoral em 21,2% (0,57 ± 0,02 g) e 27,5% (0,53 ± 0,04 g) quando comparados ao controle negativo. Mortes ou alterações no peso relativo de órgãos e em parâmetros hematológicos não foram detectados. No capítulo 2 foram avaliados a toxicidade dos compostos CCL, CBR e CNT frente a náuplios de Artemia salina, seguida teste de toxicidade aguda com embriões de peixe-zebra (FET) bem como em células normais humanas de fibroblasto de pulmões (MRC-5). Os três compostos apresentaram valores de CE50 frente a A. salina tóxicos quando comparados ao controle, sendo a CCL a que apresentou menor valor (0,0075 µg/mL). No FET observou-se severa mortalidade nos organismos dos tratamentos com a CCL mais elevados, 1,93 e 7,2 mg/L, com 90% e 100% de morte, respectivamente. Na avaliação da atividade citotóxica de MRC-5 todas as 3 substâncias foram atóxicas às células. A toxicidade por meio do modelo vegetal Allium cepa, os três compostos inibiram o crescimento das raízes, revelando toxicidade macroscópica. Foi realizado, por último, a avaliação oxidante/antioxidante em linhagens de S. cerevisiae, onde a CCL não modulou os danos oxidativos causados pelo peróxido de hidrogênio, já a CBR e CNT conseguiram modular esses danos, nas menores concentrações testadas (1 e 5 μg/mL). Dessa forma, os compostos CCL, CBR e CNT mostraram potencial antitumoral in vitro e in vivo contra células tumorais humanas e fraca atividade contra células normais humanas, com indício de toxicidade branda e ausência de comprometimento funcional severo nos animais tratados com o composto, não demonstrando também efeitos oxidativos ou antioxidantes frente a S. cerevisiae.

A gabapentina (GBP), análoga do ácido gama-aminobutírico (GABA), é um fármaco anticonvulsivante, com indicações também para neuralgia pós-herpética e dor neuropática. E recentemente foi comprovada a ação da GBP revertendo o processo inflamatório geral. Sendo este efeito baseado na antagonização de eventos e vias pró-inflamatórias específica como, a migração de células do sistema imunológico para o sítio da lesão, a redução da atividade da enzima Ciclooxigenase2 e de citocinas pró-inflamatórias como, TNF-α e IL-1β. Com isto a gabapentina tem um forte indício de estar atuando na inibição do Fator Nuclear КB (NF-КB), um ativador do cluster de genes do processo inflamatório, que incluem os genes para TNF-α e IL1β. E sabendo que o receptor ativado por proliferador de peroxissoma gama (PPARγ) é um importante receptor envolvido na ativação do NF-КB, o presente trabalho teve como objetivo estudar a participação da via do PPAR-γ durante o possível efeito antiinflamatório promovido pela GBP na colite induzida pelo ácido trinitrobenzenosulfônico (TNBS) em ratos. Os resultados aqui apresentados sustentam de forma muito sólida a tese de que a GBP atua diminuindo os parâmetros do processo inflamatório na colite induzida por TNBS, principalmente através da sinalização em mastócitos, e além disto, este efeito atribuído à GBP certamente está relacionado à inter-relação com o receptor PPAR-γ que por sua vez inibe a ativação do NF-kB e tendo como consequência a diminuição da ativação da cadeia gênica relacionada ao processo inflamatório intestinal que por sua vez promove uma melhora significativa do quadro inflamatório apresentado pela colite induzida por TNBS.

O termo “dismenorreia” é utilizado para denominar as cólicas menstruais dolorosas. O aumento da contratilidade uterina foi proposto como uma das principais causas da dismenorreia primária (DP). Esse estudo propôs o efeito relaxante da goma do cajueiro purificada (GCP) e em sistema de nanopartículas na contratilidade uterina de roedores. A Goma do Cajueiro foi extraída por incisões no tronco da árvore Anacardium Ocidentale e purificada em laboratório. A originalidade do material foi comprovada por Espectroscopia no Infravermelho e Análise Elementar. Para investigação do efeito relaxante em útero isolado de rata (in vitro) foram utilizadas ratas Wistar virgens (Rattus norvegicus). Para o estudo in vivo foram utilizados camundongos fêmeas virgens (Swiss). Todos os animais foram pré-tratados com estradiol antes dos experimentos. As contrações uterinas em órgão isolado foram monitoradas por um transdutor de deslocamento de força conectado a um amplificador de sinal. Os estudos foram realizados em útero pré-contraído com ocitocina (10^-2 UI/mL) ou KCl (60mM) em diferentes concentrações da GCP (10^-3–10³μg/mL). Foi investigado o efeito da GCP sob uma curva concentração-resposta à ocitocina. O mecanismo de ação foi estudado através da participação dos canais de potássio na presença de TEA⁺ 1mM e 5 mM. O teste de contorção induzida por ocitocina foi utilizado como modelo de DP in vivo. A GCP foi ainda modificada por acetilação para síntese de nanopartículas. Esta foi realizada utilizando o método de diálise ou deslocamento do solvente e analisadas em DLS, Potencial Zeta e índice de polidispersão (IPD). A estabilidade coloidal das nanopartículas foram monitoradas por 12 meses. Os ratos receberam as nanopartículas de Goma de Cajueiro Acetilada (NPsGCA) por gavagem. O tecido uterino foi coletado para exame histopatológico (H & E).  A CGP reduz a contração uterina induzida pela ocitocina in vitro de forma significativa e dependente da concentração (CE₅₀ = 2,53 ± 0,54 μg/mL) com eficácia máxima de 97,8 ± 0,8%. A característica do antagonismo da contração é do tipo não competitivo, o que confirma que a GCP não age a nível de receptores.  Na presença de 1mM e 5 mM de TEA⁺ o valor de E_max foi inferior a 50%, o que sugere o envolvimento dos canais de K⁺. O estudo in vivo demonstrou que a GCP reduziu significativamente o número de contorções induzidas por ocitocina com uma inibição máxima 78,86 ± 8,97% na dose de 0,3 mg/kg. Cortes histológicos confirmaram o efeito tocolítico da GCP. A espectro do infra vermelho e análise elementar atestaram a originalidade da GC e comprovam a hidrofobização por acetilação. As NPsGCA foram sintetizas com partículas de distribuição unimodal (tamanho: 257,63±1,60 nm; potencial zeta: -32,18±0,70 mV; IPD: 0,140±0,012). A estabilidade coloidal das nanopartículas monitorada por 12 meses foi confirmada, o que determina um parâmetro importante para interação e penetração de barreiras biológicas. As NPsGCA inibiram 88,66% as contorções induzidas por ocitocina na concentração de 0,03 mg/kg. Os cortes histológicos confirmaram o efeito tocolítico. O presente estudo demonstrou a existência de um efeito terapêutico inovador da GCP e o aprimoramento do mesmo em sistema de nanopartículas, ao comprovar sua capacidade de diminuir a contração do músculo liso uterino induzida por ocitocina in vitro e in vivo. O mecanismo do efeito tocolítico foi estudado e sugere estar associado à ativação de canais de K⁺. Isso amplia as possibilidades da Goma do Cajueiro ser mais investigada para o tratamento da DP.

A contaminação por substâncias químicas e seus efeitos no meio ambiente especialmente em águas é uma das preocupações da comunidade científica. Os poluentes que merecem destaque são os produtos e metabólitos de origem farmacêutica, devido promoverem a contaminação do ecossistema, serem tóxicos, carcinogênicos e dificilmente são degradados. Os fármacos, tais como, antibióticos e anti-inflamatórios são reportados na literatura como principais contaminantes de águas, isso se deve ao amplo expectro de atuação. O fármaco doxazosina base é atualmente muito utilizado devido suas propriedades e aplicações em diversos tipos de enfermidades, sendo portanto, que a presenta de moléculas deste composto em efluentes provenientes da indústria farmaceútica e do esgoto doméstico podem contaminar, ao longo dos anos, o meio ambiente aquático. A literatura reporta diversos métodos de remoção de substâncias químicas do meio aquatíco, sendo o processo de adsorção o mais simples, eficiente e econômico.Dentre os materiais que podem ser utilizados como matrizes adsorventes, as argilas e em especial a argila vermiculita que se trata de um argilomineral de baixo custo, apresenta alta capacidade de adsorção e troca iônica. Logo, este trabalho teve como objetivo utilizar a argila vermiculita natural e modificada por processo térmico e químico (organofilização) para remoção do fármaco doxazosina em meio aquoso. Inicialmente foi realizada uma revisão bibliográfica e uma prospecção tecnológica em busca de artigos nas bases de artigos Scopus, Web of Science e Scielo e para a busca de patentes as bases INPI (Instituto Nacional da Propriedade Industrial), EPO (Instituto Europeu de Patentes), USPTO (Escritório de Patentes e Marcas dos Estados Unidos), WIPO (Organização Mundial da Propriedade Intelectual) e Derwent Innovations Index. Foram encontrados 49 artigos nas bases dos quais apenas 7 relatam estudos que envolvem a vermiculita para remoção de fármacos. Porém das 1471 patentes nenhuma fazem o uso da argila para tal processo. Para o estudo, a vermiculita foi calcinada em temperatura de 900 ºC e organofilizada com sal de amônio (CTMA-Br) em seguida caracterizada por FRX, DRX, DSC, FTIR e MEV. A vermiculita natural, expandida e organofilizada foram aplicadas em estudos de adsorção com variação de massa, tempo, pH e temperatura do fármaco doxazosina em meio aquoso. Os experimentos mostraram que a argila expandida e organofilizada apresentam uma capacidade de adsorção do doxazosina superior à vermiculita natural, em que esta apresentou uma capacidade máxima de adsorção de 58,29 mg g^-1 em pH 1, a expandida de 76 mg g^-1 em pH 3 e a organofilizada de 106,42 mg g^-1. O mecanismo de interação adsorvente-adsorvato indicaram adsorção por quimissorção, e os dados se ajustaram melhor aos modelos de Freundlich e Temkin. Os dados revelaram que a argila expandida e modificada apresentam-se como alternativas promissoras para remoção de fármacos promovendo a revitalização do meio ambiente aquático.

A diosgenina (25R-espriost-5-en-3-β-OH) é um esteróide encontrada em várias plantas farmacologicamente ativas, incluindo espécies de Solanum e Dioscorea. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito anti-hipertensivo da diosgenina e seu complexo nanoestruturado em modelos de menopausa e hipertensão L-NAME, bem como os possíveis mecanismos de ação envolvidos nos efeitos observados. Uma prospecção científica e tecnológica foi realizada e revelou poucas variedades de aplicações farmacológicas a diosgenina complexada em β ciclodextrina (β-CD) em atividade antihipertensiva. Dessa forma, é necessário explorar esse fitoesteróide na área científica e tecnológica, devido ao número limitado de patentes e publicações. Para isto, foram realizadas diferentes formulações do complexo β-CD (MF, LIOF e CE) e avaliadas físico-quimicamente quanto ao melhor método de inclusão supramolecular. A formulação nanoestruturada que apresentou melhor inclusão de Diosgenina foi a obtida pelo método CE. Consequentemente, os testes biológicos de atividade cardiovascular partiram desta formulação. Na caracterização e doseamento, constatou-se que o β-CD apresentou 47,54±1,7 % de eficiência de encapsulação e 7,13±0,25 % de eficiência de carga. No teste de toxicidade aguda, os animais tratados com β-CD não apresentaram sinais de toxicidade aguda até a dose de 2000 mg/kg, por via oral. Nesta mesma dose, o β-CD apresentou capacidade antiagregante, reduzindo de maneira significativa os valores de TTPA em relação ao grupo tratado com salina, por via oral. Na atividade anti-hipertensiva, o β-CD demonstrou importante efeito hipotensor dependente de dose (75, 150 e 300 mg/kg, v.o), enquanto a diosgenina isolada (300 mg/kg, v.o) não apresentou redução da pressão arterial. Além disso, o complexo β-CD na dose 300 mg/kg, v.o, apresentou atividade antihipertensiva semelhante em modelo OVX e OVX/LNAME. Nos testes in vitro, a diosgenina promoveu vasorrelaxamento em anéis aórticos de ratas OVX précontraídos com fenilefrina de maneira dependente de concentração e dependente do endotélio vascular. A participação de mediadores endoteliais foi verificada na presença de L-NAME (100 μM), ODQ (10 μM), Indometacina (10 μM), Atropina (1 μM) ou Tiron (100 M) por 30 minutos, e nestas condições observou-se que ocorreu uma atenuação do vasorrelaxamento promovido por diosgenina. Em anéis sem endotélio pré-contraídos com KCl 80 mM, a adição cumulativa de diosgenina não promoveu efeito vasorrelaxante concentração-dependente. Dessa maneira, esse fitoesteróide demonstrou importante segurança biológica, efeito antiagregante e anti-hipertensivo, com possível envolvimento da via eNOS/CG/COX, bem como a participação dos receptores muscarínicos e dos ânions superóxidos. E não ocorre a inibição do influxo de cálcio através dos canais para cálcio sensíveis a voltagem.

O Príon Scrapie faz parte do grupo das Encefalopatias Espongiformes Transmissíveis (EETs), que são desordens neurodegenerativa fatais, e se manifestam em ovinos domésticos (Ovis aries), causando grandes prejuízos econômicos na ovinocultura. O Scrapie pode se manifestar por mutações nos códons 136, 154 e 171, no éxon 3 do gene PRNP. O polimorfismo nestes códons tem estreita relação com a resistência ou susceptibilidade ao desenvolvimento da doença, dependendo da combinação alélica entre os códons. A identificação pode contribuir consideravelmente para diminuir o efeito dessa doença nos rebanhos. O acesso ao DNA genômico requer a extração e isolamento do DNA configurando um passo fundamental para vários estudos clínicos relacionados, incluindo genética, genômica, polimorfismo genético, fingerprinting de DNA e sequenciamento de genes. A genotipagem molecular é o segmento que está em rápido crescimento no mercado de diagnóstico in vitro e que pode ser um passo fundamental para o controle da doença. Diante disso, no presente trabalho de tese foram desenvolvidas duas patentes de invenção, um referente a kit de extração rápido de DNA de células sanguíneas, e outro referente a kit de genotipagem que permite a identificação e diferenciação molecular in vitro de ovinos susceptíveis ao Scrapie. Com essas invenções esperase adicionar mais duas novas ferramentas moleculares, sendo que as mesmas primam pela sua simplicidade e pela rapidez, podendo auxiliar no combate ao Scrapie em ovinos, contribuindo para o controle e prevenção dessa doença, de forma minimizar prejuízos para a economia nacional e internacional.

Introdução: O ferulato de etila é um fenilpropanóide com atividades anti-inflamatória, antioxidante e neuroprotetora de origem natural e sintética com potenciais usos na indústria nutracêutica e farmacêutica. Entretanto, possui baixa solubilidade em água o que compromete a absorção no trato gastrintestinal, diminui a biodisponibilidade e compromete a reprodutibilidade dos efeitos in vivo para aplicações farmacêuticas de uso oral. Formas farmacêuticas para aplicação tópica têm aumentado nos últimos anos devido a busca por formas de tratamento com menos efeitos adversos e colaterais. Ciclodextrinas de origem natural e sintética são amplamente utilizadas a fim de melhorar o perfil de dissolução de substancias pouco solúveis. As nanoemulsões tem sido a tecnologia de escolha para aplicação de substancia hidrofóbicas de forma tópica propiciando ambiente favorável a pele e perfil de liberação controlado. Objetivo: Desenvolver, caracterizar e testar em modelo de edema de pata induzido por carragenina complexo de inclusão de B-ciclodextrina com ferulato de etila e nanoemulsão para vetorização de ferulato de etila por via tópica. Material e Métodos: Complexos de inclusão de ferulato de etila e B- ciclodextrina foram obtidos por mistura física, malaxagem, liofilização e spray drying. Os complexos obtidos foram avaliados quanto ao teor de ferulato de etila, estabilidade, perfil de dissolução, pesquisa de interações químicas através de FT-IR e avaliação da atividade antinflamatória in vivo através de modelo de edema de pata induzido por carragenina em ratos. Para desenvolvimento da nanoemulsao diagrama de fases pseudo-ternário foi desenvolvido com variações nas concentrações de surfactantes (Tween 80, Span 80), óleo (óleo de soja) e água. Os sistemas foram obtidos por ultrassonicação e foram avaliados quanto aos aspectos macroscópicos bem como tamanho de partícula, índice de polidispersão e potencial zeta. Ao melhor sistema obtido foi incorporado ferulato de etila a 1%, 2.5% e 5%. A melhor nanoemulsao foi então avaliada quanto a estabilidade, pesquisa de interações químicas através de FT-IR, avaliação de permeação in vitro através de célula de Franz, teste de irritação cutânea e avaliação de atividade antinflamatória in vivo através de modelo de edema de pata induzido por carragenina em ratos. Resultados: Os complexos de inclusão obtidos resultaram em aumento da solubilidade e estabilidade comparativamente ao ferulato de etila isolado. Além disso, os complexos obtidos por malaxagem, liofilização e spray drying apresentaram melhor efeito farmacológico comparativamente ao ferulato de etila 100 mg/kg v.o e o complexo obtido por spray drying apresentou efeito anti-inflamatório significativamente melhor que a indometacina (10 mg/kg) da segunda a quarta hora testadas. Dos sistemas obtidos, as melhores características de tamanho de partícula, PDI e estabilidade foi obtido com a proporção de 2.5% de óleo e 10% de tensoativo e 1% de ferulato de etila. A análise por FT-IR não revelou interação entre os componentes da nanoemulsão. O ensaio de liberação in vitro confirmou o perfil de liberação controlado, 26% de liberação do ativo após 6 horas de ensaio. A nanoemulsao obtida não apresentou sinais de irritação cutânea e foi efetiva na redução do edema (p<0,01) da terceira a quinta hora no ensaio de edema de para em ratos. Conclusão: Os sistemas binários entre ferulato de etila e B-ciclodextrina resultaram em aumento da solubilidade, melhora do perfil de dissolução do ativo, aumento da estabilidade e potência farmacológica em modelo inflamatório in vivo. A nanoemulsao desenvolvida apresentou boa estabilidade, perfil de liberação controlado e foi efetiva na redução da inflamação no modelo testado.

A especie Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) é uma planta medicinal, bastante utilizada na América do Sul, com diveras atividades farmacológica atribuídas principalmente a metabólitos secundários da classe dos terpenos (diterpenos clerodânicos). Esse trabalho teve como objetivo avaliar a ação antitumoral e antinociceptiva de uma fração acetato de etila rica em diterpenos clerodânicos (FC) e do composto Casearina X (Cas X) extraídos de C. sylvestris. FC (10 e 25 i.p. e 50 mg/kg/dia v.o.) e Cas X (25 i.p. e 50 mg/kg/dia v.o.) inibiram o crescimento tumoral em 7 dias de tratamento (p<0,05), reduziram a integridade da membrana, induziram a fragmentação do DNA e a despolarização mitocondrial (p<0,05). Animais tratados com FC 25 mg/kg/dia i.p e v.o., apresentaram uma maior sobrevida. No ensaio antiproliferativo em fibras ocas (HFA) a FC i.p e v.o. reduziu a proliferação celular em linhagens de glioblastoma humano (SF-295) e carcinoma colorretal humano (HCT-116) (p<0,05). No ensaio em modelo xenográfico houve uma redução significativa dos tumores dos animais tratados com a FC com ausência de alterações significantes na massa úmida dos órgãos e nos parâmetros hematológicos (p>0,05). Análises microscópicas dos tumores (HCT-116) revelaram alterações relevantes e morte celular por necrose (FC 10 mg/kg/dia i.p.). Em análises histológicas do fígado, foi constatada vacuolização e degeneração, hemorragia observadas nos rins, seguida de congestão celular apenas nos grupos FC 10 mg/kg/dia (i.p. e v.o.). A FC apresentou efeito antinociceptivo significativo em camundongos sadios e acometidos pelo tumor S-180 no teste de contorções abdominais, com destaque para animais tratados com maiores doses (25 i.p. e 50 mg/kg v.o.). Na fase neurogênica do teste de formalina, todas as amostras reduziram de forma significativa o tempo de lambida da pata. Na fase inflamatória apenas as doses por via oral tiveram efeitos promissores (p<0,05). Na avaliação do envolvimento sistemas de dor mediados por vias especificas, o antagonista naloxona reverteu o efeito antinociceptivo na primeira fase do teste enquanto os antagonistas L-NAME e Atropina (p<0,05) reverteram o efeito antinociceptivo da FC (50 mg/kg v.o.), na segunda fase do teste de formalina. A FC (25 i.p. e 50 mg/kg v.o.) diminuiu significativamente a hiperalgesia mecânica em até 4 horas (p<0,05), seguido da ausência em parâmetros comportamentais e motores em animais acometidos do tumor S-180 (p>0,05). Juntos, esses achados corroboram com o uso popular de C. sylvestris Sw para fins terapêuticos como proposto pelo Sistema Único de Saúde (SUS), sugerindo o desenvolvimento de um fitomedicamento com ação anticâncer e analgésica, tendo como base moléculas de diterpenos do tipo clerodânicos, com administração oral em fórmulas farmacêuticas sólidas.

O pólen apícola tem sido alvo de estudos que investigam sua composição química, fitoquímica e atividade antioxidante, bem como seus efeitos biológicos de ação antiinflamatória, antiviral, antimicrobiana, hepatoprotetora, preventivo de prostatite benigna, antienvelhecimento e cicatrizante. Fundamentada nestas informações, o objetivo do estudo foi desenvolver membrana de colágeno contendo extrato de pólen apícola no tratamento de lesões cutâneas, avaliando seu efeito cicatrizante. A caracterização de bioativos do extrato de pólen baseou-se em testes colorimétricos para determinação do conteúdo de polifenois totais, de flavonoides totais e da atividade antioxidante avaliada por três testes in vitro: DPPH, ABTS e FRAP. O extrato também foi testado para atividade antimicrobiana. Os materiais desenvolvidos (membrana com extrato e membrana sem extrato) foram submetidos à avaliação genotóxica via cometa alcalino e micronúcleo (MN), usando como controle positivo para ambos a ciclofosfamida. As membranas foram implantadas via intraperitoneal nos animais e verificadas as alterações em exposição aguda e crônica. A cicatrização foi acompanhada histologicamente por 21 dias, sendo quatro grupos experimentais (n=5): grupo controle CTR, sem cobertura; grupo pomada CP, representando o parâmetro comercial; grupo membrana CMP, que recebeu a membrana contendo o extrato; e CMSP, que recebeu a membrana sem o extrato. Pela avaliação fitoquímica, notou-se um conteúdo de polifenois. Os extratos mostraram ação antimicrobiana apenas contra Pseudomonas aeruginosa. Além disso, para ambos os testes de genotoxicidade, as membranas não apresentaram alterações mutagênicas significativas. E o histológico comprovou a eficiência da membrana no processo de cicatrização, pois aos 21 dias a área da lesão encontrava-se restaurada e sem sinais inflamatórios.

Os imunoensaios realizados em plataformas eletroquímicas apresentam alta sensibilidade. Um dispositivo simples (imunossensor) feito com materiais de baixo custo, à base de eletrodo de grafite (GE) modificado pela adsorção de hemácias sensibilizadas por antígenos de Trypanosoma cruzi (T. cruzi) (GETC), foi utilizado para detectar anticorpos específicos de T. cruzi em amostras de soro humano, pois as amostras positivas e negativas analisadas revelou um ponto de corte em 16,55%. A modificação que ocorreu na superfície do GE consumiu 10 vezes menos volume de suspensão de hemácias sensibilizadas, quando comparado ao volume utilizado pelo kit de reação de hemaglutinação indireta (HAI). A doença de Chagas é uma infecção responsável pela perda da capacidade de trabalho e pôr óbitos em muitos países, estima-se que 100 milhões de pessoas em todo mundo possam ser afetadas pela doença. O GE e as modificações que ocorreram em sua superfície foram caracterizados por microscopia eletrônica de varredura (MEV), voltametria cíclica (CV), espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) e cronopotenciometria. Os resultados obtidos para doença de Chagas por cronopotenciometria mostraram alta correlação com os obtidos pelo ensaio imunoenzimático (EIE) para o diagnóstico da infecção por T. cruzi. O tempo total gasto para o diagnóstico da doença de Chagas por cronopotenciometria foi de 10 minutos, enquanto os kits comerciais que foram utilizados nesse trabalho levaram de 1 a 2 horas. Assim, o imunossensor produzido, mostrou-se rápido e sensível. Uma plataforma eletroquímica inédita para a reação de hemaglutinação de anticorpos específicos contra hemácias sensibilizadas, para o diagnóstico da doença de Chagas.

A abelha brasileira, Melipona rufiventris, vulgarmente conhecida como Uruçu Amarela, apesar do potencial ecológico e econômico, assim como as demais espécies desse grupo, tem sofrido bastante com a devastação ambiental provocada pelo homem, principalmente por conta da constante especulação agropecuária das regiões onde a espécie é endêmica, o que a colocou dentro da categoria de espécies ameaçadas de extinção pelo ICMBio. Porém, deve-se haver cautela quanto a esse enquadramento, principalmente pelo fato de se tratar de uma espécie com taxonomia indefinida. Assim, vê-se a necessidade do uso de marcadores moleculares, para não só solucionar essa questão, como também para identificar o perfil genético das populações presentes no Brasil de forma a auxiliar nas estratégias de conservação. Baseado nisso, o objetivo principal desse trabalho foi realizar um estudo genômico de frequência e abundância dos microssatélites na abelha-sem-ferrão Melipona rufiventris, M. subnitida e M. fasciculata utilizando a tecnologia do Sequenciamento de Nova Geração (NGS) e identificar e desenvolver marcadores microssatélites específicos e heteroespecíficos para M. rufiventris com validação feita por meio de inferência populacional de abelhas presentes em Minas Gerais, Goiás e Piauí. Para isso, de parcela do genoma, uma plataforma de base de dados de sequências foi gerada, a partir do qual foram selecionadas e identificadas regiões microssatélites com potencial para estudos genéticos. No geral, obtevese um total de 3.495 (137.313 contigs), 11.869 (47.081 contigs) e 93.588 SSRs (141.412 contigs), presentes em M. rufiventris, M. fasciculata e M. subnitida, respectivamente. Os tipos de microssatélites mais frequentes foram di e trinucleotideos, comuns em regiões neutras do DNA. Trinta e sete marcadores heteroespecificos (19 de M. subnitida e 18 de M. fasciculata) foram utilizados em M. rufiventris, sendo que maior parte da transferência foi relacionada à espécie M. subnitida, comprovada sua eficácia por meio de pequeno estudo populacional. De 25 marcadores desenvolvidos especificamente para M. rufiventris, 16 foram polimórficos, sendo capaz de demonstrar, como esperado, alta diferenciação genética (FST=0,252, RST=0317 e Dest= 0,284) entre as populações de Goiás, Minas Gerais e Piauí. Por meio desse trabalho de Tese, obtivemos um conjunto de novos marcadores eficazes para inferências populacionais em abelhas M. rufiventris, corroborando inclusive com as suspeitas de que as populações, presentes nos biomas Cerrado, Caatinga e Mata Atlântica possam ser subespécies diferentes.

A espécie Terminalia fagifolia Mart., presente no cerrado brasileiro, se destaca pelo seu uso etnofarmacológico. Em estudos anteriores, a fração aquosa do extrato etanólico de T. fagifolia apresentou resultados promissores no tocante à atividade antibacteriana, antibiofilme e citotóxica, sendo a fração do extrato etanólico mais ativa dentre aquelas testadas. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi averiguar o potencial biotecnológico da fração aquosa do extrato etanólico de T. fagifolia Mart., bem como isolar e identificar seu constituinte majoritário. A fração aquosa foi avaliada quanto ao seu potencial antifúngico contra leveduras e fungos filamentosos, de acordo com os documentos M27-A3 e M38-A2 da CLSI (2008), com posterior análise das alterações morfológicas em Candida albicans por Microscopia de Força Atômica. O potencial anti-inflamatório da fração aquosa foi verificado pelos modelos de edema de pata e peritonite induzidos por carragenina em camundongos, além do modelo de neuroinflamação induzida por LPS em células microgliais. A atividade antioxidante da fração aquosa foi caracterizada por ensaios in vitro, tais como sequestro dos radicais DPPH, ABTS, além da capacidade de redução do ferro (FRAP) e de absorção do radical oxigênio (ORAC). A toxicidade da fração aquosa foi testada em eritrócitos humanos e em larvas de Galleria mellonella. Para identificação do constituinte majoritário, o estudo fitoquímico da fração aquosa foi realizado por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (CL-EM) e ressonância magnética nuclear (RMN). As características do mecanismo de ativação da molécula foram estudadas usando simulações computacionais de química quântica. O extrato etanólico e a fração aquosa de T. fagifolia foram utilizados para síntese verde de nanopartículas de prata (AgNPs), que foram caracterizadas por espectroscopia de UV-vis, FTIR, NTA, MET/EDS e Voltametria cíclica. Uma vez caracterizadas, as AgNPs foram testadas quanto a sua atividade antioxidante (DPPH, ABTS, FRAP e ORAC), com determinação de fenólicos e flavonoides totais, além da sua atividade antibacteriana e antifúngica. O teste de hemólise foi realizado para verificar a biocompatibilidade das AgNPs. Após a realização dos testes, a fração aquosa demonstrou excelente potencial antifúngico, principalmente contra leveduras sensíveis e resistentes do gênero Candida sp.. Em relação aos modelos murinos utilizados, a fração aquosa diminuiu siginificativamente o edema de pata na terceira hora, com percentual de inibição do processo inflamatório semelhante ao da Indometacina, além disso, reduziu significativamente os níveis de malondialdeído no modelo de peritonite. Em micróglias, o pré-tratamento com a fração aquosa foi capaz de inibir significativamente a produção de NF-kB após indução com LPS. Quanto aos ensaios de toxicidade, a fração aquosa não demonstrou toxicidade contra as larvas de G. mellonella e não diminuiu a viabilidade dos eritrócitos, nas concentrações ≤ 500 µg/mL. A partir das análises fitoquímicas, identificou-se um derivado do ácido elágico como o constituinte majoritário da fração aquosa. Os estudos teóricos mostraram semelhança estrutural entre a molécula isolada e a indometacina, além de um excelente potencial antioxidante Com o extrato etanólico e a fração aquosa foi possível sintetizar nanopartículas de prata esféricas e poligonais, respectivamente e as AgNPs sintetizadas apresentaram atividade antimicrobiana e potencial antioxidante. Os resultados obtidos nessa investigação indicam que a fração aquosa do extrato etanólico tem potencial para aplicação na área biomédica, com baixa toxicidade.

O diabetes mellitus tipo 2 (DM2) caracteriza-se por uma hiperglicemia, devido a uma deficiência de insulina causada por disfunção das células β pancreáticas, com prevalência e morbimortalidade elevada. A Bauhinia forficata Link subsp. forficata é uma espécie vegetal com atividade antioxidante significativa e que pode ser utilizada no tratamento dessa patologia e prevenção de suas complicações. Diante disso, esse estudo objetivou obter e caracterizar extratos microencapsulados, investigar a bioacessibilidade dos compostos bioativos identificados e sua atividade antioxidante e seus efeitos hipoglicemiantes em modelo animal para diabetes induzidos por estreptozotocina, bem como sua toxicogenética para a aplicação em formulações farmacêuticas para o tratamento do diabetes. Inicialmente, fez-se uma revisão de patentes sobre o tema, no âmbito nacional e internacional, empregando os termos “Bauhinia forficata” e “diabetes mellitus”. Posteriormente, empregou-se a microencapsulação por spray drying para obter os extratos secos, que foram caracterizados quanto ao teor de umidade, atividade de água, densidade,  granulometria, reologia, morfologia (microscopia eletrônica de varredura), análises térmicas (calorimetria exploratória diferencial e termogravimetria), difração de raio-X, espectrometria de infravermelho, análise de cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada à espectrometria de massas. A bioacessibilidade dos polifenóis foi avaliada utilizando-se soluções de enzimas fisiológicas, nos diferentes estágios do processo digestivo in vitro e seus efeitos na resposta ao estresse oxidativo foram verificados pelos ensaios do poder de redução do íon ferro e pela capacidade de absorção de radicais de oxigênio. Avaliou-se também os efeitos hipoglicemiantes e toxicogenéticos desses extratos microencapsulados em camundongos da linhagem Swiss. Induziu-se o DM2 nestes animais, com estreptozotocina e administrou-se os extratos, por 28 dias, sendo verificada a glicemia semanalmente e depois analisou-se os parâmetros bioquímicos, hematológicos e histológicos.  Na revisão de patentes, encontrou-se apenas sete patentes com a utilização da B. forficata no tratamento diabetes, sendo importante para subsidiar o desenvolvimento desta tese. Os extratos microencapsulados das folhas de B. forficata Link apresentaram baixos valores de umidade e atividade de água, tamanho das partículas adequados para a incorporação em comprimidos e cápsulas, com características amorfas. A espectroscopia no infravermelho e a cromatografia de alta eficiência confirmaram a presença de compostos fenólicos. Os polifenóis e os flavonoides bioacessíveis, em cada etapa da digestão in vitro apresentaram atividade antioxidante, como também hipoglicemiantes, pois os resultados indicaram que a glicemia dos animais diabéticos reduziu 77,26%, 57,79% e 45,15%, após o tratamento com extrato seco infusão (200 e 600 mg/kg/dia) e extrato seco decocção (600mg/kg/dia), respectivamente, quando comparados com o grupo diabético tratado com metformina (21,53%). Observou-se também uma melhora da resposta glicêmica nesses mesmos grupos, além de uma recuperação das células β pancreáticas. Assim, este estudo demonstrou que esses extratos, apresentaram atividade hipoglicemiante, com um efeito benéfico superior ao da metformina, sendo potenciais agentes terapêuticos para aplicações em formulações farmacêuticas para o tratamento do diabetes mellitus tipo 2.

As espécies do filo Basidiomycota, a exemplo do Neonothopanus gardneri, são ricas em bioativos com potencial biotecnológico e farmacológico. Apresentam atividades antiinflamatórias, antioxidantes, antimicrobianas, imunoestimulante, hipoglicemiante e antitumoral. Entretanto, os estudos sobre essas propriedades com o N. gardneri ainda são raros. A terapia do câncer ainda apresenta diversos efeitos colaterais e riscos para instabilidade genética, especialmente em células não tumorais, o que suscita pesquisas com novos compostos. Assim, o estudo teve por objetivos identificar alguns dos compostos químicos por abordagem fitoquímica, cromatografia líquida e ressonância magnética; além de avaliar os efeitos toxicogenéticos e antitumorais dos extratos metanólico e acetato de etila obtidos do N. gardneri, em Saccharomyces cerevisiae, modelos murinos para Sarcoma 180 e para o câncer de mama. Em estudos de revisão em periódicos PubMed, Science Direct, Web of Science e Scopus, utilizando os indexadores 'mushroom', ‘bioluminescent mushrooms’, ‘mushroom and biological activities’, ‘mushroom and secondary metabolites’ e ‘mushroom and antitumoral activity’ foi possível constatar que os metabólitos e compostos químicos, obtidos dos Basidiomycota, apresentam efeitos tóxicos/citotóxicos por diversos mecanismos compatíveis com apoptoses. Em S. cerevisiae e em células de Sarcoma 180, os extratos em 500, 1000, 1500 e 2000 μg/mL foram avaliados quanto a danos oxidativos e viabilidade celular, com aplicação do teste de micronúcleos com bloqueio de citocinese em células de Sarcoma 180. Em modelos para o câncer de mama, Swiss (20 a 50 g e 6 a 7 semanas de idade) foram submetidos à administração do 7,12-dimetilbenzantraceno (6 mg.Kg-1 v.o), durante onze semanas, com monitoramento toxicológico e citogenético. A terapia com o extrato metanólico foi feita na dose de 10 mg.kg-1 v.o; e com ciclofosfamida, em 25 mg.Kg-1 i.p. No extrato metanólico foi identificado alcaloides, açúcares redutores, proteínas, catequinas, taninos e depsídeos e foram isoladas duas amidas inéditas: 7,8-di-hidroxi-13-oxo-heneicosa-9,11- dienamida e 7,8 -di-hidroxi-13-oxo-octadeca-9,11-dienamida como isolados majoritários. Em S. cerevisiae, nas duas maiores concentrações, os extratos induziram danos oxidativos; mas, nas menores, foram antioxidantes. Citotoxicidade foi observada para todas as concentrações, em Sarcoma 180, na coloração Tripan, como também pelos índices de divisão nuclear sem e com apoptoses e necroses; e por danos genotóxicos similares à doxorrubicina (2 μg/mL). No monitoramento toxicológico (comportamental [campo aberto, rota rod], peso de órgãos, hematológico e bioquímico para enzimas renais e hepáticas) não foram observadas alterações comportamentais, renais e hipocráticas. Mas, observou-se alterações em plaquetas e em enzimas hepáticas. Em camundongos fêmeas, o carcinoma mamário ductal invasivo foi observado na mama direita, por análises histopatológicas e por marcação de Ki67. O extrato metanólico teve efeitos antitumorais para o carcinoma mamário com menos danos em tecidos não neoplásicos (medula, fígado e linfócitos de sangue periférico), de forma contrária ao observado para a ciclofosfamida (25 mg.Kg-1 i.p), durante as três semanas de terapias. Efeitos antitumorais do extrato foram observados por mecanismos associados a danos ao DNA e indução de apoptoses, possivelmente, com inclusão de danos oxidativos induzidos por seus bioativos. Entretanto, os compostos isolados ainda devem ser testados como produtos naturais para formulações antitumorais.

A pesquisa de novos antimicrobianos faz-se necessária devido ao surgimento de cepas multi resistentes, incluindo micro-organismos que não possuem sensibilidade a nenhum dos fármacos disponíveis. Outro aspecto relevante é a baixa taxa de lançamento de novos agentes, por esse motivo, é urgente que pesquisas sejam realizadas para desenvolvimento de novos antimicrobianos. Nesse contexto, as riparinas são moléculas promissoras, pois há relatos na literatura da atividade de alguns dos análogos sobre Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Dessa forma, com este trabalho objetivou-se investigar o potencial das riparinas no combate a doenças infecciosas, tanto na atividade intrínseca, quanto modulação da resistência a antibióticos. Para isso, primeiramente foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) das riparinas A, B, C, D e E contra S. aureus e foi avaliado seu potencial modulador no co-tratamento com ciprofloxacino e norfloxacino. Entre as riparinas testadas, Rip-E foi a que apresentou melhor atividade intrínseca (CIM = 32 µg/mL) e, Rip-B foi a com maior atividade moduladora, sendo capaz de reduzir o CIM das fluoroquinolonas oito vezes. A partir desse resultado, Rip-B teve seu mecanismo de modulação da resistência investigado. Para isso, foi testado também, o CIM de brometo de etídio (substrato da bomba NorA) em co-tratamento com riparina, além de ensaios de efluxo com brometo de etídio com fluorescência. Rip-B foi capaz de reduzir o CIM do brometo de etídio no co-tratamento, sugerindo inibição do efluxo. Esse mecanismo foi confirmado nos ensaios de efluxo e também na docagem. Foram feitos estudos de docagem para avaliar a compatibilidade deste composto com o possível sítio de ação. A Rip-B foi a molécula com mais provável encaixe com a bomba NorA de S. aureus. A partir da determinação do CIM de S. aureus, a riparina com maior atividade antimicrobiana intrínseca teve seu CIM avaliado para outras cepas de bactérias Gram positivas (S. aureus and S. epidermidis) e Gram negativas (E. coli, Salmonella Typhimurium e Pseudomonas aeruginosa), leveduras (Candida albicans e C. tropicalis) e sua atividade contra Leishmania amazonensis. Entre as riparinas, Rip-E foi a com maior atividade antimicrobiana intrínseca sobre S. aureus e, foi capaz de inibir o crescimento de bactérias Gram positivas e Gram negativas, sendo mais ativa contra as Gram positivas. Possui também atividade fungicida contra as duas espécies de Candida testadas, além de demonstrar atividade leishmanicida. Diante desses resultados pode-se concluir que as riparinas possuem um grande potencial antimicrobiano para tratamento de doenças infecciosas ou em co-tratamento associadas à ciprofloxacino e norfloxacino.

A Sterculia striata é uma planta nativa do cerrado brasileiro que produz um polissacarídeo exsudato (goma) com composição similar a goma karaya, uma goma comercial empregada na indústria farmacêutica. O objetivo deste trabalho de tese foi avaliar as propriedades do exsudato da Sterculia striata a fim de ampliar o seu potencial em aplicações no campo farmacêutico. A primeira fase deste estudo apresentou uma análise bibliométrica a respeito das potencialidades de aplicações para as espécies do gênero Sterculia na área farmacêutica. Foi possível observar pesquisas voltadas para estudo das propriedades reológicas, influência do pH, modificação química, desenvolvimento de sistemas de liberação de fármacos e estudos in vivo. Após a visão panorâmica do gênero, o estudo voltou-se para a espécie Sterculia striata e os resultados obtidos evidenciaram apenas 23 estudos sobre os produtos obtidos a partir de diversas partes da planta, dentre elas, deu-se enfoque aos estudos sobre o polissacarídeo exsudato onde foram encontrados apenas 8 artigos. Estes abordaram estudos sobre caracterizações físico-químicas, reologia e aplicações em formulações farmacêuticas e filmes. Na prospecção tecnológica sobre esta espécie foi observado apenas um pedido de depósito de patente, o que favorece a pesquisa e desenvolvimentos de novos produtos com potencial de aplicação na indústria farmacêutica. Na segunda fase a goma foi isolada e purificada e a sensibilidade deste polissacarídeo ao pH foi avaliada. Os resultados obtidos mostraram que o pH influencia no potencial zeta da goma Sterculia striata. Os valores de potencial zeta diminuíram significativamente de 0.939 mV para -74.9 mV à medida que o pH aumentou de 1 a 7 e quando o pH aumentou de 8 até 10 o potencial zeta aumentou de -73.9mV para -70.01mV. As análises reométricas evidenciaram alterações na viscosidade em resposta a testes realizados a diferentes pH’s. Esta resposta pode ser útil no desenvolvimento de novos sistemas de liberação de fármacos, tendo em vista que o corpo humano apresenta variações de pH, como por exemplo, ao longo do trato gastrointestinal, o que imprimiria na variação do comportamento do exsudato para liberação de fármacos. A resposta a variação do pH na viscosidade e potencial zeta da goma torna-se assim relevante para o emprego em sistemas de liberação de fármacos. Na terceira fase a goma foi modificada por meio da reação de aminação e a modificação foi comprovada pela técnica FTIR. Esta modificação alterou a massa molar da goma. As análises de cromatografia de permeação em gel evidenciaram que a goma nativa apresentou uma massa molecular de aproximadamente 1,8x10⁷ g.mol^-1, enquanto que goma modificada apresentou uma massa molecular de 6,3x10⁶ g.mol^-1. Através das análises de potencial zeta foi possível observar que a carga superficial reduziu, a goma nativa apresentou uma carga superficial no valor de -59,1 ± 0,794 enquanto que a goma aminada apresentou um valor de -33,1 ± 3,32. Estudos de mucoadesão ex vivo também foram realizados e a goma aminada apresentou uma força de adesão de 80,27 mN, enquanto a goma nativa apresentou uma força de 78,80 mN. A aminação também promoveu um aumento na atividade antimicrobiana. Neste aspecto, a goma nativa apresentou um efeito inibitório de 69,27% para S. aureus e após a modificação este efeito aumentou para 89,77%. Estes resultados sugerem que a aminação melhorou as propriedades da goma, aumentando assim o seu potencial em aplicação no campo farmacêutico. Na quarta fase uma formulação oral para proteínas terapêuticas foi desenvolvida e a insulina foi utilizada como fármaco modelo. A formulação apresentou eficiência de encapsulação de cerca de 70% de insulina. A estabilidade de armazenamento foi monitorada durante 30 dias através da análise do potencial zeta e a formulação manteve-se estável ao longo desses 30 dias. A mucoadesão ex vivo foi avaliada em texturômetro e a formulação apresentou força de adesão de 92,46mN. Além disso, a formulação foi capaz de proteger 64% da insulina em meio gástrico simulado em ensaio de liberação in vitro, demonstrando que a goma Sterculia striata pode ser promissora no desenvolvimento de novas formulações farmacêuticas. Por fim, foi realizado o pedido de depósito da formulação foi submetido ao Núcleo de Inovação e Transferência de Tecnologia da Universidade Federal do Piauí.

Nos últimos anos tem havido um crescente interesse para a aplicação de produtos naturais em diversos setores, sendo os óleos vegetais considerados substratos bastante promissores para diversas aplicações industriais. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi sintetizar e caracterizar biopolímeros à base de óleo de pequi (Caryocar brasiliense Cambess) para fins biotecnológicos. Foi realizada uma prospecção tecnológica e científica, com o objetivo de avaliar e apresentar uma visão geral e prospectiva do desenvolvimento tecnológico e científico dos polímeros a base de óleos vegetais. As buscas foram realizadas nas bases de patentes INPI, EPO e USPTO e nas bases científicas Web of Sciences e Scopus. O número de patentes relacionadas a síntese de polímeros a partir de óleos vegetais ainda é reduzido se comparar com a quantidade de publicações científicas distribuídas em diversas áreas, com a classe que abrange os compostos macromoleculares orgânicos, sua preparação ou seu processamento químico, tendo maior destaque. Foi possível constatar que o processamento do óleo de pequi para obtenção de biopolímeros é inovador, uma vez que, até o presente momento, não existe registro científico nem tecnológico desta aplicação. Nesse contexto, biopolímeros a base de óleo de pequi foram sintetizados nas razões molares 1:4 e 1:5 (Monoacilglicerol: anidrido maleico), P1 e P2 respectivamente, e caracterizados por Difração de Raios-X, Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier, Ressonância Magnética Nuclear de ¹H, análises térmicas (termogravimetria e Termogravimetria derivada) e ângulo de contato.  A aplicabilidade dos biopolímeros foi avaliada por teste de liberação (Diclofenaco de sódio - DS), pelo potencial oxidante/antioxidante (Saccharomyces cerevisiae), efeito geno/citotóxico (Allium cepa) e eficiência na adsorção de corante  Rodamina B, considerando parâmetros de dosagem, efeito de pH da solução, tempo de contato, temperatura e concentração inicial do corante. O percentual de DS liberado foi maior em pH 7,4 do que em pH 1,2, tanto para o P1 quanto para o P2, indicando que os polímeros em estudo apresentam boa sensibilidade ao pH; os biopolímeros não apresentaram efeito oxidante para nenhuma das concentrações testadas, contudo apresentaram significativo potencial de redução da inibição do crescimento e aumento na sobrevivência das linhagens testadas, apontando que estes são capazes de reforçar as defesas antioxidantes celulares. Nos resultados da avaliação da genotoxicidade e citotoxicidade dos polímeros em estudo, detectou-se que em baixas concentrações estes não apresentam efeito genotóxico e nem citotóxico. Em relação à adsorção, o polímero P1 apresentou uma maior capacidade de adsorção do corante RB (71,38 ± 0,95 mg g^-1) que o P2 (43,62 ± 0,24 mg g^-1). A quantidade de corante adsorvido aumenta com a diminuição da temperatura e as isotermas a 298 K ajustaram-se melhor ao modelo de Temkin, para o P1 e P2. A cinética de adsorção pode ser ajustada ao modelo de pseudo-segunda ordem, com R² ˃ 0,99, sugerindo que adsorção da RB pelos biopolímeros foi de natureza química.  A dessorção do corante RB a partir da superfície dos biopolímeros foi realizada variando-se o pH e o tempo, onde se observou a liberação máxima de 90,72%  ± 1,57, no pH 3 para o P1 e 35,37% ± 1,94, para o P2 no pH 5, indicando que os dois polímeros são eficientes na liberação do corante.

A dor é um dos mecanismos adaptativos e protetores mais importantes do corpo. Envolve o funcionamento normal dos sistemas fisiológicos, que engloba quatro estágios: transdução, transmissão, percepção e modulação. A dor neuropática é um tipo de dor crônica que resulta de uma lesão que afeta o sistema nervoso central ou periférico estando comumente associada a diversos processos patológicos. A terapêutica para esse tipo de dor inclui fármacos comumente associados à efeitos adversos, tolerância e eficácia reduzida ao longo do tratamento. Os produtos naturais como óleos essenciais e seus constituintes, se tornam uma alternativa promissora para o tratamento dessa patologia. Da mesma forma, sistemas microemulsionados para entrega sistêmica de substâncias lipofílicas vêm ganhado destaque no campo da biotecnologia farmacêutica, principalmente quando administrados por via transdérmica, uma vez que os constituintes de sua formulação conseguem atravessar o estrato córneo carreando as substâncias ativas para seu local de ação. Diante disso, o presente estudo tem como objetivo desenvolver sistemas micromeulsionados contendo γ-terpineno e investigar seu potencial antinociceptivo e toxicológico, por via trasndérmica, em modelo animal de dor neuropática. Utilizou-se um diagrama de fases pseudo-ternário para preparação des sistemas microemulsionados contendo labrasol, plurol, miristato de isopopila, γterpineno e água. O DFPT mostrou a formação de 15 microemulsões (MEs), das quais foram selecionadas quatro para caracterização e testes de estabilidade termodinâmica. As formulações apresentaram uma taxa de liberação cumulativa acima de 37%, em 24h, revelando um perfil de liberação controlada. As MEs selecionadas para análise foram classificadas como sistemas isotrópicos de óleo em água (condutividade = 9,56 ± 0,01 µS/cm), com gotículas na faixa nanométrica (124,4 ± 243,7 nm), índice de polidispesão entre 0,235 e 0,315 e potencial zeta variando entre -28,1 e -55,1. Assim, a partir desse estudo foram desenvolvidos sistemas microemulsionados promissores para a entrega controlada de y-terpineno. Além disso, foi evidenciado que quantidades menores de tensoativos produziram formulações com maior estabilidade termodinâmica. As microemulsões escolhidas foram avaliadas quanto ao seu potencil antinociceptivo em modelo de dor neuropática. Os resultados mostram um aumento significativo no limiar de retirada da pata na dose de 200 mg/kg das formulações F1 e F2, aos 60 e 120 min após a administração, evidenciando a ação antinociceptiva da formulação. Na avaliação da sensibilidade térmica a F2 também mostrou ação antinociceptiva aos 60 min. As formulações transdérmicas na dose de 2000 mg/kg não demonstraram nenhum sinal de toxicidade clínica-comportamental durante os 14 dias de avaliação. Assim, os resultados deste estudo nos permitem concluir que formulações microemulsionadas de γ-terpineno, apresentaram atividade antinociceptiva, sugerindo efeito terapêutico com administrações agudas.

A Samanea tubulosa Benth. (Fabaceae), conhecida popularmente por ‘Bordão de Velho’, com ampla distribuição pelos estados do Piauí e Maranhão. É cultivada para fins ornamentais e industriais, e utilizada na medicina tradicional para tratar processos inflamatórios e infecções cutâneas. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antinociceptiva das frações obtidas do extrato etanólico das vagens de Samanea tubulosa Benth., utilizando modelos de inflamação e nocicepção, bem como a identificação dos constituintes químicos responsáveis pelas ações das frações. As frações semipurificadas foram obtidas a partir do extrato etanólico das vagens de Samanea tubulosa Benth, e a toxicidade aguda das frações hexânica, acetato de etila e aquosa foi avaliada em dose única durante 14 dias de observação. O efeito antiedematogênico das frações hexânica, acetato de etila e aquosa, foi avaliado diante dos seguintes agentes flogísticos: carragenina, dextrana e prostaglandina. Além disso, foi avaliada a atividade antinociceptiva nos testes de formalina, capsaicina e glutamato. Determinou-se também os possíveis mecanismos de ação envolvidos no efeito antinociceptivo da fração hexânica e acetato de etila a partir do sistema opioide, canais de K + ATP e via de L - arginina-óxido nítrico. As análises fitoquímicas revelaram na fração hexânica a presença de ácidos graxos e seus ésteres (52,1%) e triterpenos derivados do lupano (28,58%) como a lupenona (16,53%) e lupeol (12,05%), já na fração acetato de etila foi identificado compostos flavonoides e fenólicos como a luteolina. Nos ensaios farmacológicos com a administração das frações hexânica, acetato de etila e aquosa por via oral, foi observado no teste de toxicidade aguda que os animais tratados com as frações não apresentaram sinais de toxicidade, até a dose de 2000 mg kg-1 . No teste de edema de pata induzido por carragenina, observou-se maior efeito antiedematogênico apenas na fração hexânica e acetato de etila na dose de 200 mg kg-1 com pico de resposta na 3ª h, em ambas as frações. A fração hexânica na dose de 100 mg kg-1 reduziu o edema induzido por dextrana a partir de uma hora de observação. Os grupos tratados com as frações hexânica e acetato de etila provocaram uma diminuição significativa no edema induzido por prostaglandina nos tempos de 60 a 120 min. No teste da formalina e capsaicina foi observado ação antinociceptiva. No teste do glutamato, as frações hexânica e acetato de etila apresentaram atividade antinociceptiva somente na dose de 12,5 e 25 mg kg-1 . A antinocicepção produzida pelas frações hexânica e acetato de etila foi significativamente revertida pela naloxona, indicando que as frações atuam pela via opioide. A resposta antinociceptiva da fração acetato de etila foi bloqueada pela glibenclamida, indicando que esta fração atua pela via dos canais de K+ ATP. Contudo, a resposta antinociceptiva das frações hexânica e acetato de etila não foram bloqueadas quando os animais foram pré-tratados com L- arginina indicando que as frações hexânica e acetato de etila não atuam por essa via. Nos testes do campo aberto e rota rod para as frações hexânica e acetato de etila não houve alteração da atividade locomotora dos animais. Conclui-se, portanto, que as frações em estudo exercem atividade anti-inflamatória através da inibição do edema de pata induzido por diferentes agentes flogísticos. E apresentam atividade antinociceptiva possivelmente relacionado com a via opioide.

Os distúrbios neuropsiquiátricos afetam uma grande quantidade da população mundial. A busca por moléculas naturais com atividades antioxidantes é o foco das pesquisas atuais. O estudo avaliou o potencial farmacológico e toxicogenético do ácido anacárdico frente a ansiedade, depressão, convulsão, inflamação e dor em modelos comportamentais murinos. Camundongos Swiss machos (n=8/grupo- 25-30 g) foram tratados por via intraperitoneal com ácido anacárdico nas doses de 10, 25 e 50 mg.kg^-1  para: (1) ansiedade (rota rod, campo aberto, labirinto em cruz elevado e de esconder esferas); (2) depressão (suspensão da cauda, nado forçado e campo aberto); (3) nflamação (edemas por carragenina; e em 25 mg.kg^-1 por prostaglandina E₂, dextrano, histamina e composto 48/80) e antinociceptiva (testes de formalina, de contorções abdominais e de placa quente); e (4) convulsivantes (pentilenotetrazol, pilocarpina, eletrochoque e ácido caínico (nas doses de 10, 25, 50 e 100 mg.kg^-1 ). Estudos de possíveis mecanismos de ação foram feitos para os sistemas GABAérgico, serotoninérgico, noroadrenérgicos e antagonista dos receptores opioideo, bem como em estudos oxidantes/antioxidantes de peroxidação lipídica, glutationa reduzida, catalase, e em Saccharomyces cerevisiae mutadas em defesas antioxidantes. Foram feitos estudos toxicogenéticos para dose efetiva 50%, dose tóxica 50%, índice de proteção e de danos ao DNA (ensaio cometa versão alcalina). O ácido anacárdico, nas doses testadas, não induziu alterações no tempo de permanência e nem locomotoras comparadas com o grupo veículo. Significantes atividades ansiolíticas nas análises do tempo gasto nos braços abertos, distância percorrida nos braços e número de entradas nos braços abertos, quando comparadas ao veículo, por mecanismos associados ao sistema GABAérgico e ações antioxidantes, sem efeitos genotóxicos em hipocampo e córtex cerebral. O ácido anacárdico não apresentou toxicidade e teve ação antidepressiva por inibição dos receptores de recaptação de serotonina e 5HT-_1A, mas não interage nos receptores α-adrenoceptores e β-adrenoceptores; bem como pela inibição da enzima óxido nítrico sintetase e guanilil ciclase, e ações antioxidantes em S. cerevisiae. Apresentou efeitos anticonvulsivantes por mecanismos de inibição de Na+, GABAérgicos e como antioxidante (inibição de peroxidação lipídica, pelo índice de proteção e efeitos antioxidantes em S. cerevisiae) e teve ação antinociceptiva. Nos edemas induzidos por prostaglandina, dextrano, histamina e composto 48/80, o ácido anacárdico em 25 mg.kg^-1 reduziu edema e migração leucocitária e neutrolífica para a cavidade intraperitoneal, bem como diminuiu atividade da mieloperoxidase, concentração de malondialdeído, aumento dos níveis de glutationa reduzida, lambidas, contorções abdominais e tempo de latência ao estímulo térmico, por possíveis mecanismos associados aos receptores opióides. O ácido anacárdico é uma molécula antioxidante promissora para formulações neurofarmacológicas.

O caranguejo-uçá, Ucides cordatus (Linnaeus, 1763), é uma espécie pertencente à família Ocypodidae e representa um dos mais importantes componentes da fauna dos manguezais, tem grande importância econômica e ecológica para as áreas de manguezal do Brasil. O objetivo desse trabalho foi estudar a sistemática molecular e estrutura genética populacional do caranguejo-uçá, Ucides cordatus, tendo em vista o fornecimento de subsídios à sua exploração racional como medida para permitir a sustentabilidade do recurso, e a maximização de aproveitamento do potencial já explorado do caranguejo de mangue. Foram desenhados primers nas regiões adjacentes à região controle isolaram a mtDNA-CR do Ucides cordatus (Decapoda, Brachyura); e realizados os sequenciamento da mtDNA-CR As regiões hipervariáveis também foram amplificadas com sucesso, HV1 (637 pb) e HV2 (445 pb). A RC do DNAmt em U. cordatus mostrou ser altamente polimórficas em as suas extremidades 5 'e 3' .Avaliamos as relações entre U. cordatus cordatus e U. cordatus occidentalis usando sequências de nucleotídeos do RNA ribossômico de subunidade grande (LSUrRNA ou 16S), citocromo oxidase I (COX-1) e também citocromo b (Cyt -b) do genoma mitocondrial como caracteres moleculares para inferência de relações filogenéticas. livre da influência ambiental. As matrizes de distância evolutiva foram calculadas a partir de dados de seqüência de DNA. As árvores filogenéticas foram inferidas com base nessas seqüências de nucleótidos. Foi obtido um forte sinal filogenético que suporta uma filogenia bem resolvida do grupo Thoracotremata. O uso de genes codificadores de proteínas na reconstrução de filogenia também provou ser útil. Avaliamos a distribuição espacial da diversidade genética e das taxas de migração (fluxo genético) entre as populações de Ucide cordatus no Brasil. Os loci foram altamente polimórficos, com média de 12 alelos por locus. Apesar da alta variabilidade genética, observou-se uma falta de diferenciação populacional de acordo com os valores de FST (média = 0,016) e análise bayesiana. As altas taxas de migração encontradas entre as populações (~ 17,2 migrantes efetivos por geração entre cada par de população) parecem ser a principal força que atua para sustentar a distribuição homogênea da diversidade genética entre as populações. Esses achados são vitais para o estabelecimento de uma base de dados a ser usada no desenvolvimento de programas de conservação para a espécie.

SOUSA, M. M. Bioacessibilidade, capacidade antioxidante e efeitos toxicogenéticos de polifenois do jamelão (Syzygium cumini (L.) Skeels) e aplicação tecnológica do fruto. 2018. 177 p. Tese (Pós-Graduação em Biotecnologia - RENORBIO) - Universidade Federal do Piauí, Teresina, Piauí, 2018. O jamelão (Syzygium cumini (L.) Skeels) é um fruto rico em nutrientes essenciais, e em compostos bioativos com ação antioxidante e farmacológica comprovadas. Estudos têm evidenciado os benefícios do jamelão na saúde, no entanto, o consumo desse fruto e de seus derivados têm encontrado resistências em função de sua elevada adstringência. Diante disso, esse estudo objetivou avaliar o potencial tecnológico do uso do jamelão em novos produtos; caracterizar o perfil polifenólico do fruto; avaliar a bioacessibilidade dos compostos bioativos identificados; analisar os possíveis efeitos toxicogenéticos, bem como propor um novo produto para fins de inserção no mercado. Inicialmente, fez-se uma revisão na literatura de artigos científicos e patentes sobre o tema, no âmbito nacional e internacional, empregando os termos “Syzygium cumini”, “Eugenia jambolana”,“jambolan”,“jamun” or “java plum”. Posteriormente, empregou-se técnica multivariada de misturas, simplex centroid design, para otimizar diferentes propoções do solvente extrator (água, etanol e acetona), e quantificação do conteúdo total das classes polifenólicas, bem como a determinação da atividade antioxidante. A caracterização dos polifenóis foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada à espectrometria de massas. Avaliou-se os efeitos citogenotóxicos do extrato aquoso do jamelão, por meio de bioensasios com Artemia salina Leach e Allium cepa Linn, em diferentes concentrações. Foram determinados os componentes da mistura complexa, assim como sua ação antioxidante frente ao radical peroxil e oxidação lipídica. Para digestão in vitro das diferentes classes polifenólicas, empregou-se soluções de enzimas fisiológicas, nos diferentes estágios do processo digestivo. A extração de biopolifenois no processo simulado de digestão foi comparado à extração química, e verificado seus efeitos na resposta ao estresse oxidativo em Saccharomyces cerevisiae. Os resultados do levantamento científico e tecnológico apontaram 23 artigos e 20 patentes, utilizados na construção da revisão. O estudo mostrou que as características químicas, nutricionais e fitoquímicas do fruto favorecem o consumo in natura, bem como a elaboração de sucos, néctares, geléias, bebidas alcoólicas e especiarias. No entanto, demonstra que o principal entrave da aplicação do jamelão na indústria de alimentos é o controle de antocianinas e de taninos, que afetam cor e sabor, respectivamente. A análise multivariada demonstrou que as melhores respostas da extração de polifenois foram obtidas com a mistura binária água:acetona, 0,5:0,5 (v.v-1 ). A identificação dos biopolifenois demonstrou que quercetina deoxihexosideo e trímero de epigalocatequina foram as principais responsáveis pela ação antioxidante. O extrato aquoso do fruto também apresentou ação antioxidante, demonstrada pelos ensaios ORAC (112,31 ± 12,56 μmolTrolox.g-1 ) e inibição da oxidação lipídica (53,66%). Os resultados da citogenotoxicidade demonstraram que concentrações inferiores a 1500 μg.mL-1 , não exibiram efeito citotóxicos pelos métodos analisados. O estudo demonstrou ainda que o extrato aquoso do fruto não apresentou efeitos genotóxicos e mutagênicos significativos (p>0,05), em nenhuma das concentrações testadas nas raízes de A. cepa. Quanto à digestão, os resultados demonstraram aumentos significativos (p<0,05) dos biopolifenois durante a digestão gástrica. Na etapa duodenal, flavonoides e proantocianidinas foram estáveis às mudanças de pH, enquanto antocianinas sofreram degradação ao entrar em contato com o pH neutro. A atividade antioxidante das frações bioacessíveis está correlacionada às elevadas concentrações de flavonoides e proantocianidinas, refletindo na modulação de enzimas antioxidantes em S. cerevisiae. A partir dos resultados, conclui-se que o jamelão é uma fonte de compostos fenólicos bioacessíveis, capazes de prevenir, sequestrar radicais livres e reparar danos ocasionados pelo estresse oxidativo, além de modular a atividade das enzimas superóxido dismutase e catalase. Aliado a esses aspectos, os biopolifenois encontrados no fruto não ocasionam riscos de instabilidade genética, se consumido nas concentrações adequadas. Esses dados demostram a expressiva ação antioxidante do jamelão, estimulando seu consumo e, aproveitamento industrial, com perspectivas de aplicação na saúde.

Os ensaios de fluxo lateral do inglês “Lateral Flow Assay” (LFA) ou teste de tira, são utilizados há algumas décadas como testes rápidos. Desde o surgimento das primeiras tiras, na década de 70, a qualidade e intensidade do sinal colorimétrico melhoraram com o advento da nanotecnologia. O diagnóstico e controle de doenças, principalmente as negligenciadas, frequente nos países em desenvolvimento, tem sido o alvo principal de tecnologias, como a imunocromatografia. A Leishmaniose visceral (LV) é uma doença grave, letal que afeta 12 milhões de pessoas em 98 países. Clinicamente a enfermidade é caracterizadas como um protótipo de disfunção imune específica e em resposta uma gama de interleucinas são acionadas, elevando os níveis séricos das mesmas. A interleucina-6 (IL-6) é uma citocina multifuncional que desempenha um papel-chave não apenas no sistema imunológico, mas também em uma variedade de processos biológicos. Na LV a citocina está relacionada a fatores de gravidade e óbito. Este estudo teve como objetivo deselvolver um dispositivo simples para detecção rápida da interleucina 6 e identificação de pacientes com LV grave. Duzentos e trinta e cinco pacientes com suspeita clinica de LV tiveram sangue e medula óssea coletados para confirmação diagnóstica da doença. Cento e um pacientes tiveram diagnostico confirmado para LV por pesquisa direta ou cultura. Amostra de plasma foram quantificadas para IL-6 por citometria de fluxo e na tecnologia LFA. Clinicamente, níveis elevados de IL-6 estão associados a fatores de gravidade da LV tais como sepse, sangramento e óbito. IL-6 também está associado a um aumento da proteína C-reativa. A padronização da curva padrão mostrou-se linear com com coeficiente angular de inclinação de 0,005 x 4,42 e coeficiente de correlação, 0,987. Amostras reais foram medidas em três condições diferentes, e observou-se que quanto maior a concentração de anticorpo no teste LFA, maior o número de amostras positivas e correspondentes visualmente com a curva padrão para a proteína pura. Niveis de IL-6 mensurados por citometria de fluxo mostraram-se correlacionados com a tecnologia LFA (r = 0,2191; p = 0,0186). Foram realizados testes de seletividade com as citocinas IL-8, IL-10 e IL-12 e não houve marcação em nenhum dos testes. O dispositivo simples, LFA, denominado Quick-IL test (IL-6), mostrou-se sensível, específico e seletivo. O método semiquantitativo mostrou-se eficaz para caracterização de pacientes com LV grave.

A dor é um dos sintomas mais relatados em serviços de saúde. Contudo, as opções farmacológicas para seu tratamento não apresentam, em geral, uma alta eficácia e provocam frequentes efeitos adversos. Portanto, a fim de ampliar o arsenal terapêutico para esta condição, com alternativas mais eficazes e de menor toxicidade, são realizados estudos que buscam não somente novos fármacos, mas também novas formulações de fármacos que garantam melhora farmacocinética. Os produtos naturais estão incluídos no foco de várias dessas pesquisas. O terpinoleno é um monoterpeno encontrado nos óleos essenciais das plantas do nordeste brasileiro, como Chenopodium ambrosioides L., Citrus aurantium L. e Cumminum cyminum L, já tendo sido pesquisado quanto a possíveis efeitos antibacteriano e anti-inflamatório. Assim, esta tese consistiu em três capítulos. Inicialmente, foi feita uma revisão de literatura científica em busca de classes de fármacos que poderiam gerar dor neuropática como efeito adverso, bem como justificar o possível mecanismo fisiopatológico de cada classe (capítulo I). Em seguida, no capítulo II, foram elaboradas formulações transdérmicas por meio de um sistema de microemulsões, com testes in vitro. E, por fim, no capítulo III, foi testada a ação do TPO em sua forma livre e em formulação transdérmica (desenvida com os resultados do capítulo II) no modelo de dor neuropática induzida por ligadura do nervo ciático, bem como seus efeitos adversos centrais (teste do campo aberto e Rota rod) e sua atividade antioxidante (níveis de MDA, GSH e atividade da SOD) em camundongos. Os resultados demonstraram que o TPO, tanto livre quanto por via transdérmica, apresentou efeito antinociceptivo-símile, sem contudo, provocar efeito adverso relacionada à atividade locomotora.

Xerostomia, doença bucal caracterizada por diminuição ou ausência do processo de salivação, ocasionada por terapias farmacológicas ou radioterápicas, e relacionada a elevada taxa de abandono destas, possui como tratamento farmacológico disponível a Pilocarpina administrada de forma oral, comprimidos da marca Salagen^®, via de administração que, entretanto, relaciona-se a diversos efeitos adversos também debilitantes, incluindo dor de cabeça, aumento da sudorese e frequência de micção,etc. Comprimidos mucoadesivos aplicados a via bucal são formulações não convencionais, com muitas vantagens em relação às formas tradicionais, incluindo liberação sustentada, aumento da biodisponibilidade e decréscimo de possíveis efeitos adversos. Dessa forma, modificar a via de administração para a bucal, próxima, portanto, do local de ação, glândulas salivares, através da tecnologia de comprimidos mucoadesivos descrita, poderá ser alternativa mais satisfatória para esta condição. Para isso, o presente estudo se propõe a estudar a tecnologia deste desenvolvimento, incluindo testes físico-químicos relacionados aos polímeros e mistura destes, sejam estes naturais ou sintéticos, incluindo quitosana como polímero principal, e associações deste com goma de cajueiro, carboximetilcelulose ou carbômeros. Num primeiro momento, comprimidos de quitosana com os polímeros sintéticos descritos foram desenvolvidos. Destes, aquele que permitiu melhor comportamento mucoadesivo, e uma liberação controlada da pilocarpina por mais tempo, próximo de 2h, foi aquele contendo carbômero, dosados por metodologia previamente validada por HPLC-DAD.  Posteriormente, comprimidos de quitosana com goma de cajueiro foram desenvolvidos, e o processo de produção da mistura entre os polímeros citados, denominado ‘Blenda’, foi determinante para o acréscimo nas propriedades mucoadesivas do material frente aos seus polímeros isolados ou a simples mistura física entre estes, resultando em formulação com 6h de liberação controlada. Dessa forma, os pré-requisitos para desenvolvimento dessa tecnologia mucoadesiva foram extensivamente discutidos e consolidados, e a formulação preconizada para tratamento da xerostomia, desenvolvida. 

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No presente trabalho, as reações de craqueamento térmico e termocatalítico do óleo de babaçu foram utilizadas para a produção de combustíveis alternativos. A caracterização dos líquidos orgânicos (LO) foi feita por espectroscopia na região do infravermelho (FTIR) e a medida da acidez por estimativa direta da quantidade de ácidos livres. Os produtos da pirolise obtidos sem a utilização de catalizadores apresentou acidez muito elevada, sendo que a fração leve apresentou acidez maior do que a fração pesada. Para obtenção de biocombustíveis menos ácidos utilizou-se um catalizador heterogêneo, bauxita. A seleção deste catalisador foi devido aos sítios ácidos de Lewis que ele apresenta. Sua caracterização foi realizada por meio de difração de raio-X (DRX), espectroscopia na região do Infravermelho (FTIR) e adsorção-dessorção de nitrogênio. O catalizador utilizado se mostrou bastante promissor nas reações de desoxigenação do óleo de babaçu resultando em líquidos orgânicos (LO) de acidez relativamente baixa, mostrando a ação desoxigenante do catalizador utilizado. A cromatografia gasosa dos líquidos orgânicos, obtidos no craqueamento térmico e termocatalítico, mostraram picos de C₆ a C₂₃ indicando a existência de elevadas quantidades de substâncias nas amostras. As estruturas moleculares dos possíveis compostos gerados na pirolise do óleo vegetal, perfis termodinâmicos e os mecanismos de eleiminação de hidrogênio beta e transferencia de hidrogenio gama foram feitas em nível de DFT. As possíveis rotas das reações de decomposição térmica do ácido láurico, principal constituinte do óleo de babaçu, foram investigadas através dos parametros geométricos, comprimentos de ligações, energias envolvidas nas quebras de ligações e formação de radicais livres. Através dos radicais livres e energia livre de Gibbs investigou-se a formação dos possíveis compostos obtidos na pirolise do ácido láurico. O mecanismo de eliminação do hidrogênio beta se mostruo mais favorável energeticamente na quebra das ligações do triglicerol. Diante das possíveis rotas de quebra de ligações, rearranjo dos possíveis radicais formados e produtos obtidos foi possíve determinar alguns dos compostos orgânicos mais estáveis gerados na pirolise do ácido láurico.

A esquistossomose é considerada um problema de saúde pública no mundo. Atualmente o praziquantel é a única droga utilizada no tratamento desta patologia e este medicamento vem apresentando resistência devido ao seu uso extensivo. Combinação entre drogas é uma estratégia importante para o tratamento de várias infecções, aumentando a eficácia, diminuindo a resistência e a toxicidade. Este estudo avaliou a atividade in vitro da interação entre o alcaloide epiisopiloturina, a amida piplartina e a droga de referência praziquantel e análogos sintéticos a partir da piplartina contra vermes adultos de Schistosoma mansoni com 49 dias de idade. O capítulo I apresenta uma breve revisão sobre a esquistossomose, produtos naturais, alcaloides, amidas, produtos naturais estes principalmente epiisopiloturina e a piplartina e o uso combinado de produtos naturais como alternativa no tratamento de doenças negligenciadas. No capítulo II, foi verificado o efeitos in vitro da combinação entre piplartina, praziquante e epiisopiloturina contra vermes adultos de S.mansoni. Foram calculados os valores de LC50 e LC100 para o alcaloide epiisopiloturina, amida piplartina e praziquantel contra o parasita S. mansoni. Combinações entre epiisopiloturina/praziquantel; piplartina/praziquantel; epiisopiloturina/piplartina mostraram atividade sinérgica e de adição contra vermes adultos do parasita Schistosoma mansoni com índice de combinação (IC) a partir de 0,42. Foram observadas alterações tegumentares com estas combinações com a utilização do microscópio confocal a laser e SEM. O sinergismo entre estes farmoquímicos e o praziquantel na atividade in vitro contra o parasita S.mansoni apresentou melhor resultado do que utilizadas isoladamente. A interação entre epiisopiloturina/piplartina diminuiu a toxicidade em células de mamíferos do tipo VERO, MDCK e L929. No capítulo III, foi estudado a atividade in vitro esquistossomicida e a citotoxicidade da piplartina e seus análogos. Os análogos foram sintetizados a partir da piplartina, foi verificado que a piplartina apresentou atividade contra o parasita S.mansoni, mas os análogos não apresentaram atividade nas concentrações testadas, quanto a citotoxicidade, os análogos quando comparado a piplartina não apresentou toxicidade para células de mamíferos nas concentrações de até 200 µg/ml. Estes são os primeiros estudos de sinergismo entre epiisopiloturina, piplartina e praziquantel contra S. mansoni, com isto estudos in vivo são necessários para verificar o mecanismo de ação da atividade esquistossomicida resultante destas interações, como também demonstrou que os análogos da piplartina, quando comparado a esta molécula, apresentou perca da atividade contra o parasita S.mansoni, mas consequentemente os análogos apresentaram diminuição da toxicidade quando comparada a piplartina.

Introdução: O Polissacarídeo da Goma do Cajueiro (P-GC) é um polímero complexo extraído do exsudado do tronco da árvore do caju (Anacardium occidentale L.), que possui atividade anti-inflamatória. A periodontite é uma inflamação destrutiva que promove a perda dos tecidos de suporte dos dentes e pode causar perda dentária. Objetivo: Avaliar o potencial terapêutico de um gel orabase com P-GC na perda óssea alveolar e na expressão de RNAm dos genes que codificam a IL-1β, TNF-α, RANK, RANKL e OPG em tecido periodontal de ratos Wistar (Rattus norvegicus) submetidos a periodontite induzida por ligadura. Materiais e métodos: Os ratos (fêmeas) foram divididos aleatoriamente em quatro grupos de seis animais cada: Salina 0,9% (Grupo Sal); Gel orabase (Grupo Gel); 50 mg P-GC/1 g de gel orabase (Grupo P-GC50) e 150 mg P-GC/1 g de gel orabase (Grupo P-GC150). Todos os animais foram submetidos à periodontite induzida e tratados com uma aplicação tópica diária da formulação durante 20 dias. A perda óssea alveolar foi avaliada por morfometria. Os efeitos sistêmicos das aplicações tópicas foram investigados por meio do estudo do peso corporal dos animais, peso relativo dos órgãos, histopatologia do fígado, contagem global de leucócitos e por dosagem de parâmetros bioquímicos, tais como transaminase glutâmica oxaloacética,
transaminasa glutâmica pirúvica, creatinina e uréia. A inflamação do tecido periodontal foi investigada pela avaliação da atividade da mieloperoxidase e expressão relativa do RNAm por RT-PCR. Resultados: O tratamento com P-GC150 resultou em uma redução significativa da perda óssea alveolar, diminuiu os níveis da expressão de RNAm de TNF-α, IL-1β, RANKL e da proporção RANKL/OPG, e causou uma diminuição na atividade da mieloperoxidase no tecido gengival (p&lt;0,05). Além disso, esse tratamento com P-GC150 não causou danos sistêmicos significativos aos animais. Conclusões: A administração tópica do gel orabase com P-GC mostrou ser um potencial tratamento adjuvante contra danos teciduais causados pela periodontite e uma possível fonte de novas descobertas biotecnológicas.

A crescente procura por moléculas com potencial terapêutico tem despertado interesse cada vez maior por pesquisas científicas e patentes envolvendo organismos de origem marinha. O presente estudo teve como objetivo investigar e caracterizar o potencial terapêutico de uma fração polissacarídica sulfatada extraída da alga Gracilaria intermedia (PLS-Gi) no tratamento da diarreia aguda. No capítulo I, a prospecção tecnológica destacou as atividades biológicas descritas para polissacarídeos, com especial enfoque em suas aplicações nas doenças diarreicas. De modo geral, os resultados obtidos nas buscas realizadas em bancos de patentes e artigos mostraram que as pesquisas envolvendo a atividade antidiarreica de polissacarídeos ainda encontram-se restritas aos centros de pesquisas e às universidades, o que reflete o baixo número de patentes encontradas e abre perspectivas para essa nova aplicação biotecnológica. O capítulo II mostrou os resultados obtidos a partir da extração, caracterização estrutural e investigação do efeito antidiarreico, anti-secretor intestinal e toxicidade aguda da PLS-Gi em camundongos. A fração polissacarídica obtida pelo método de extração enzimática com papaína apresentou alto rendimento e ausência de contaminação por proteínas. A espectroscopia na região do infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) da PLS-Gi revelou a presença de bandas características de agarana, com sulfatação nos C-6 dos resíduos de L-galactose. O pré-tratamento com PLS-Gi (3, 10, 30 mg/kg, v.o) reduziu significativamente as fezes totais e diarreicas, e o enteropooling (p<0.05). A PLS-Gi (30 mg/kg, v.o.) aumentou a Na+ /K+ - ATPase gastrointestinal (p<0.05) e reduziu o trânsito intestinal (p<0.05), a partir do bloqueio de receptores colinérgicos, sem interferir no esvaziamento gástrico. No modelo de diarreia induzida pela toxina da cólera (TC), a PLS-Gi diminuiu o fluido intestinal e as perdas de íons Clao interagir com os monossialogangliosídeos (GM1) e a TC (p<0.05). A PLS-Gi reduziu a diarreia induzida por E. coli enterotoxigênica (ETEC) e preveniu a perda de peso dos animais (p<0.05). Contudo, os resultados obtidos pelo método de difusão em ágar mostraram ausência de zona de inibição nas concentrações de 10 e 30 mg/mL, e sugerem que essas concentrações de PLS-Gi não exercem atividade antibacteriana frente a E.coli. Além disso, no estudo da toxicidade oral aguda, os animais não exibiram qualquer sinal de efeito adverso após 14 dias de observação, desse modo, estimou-se que o valor da DL50 para a administração oral de PLS-Gi é maior que 2.000 mg/kg, podendo ser enquadrada na Classe 5 segundo o Globally Harmonized System – GHS, demonstrando limitado potencial de toxicidade aguda. Diante dos resultados apresentados, este estudo evidenciou, pela primeira vez, que a PLS-Gi é capaz de diminuir a motilidade intestinal por meio da ação anticolinérgica, e controlar as diarreias induzidas pela TC e toxina produzida pela ETEC por meio da interação entre PLS-Toxina-GM1, reduzindo, assim, a perda de íons e fluidos para o lúmem intestinal. Ademais, a biodisponibilidade, o baixo custo e o caráter atóxico, tornam o PLS-Gi um candidato para tratamento de diarreias agudas.

O fitol, (E,7R,11R) - 3,7,11,15-tetrametilhexadec-2-en-1-ol, é um diterpenoide com diversas atividades farmacológicas e aplicabilidades biotecnológicas. Este estudo objetivou realizar uma revisão sistemática e meta-análise da associação do fitol com mecanismos antitumorais. Em estudos experimentais foi avaliado o perfil toxicogenético em ratos Wistar, fêmeas, por meio dos testes de toxicidade aguda (300 e 2000 mg/kg, v.o.) e subcrônica (30, 60 e 90 mg/kg, v.o.), durante 14 e 28 dias, respectivamente, bem como suas atividades antitumorais em cultura primária de Sarcoma 180 in vitro, em linhagem leucêmica HL-60 e em linfócitos de sangue periférico de ratos. O efeito antitumoral do fitol foi verificado in vivo em modelo de carcinogênese induzida por 7,12-dimetilbenzantraceno, por meio de análises da patologia clínica, anatomo e histopatológica, imunohistoquímica (Ki-67) e mecanismos citotóxicos e citogenéticos indicativos de genotoxicidade, mutagenicidade, apoptose e necrose, em células neoplásicas e não neoplásicas. Os resultados demonstraram associação entre fitol e toxicidade (OR: 1,47; IC 95% = 0,86- 2,48), identificada entre estudos in vivo; e citotoxicidade (OR: 1,81; IC 95% = 1,12-2,65, p <0,05), em estudos in vitro e ex vivo. Em estudos in vitro, 24% indicaram que o fitol, em altas concentrações, induz apoptose por vários mecanismos. Enquanto que 40% dos estudos ex vivo apontaram sua ação na geração de espécies reativas de oxigênio. Nos estudos in vivo, 24% destacaram, entre os mecanismos de apoptose, a expressão de proteína Bcl2 ou mutações na proteína pró-apoptótica Bax. Além disso, 8% dos estudos também apontaram necrose e hepatotoxicidade. No entanto, em 24% dos artigos, os mecanismos de toxicidade e citotoxicidade ainda não são bem compreendidos. No estudo toxicogenético do fitol, os resultados demonstraram que a administração aguda, em ratos, não produziu morte com DL50 acima de 2000 mg/kg. Entretanto, diversas alterações toxicológicas foram observadas em parâmetros da patologia clínica e neurofarmacológica. Dependendo do tratamento e das doses testadas, foram observadas alterações histopatológicas hepáticas. Por outro lado, o fitol induziu genotoxicidade em todos os tratamentos em medula óssea, fígado, rim e sangue periférico, com ausência de atividade de reparo. Concomitantemente, a mutagenicidade foi observada em medula óssea, nos tratamentos agudo e subcrônico, pelo aumento da frequência de micronúcleos. Nos estudos em cultura primária de Sarcoma 180, linhagem HL-60 e linfócitos de sangue periférico de ratos, o fitol (4,72, 7,08 e 14,16 µM/mL), induziu citotoxicidade pela redução da viabilidade celular e dos índices de divisão celular livres, incluindo a apoptose e necrose. A genotoxicidade foi pontuada pelo aumento do índice e frequência de danos ao DNA, nos modelos testados. Similarmente, o fitol induziu mecanismos aneugênicos e/ou clastogênicos em Sarcoma 180 e em HL-60, especialmente na maior concentração, por indução de micronúcleos e outras alterações nucleares, como também mecanismos relacionados à indução de danos oxidativos, como observado em linfócitos de sangue periférico. O fitol, em modelo animal de câncer de mama, apresentou baixa toxicidade, também não induziu alterações histopatológias malignas, nem expressiva marcação para Ki-67, comparado ao carcinógeno, sugerindo modulação de efeitos. Além disso, comparado à ciclofosfamida, o fitol induziu menos efeitos toxicogenéticos em células não tumorais, mas com significantes indução de apoptose e necrose em células neoplásicas. Diante dos mecanismos citogenéticos evidenciados no estudo, é possível sugerir que o fitol tem potencial para formulações farmacêuticas antitumorais.

O 2-Feniletanol (2-FE) é um álcool aromático, derivado de óleos essenciais, com um aroma leve e duradouro de rosas e utilizado na indústria alimentícia, cosmética e farmacêutica. O objetivo do estudo foi investigar o potencial antinociceptivo do 2-feniletanol e do composto complexado com β-ciclodextrina em modelos de dor aguda e neuropática, bem como os possíveis mecanismos de ação envolvidos no efeito farmacológico observado. Foi realizada uma busca por artigos científicos e pedidos de depósitos de patentes e suas aplicações em várias áreas dentre elas Biotecnologia e aplicação em microbiologia e Farmacologia e Farmácia. O número de artigos encontrados foi restrito, podendo ser devido uso restrito do 2-FE. Os dados tecnológicos apresentaram o emprego na indústria de alimentos, cosméticos e conservantes. Após foi realizada a busca pela atividade antinociceptiva do 2-FE e 2-FECD em modelos experimentais de nocicepção, em que o 2-FE apresentou efeitos apenas na segunda fase de avaliação do teste de formalina, efeitos significativos nos testes de capsaicina, glutamato, não mostrou efeito no teste de rota rod, porém mostrou uma diminuição na capacidade exploratória no campo aberto. O 2-FECD foi significativo em todos os testes, não mostrou efeito no campo aberto e rota rod e apresentou eficácia entre as doses intermediárias, evidenciando assim biodisponibilidade e liberação controlada. Nos testes neuropáticos os animais foram submetidos à compressão do nervo ciático e o 2-FE e 2-FECD tiveram efeitos apenas 24h após a cirurgia e a partir do 4º dia de cirurgia nos dois testes. O 2-FECD, teve efeito em todas as avaliações observadas possivelmente pela liberação controlada, estabilidade e biodisponibilidade evidenciada. Como o estresse oxidativo está interligado com os eventos de neuropatia, o estudo envolveu metodologias de quantificação antioxidante onde o 2-FE e 2-FECD mostraram uma elevação nos níveis de GSH e diminuição nos níveis de TBARS, eventos intimamente ligados durante estresse oxidativo provocados pela neuropatia.

O amido é matéria prima abundante e disponível em todo mundo, apresenta possibilidade de modificação química, física ou genética e forma filmes. Pode ser extraído de diversas fontes como cereais, tubérculos, raízes, frutas e legumes. A espécie Orbignya sp., palmeira abundante no estado do Piauí e Maranhão. O mesocarpo é uma das partes constituintes do seu fruto e pode ser considerado uma fonte alternativa interessante de amido para a obtenção de filmes. Há poucos relatos de estudos sobre a aplicação do mesocarpo de babaçu como matriz polimérica para sistema de liberação de fármacos. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo de obter filmes a partir do mesocarpo de babaçu (MB), com a perspectiva de aplicação como dispositivo para liberação do ácido tânico. Foram obtidos filmes de mesocarpo de babaçu natural e despigmentado com e sem adição de carboximetilcelulose (CMC) pela técnica de casting. O ácido tânico foi considerado o fármaco modelo nesta pesquisa. Os filmes foram caracterizados por infravermelho, DRX, MEV, análise térmica e avaliadas suas propriedades antioxidante, antimicrobiana e citotóxica. Também, foi avaliada a cinética de liberação do ácido tânico e o poder de intumescimento dos filmes. Os resultados confirmaram o elevado teor de amido no mesocarpo de babaçu, sendo que a farinha branqueada apresentou um aumento no teor de amido de 23,05 ± 8,98%, com grânulos mais isolados, exibiu redução no teor de compostos fenólicos (582,70 ± 3,29 para 18,44 ± 1,60 mg EAG/100 g) e atividade antioxidante (86,86 ± 0,87% para 1,20 ± 0,16%), e formação de filmes mais claros em relação a farinha natural. No entanto, os filmes da farinha branqueada com ácido tânico incorporado apresentaram aumento no teor de fenóis totais (15,26 ± 2,77 para 573,13 ± 5,83 mg EAG/100 g). O filme MB-CMC apresentou poder de intumescimento que variou de 289,85% (nos primeiros 30 min) a 449, 15% (24h). Após o tempo de 24 h, o filme MB-CMC liberou 71,01% de ácido tânico, enquanto o filme MB e o filme CMC liberou 53,03% e 33,72%, respectivamente. Todos os filmes exibiram percentuais de inibição dos radicais DPPH• e ABTS•+ que variaram de 79,07±1,71% a 88,90±1,05%, e também apresentaram atividade contra S. aureus, com halo de inibição entre 21±1,00 mm a 23,3±2,08 mm. O filme MB-CMC exibiu efeito citotóxico para as linhagens tumorais S180 e HL-60 com redução de 91,86±9,97% e 29,59±8,39% das células metabolicamente ativas, respectivamente. E não exibiu efeito tóxico para células normais (PBMC). Contra formas promastigotas de Leishmania major, este filme inibiu 100% do seu crescimento e 55, 05% da viabilidade de macrófagos. Conclui-se que o mesocarpo de babaçu apresentou potencial para obtenção de filmes bioativos e compatibilidade na mistura com carboximetilcelulose. Portanto, pode ser fonte alternativa de amido na área farmacêutica ou alimentícia. E, ainda que filmes a base de mesocarpo de babaçu branqueado é um biomaterial promissor, que pode ser utilizado como plataforma de liberação de fármacos.

Agentes antineoplásicos são compostos citotóxicos que possuem como alvo células com intensa e rápida proliferação, induzindo processos de morte celular em células normais e tumorais. Como uma das principais drogas antineoplásicas utilizadas temse o cloridrato de irinotecano (CPT-11), inibidor seletivo da enzima topoisomerase I, que é responsável pela realização de rupturas na dupla hélice de DNA, evitando a replicação do mesmo e, consequentemente, bloqueando processos de divisão celular. O CPT-11 produz danos sobre a mucosa gastrointestinal, resultando em mucosite do trato alimentar que, além de ser causa direta de mortes ocasionais em tratamentos antitumorais, também causa significativo ônus econômico, já que gera a necessidade de uso de mais medicamentos que minimizem seus efeitos. Com isso, buscou-se neste trabalho investigar a potencial ação de compostos de origem natural (carvacrol) e sintética (acetato de carvacrolila) sobre os efeitos da mucosite intestinal. Para isso, foram utilizadas as seguintes estratégias de ação: indução de mucosite intestinal com o uso do CPT-11, para avaliação da ação dos referidos compostos sobre a perda de massa corpórea, a sobrevida de camundongos, o número total de leucócitos e a proporção de bactérias presentes no sangue. Além disso, também foi avaliada a ação dos compostos sobre parâmetros histológicos e morfométricos. Ademais, foram quantificados marcadores de inflamação (MPO, COX-2, NF-κB, e citocinas – IL1β, TNF-α e KC) e estresse oxidativo (MDA, GSH e NOx), e foi avaliada a possível interação entre os compostos e o receptor TRPA1. Com isso, observou-se que carvacrol e acetato de carvacrolila possuem ação anti-inflamatória e protetora frente à mucosite intestinal induzida por CPT-11 e que os mecanismos de controle da mucosite por estes compostos estão associados ao receptor TRPA1. Ambos os compostos demonstraram ação promissora quanto à melhora nos parâmetros clínicos, à diminuição do dano tecidual e de parâmetros indicativos de inflamação e de estresse oxidativo. Finalmente, os resultados demonstram que o acetato de carvacrolila aparentemente pode ser tolerado em maiores doses, ainda que resultando em ação semelhante à do carvacrol.

Objetivou-se avaliar a reparação óssea utilizando enxerto ósseo associado a compostos de urucum em tíbia de ratos. Para a quantificação/identificação dos compostos do urucum realizou-se a extração alcalina com KOH 4%. Os componentes majoritários das sementes de urucum foram norbixina, bixina e caratenóides. Foram utilizados 40 ratos Wistar divididos em quatro grupos, no grupo controle (G1) os animais tiveram os defeitos ósseos preenchido apenas com coágulo sangüíneo; no grupo (G2) com enxerto ósseo liofilizado; no grupo (G3) com compostos extraídos do urucum e no grupo (G4) com uma mistura de enxerto ósseo liofilizado/compostos do urucum na proporção 1:1. Após 14 e 30 dias de tratamento, às peças ósseas foram encaminhadas para análise microscópica e por espectroscopia Raman. Com 14 dias, nos grupos G3 e G4 houve leve infiltrado inflamatório e intensa atividade de células osteogênicas. Com 30 dias, nos grupos G3 e G4, foi observado tecido ósseo maduro e trabéculadas ósseas limitando áreas de tecido hematopoiético. Na comparação entre os grupos, houve diferença significativa entre o G4 e G1 (p<0,05) e entre o grupo G4 e G2 (p<0,05) referente ao teor de hidroxiapatita (HA). Conclui-se que os compostos das sementes do urucum aceleraram o processo de reparo ósseo provavelmente devido as suas ações pró-inflamatória e anti-oxidante, enquanto que a mistura de enxerto ósseo liofilizado/compostos do urucum atuaram como material osteocondutor e osteoindutor.

O Borneol é um monoterpeno bicíclico que pode ser obtido como mistura racêmica [(+)-Borneol + (-) - Borneol] a partir de óleos essenciais de plantas medicinais como a Valeriana officinalis L. (Erva de gato), Matricaria chamomilla L. (Camomila), Lavandula officinalis Chaix & Kitt (Alfazema) ou como molécula sintética de grande aplicação na indústria alimentícia, cosmética e farmacêutica. Estudos farmacológicos do Borneol indicam atividade cardiovascular, aumento da permeabilidade da barreira hematoencefálica, antinocicepção e neuroproteção. Porém, informações sobre os efeitos do (-) - Borneol [(-) - BOR] ainda são escassas. Neste trabalho, utilizou-se o monoterpeno (-) - BOR sintético sobre o Sistema Nervoso Central (SNC) e os resultados referentes aos resultados obtidos a partir dos modelos animais de ansiedade, adicção e neuroproteção empregados na pesquisa foram apresentados em 3 (três) capítulos. No primeiro capítulo investigou-se o possível efeito sedativo e ansiolítico do (-) - BOR em camundongos. O (-) - BOR apresentou efeito ansiolítico ao reduzir o tempo de início e prolongar o tempo total de sono induzido por tiopental sódico. Além disso, o (-) - BOR também apresentou efeito ansiolítico ao reduzir a atividade locomotora dos animais no teste do campo aberto e ao aumentar o tempo de permanência dos animais na área clara e nos braços abertos nos testes da caixa claro-escuro e labirinto em cruz elevado, respectivamente. Como embasamento teórico, realizou-se um estudo de docagem molecular entre o (-) - BOR e o receptor GABAA (GABAAR). Assim, no estudo de docagem, foi possível perceber que existe interação molecular entre o monoterpeno e o GABAAR sendo este, portanto, um possível mecanismo de ação ansiolítica. No segundo capítulo investigouse a atividade do (-) - BOR em camundongos dependentes e abstinentes a morfina. No estudo, foi possível observar que o (-) - BOR interfere no desenvolvimento de preferência condicionada por lugar (PCL) por morfina ao reduzir o tempo de permanência dos animais no ambiente pareado e na abstinência, ao reduzir o comportamento de saltar. A avaliação do efeito genotóxico do (-) - BOR foi realizada em sangue periférico dos camundongos através do teste do cometa. Em nenhum dos parâmetros observados o (-) - BOR apresentou efeito genotóxico, garantindo segurança a sua potencial aplicação farmacoterapêutica. No terceiro capítulo, investigou-se o efeito neuroprotetor do (-) - BOR na fragmentação de DNA induzida por morfina em áreas mesolímbicas como o hipocampo e córtex pré-frontal de camundongos. O (-) - BOR reduz o dano ao DNA induzido por morfina nas duas áreas mesolímbicas avaliadas, o que provavelmente protegeria essas áreas em pacientes que utilizam morfina de forma crônica. A avaliação do (-) - BOR sobre a atividade da enzima lactato desidrogenase (LDH) demonstra que os efeitos do monoterpeno não podem ser relacionados com atividade antinecrótica, pois tanto o (-) - BOR quanto a morfina não interferem na atividade da enzima.

Buriti é o nome popular do fruto da Mauritia flexuosa (Aricaceae). Ele é utilizado na medicina popular para tratamento de doenças dermatológicas, cicatrização de feridas e como antiinflamatório. Como alimento, é muito utilizado em preparações de doces e sucos produzidos a partir da polpa. O objetivo desse estudo foi realizar a caracterização nutricional, o potencial quimiopreventivo de bioprodutos de buriti (polpa, casca e endocarpo em pó), além de avaliar toxicidade em camundongos fêmeas, tratados com extratos aquosos dos bioprodutos do fruto. Para tanto, uma prospecção científica e tecnológica foi realizada em bases de dados. Na caracterização nutricional, foi realizado estudo físico-químio de pH, acidez e Brixº, seguido por análise quali e quantitativa de fibras solúveis e insolúveis, bem como perfil de minerais e ácidos graxos em polpa, casca e no endocarpo de buriti. Foram avaliadas características morfológicas (Microscopia eletrônica de varredura), reológicas e térmicas (Calorimetria exploratória diferencial – DSC, DRx) dessas amostras. Para avaliação do potencial quimiopreventivo, realizou-se o estudo quantitativo dos compostos bioativos existentes e triagem qualitativa por HPLC-DAD. Também foi realizado estudo da atividade antioxidante e caracterização da bioacessibilidade de fenóis totais in vitro. No estudo toxicológico em dose única, os camundongos (n = 3) foram tratados por via oral (v.o.) com extratos aquosos de polpa, casca e endocarpo de buriti nas doses de 300 e 2000 mg/kg, e durante 14 dias foram observados comportamento geral, taxa de letalidade, peso corporal, consumo de água e ração, assim como avaliação da atividade locomotora e coordenação motora por meio dos testes de campo aberto e da barra giratória, respectivamente. Após este período, os animais foram anestesiados com solução de xilazina-cetamina 0,2 mL/100g (8,75 mL de cetamina (100 mg/mL) e 1,25 mL de xilazina (100 mg/mL)) para prosseguir com análises hematológicas e bioquímicas, bem como dissecação dos principais órgãos (fígado, coração, rins, pulmão, baço, estômago e cérebro) para estudo macroscópico e histológico. No estudo de toxicidade subaguda os camundongos foram tratados com doses de 300 e 600 mg/kg por 28 dias consecutivos (n = 7). Para essa etapa de toxicidade subaguda, foi avaliado possível efeito genotóxico dessas amostras. Durante o tratamento em dose única e repetidas não foram evidenciados nenhum sinal de toxicidade durante o período de observação, de modo que não foi possível determinar a Dose Letal 50%. Como os animais foram tratados com doses até a 2000 mg/kg e não foi registrada nenhuma morte durante o período de observação é possível sugerir que os extratos aquosos de polpa, casca e endocarpo de buriti, apresentam perigo relativamente baixo de toxicidade. Nos parâmetros fisiológicos, bioquímicos e hematológicos não foram observadas alterações e nem efeitos sobre a atividade locomotora e coordenação motora dos animais após tratamento com os extratos nos diferentes protocolos. Além disto, não se observou alterações macroscópicas e histológicas nos principais órgãos analisados. Os resultados sugerem que a polpa, casca e endocarpo de buriti são potenciais alimentos com atividade antioxidante, bioacessíveis e que podem ser seguros em ensaios pré-clínicos, bem com demonstraram potencial farmacológico relacionado ao metabolismo lipídico e glicídico, que precisam ser melhores explorados para esclarecer seu mecanismo de ação e relevância clínica. Foi solicitado pedido de depósito de registro de patente junto ao Instituto Nacional da Propriedade Industrial, de forma que nossos achados ampliam as perspectivas para a realização de outros testes que possam corroborar com o uso seguro e eficaz de frutos de forma integral (polpa, casca e endocarpo), como produto de importância biotecnológica.

Com o advento da nanotecnologia, as nanopartículas de prara (AgNPs) vêm se destacando por suas inúmeras propriedades no campo da óptica, catálise e especialmente, devido às suas propriedades antimicrobianas e cicatrizantes. Tais nanopartículas vêm sendo sintetizadas pelos mais diferentes tipos de rotas, podendo ser utilizados produtos naturais, como as gomas exsudadas, como agente estabilizante da solução coloidal.  Deste modo, o objetivo deste trabalho foi desenvolver géis formulados com nanopartículas de prata (AgNPs) sintetizadas in situ em hidrogel de carboximetilcelulose (CMC) contendo goma de cajueiro natural (NCG) ou goma de cajueiro ftalada (PhCG) e avaliar suas atividades antibacterianas e cicatrizantes. Primeiramente, a goma de cajueiro isolada sofreu uma reação com anidrido ftálico sendo que a modificação na estrutura da goma foi confirmada por espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). As AgNPs foram preparadas in situ durante a fabricação do hidrogel contendo CMC e glicerina, utilizando como agente redutor borohidreto de sódio (NaBH₄), na proporção de razão molar de 1:6 em relação à prata. Deste modo, foram produzidos um hidrogel contendo AgNPs com goma de cajueiro natural (NCG-AgNPs) e outro contendo AgNPs com goma de cajueiro modificada (PhCG-AgNPs). Um gel sem a presença de prata e goma de cajueiro, para servir de controle (base do hidrogel), também foi confeccionado. O estudo de reologia caracterizou os géis como não newtonianos e pseudoplásticos. Para caracterização das AgNPs utilizou-se: espectroscopia de UV-vis em que a banda máxima para NCG-AgNPs e PhCG-AgNPs foi de 408 e 404 nm, respectivamente; Análise de Rastreamento de Nanopartículas (NTA) onde os compósitos apresentaram tamanho médio 119,7±5 e concentração de 6,36 x 10¹⁰ partículas/mL (NCG-AgNPs) e tamanho médio 123,8±8,9 nm com concentração de 4,03 x 10¹⁰ partículas/mL (PhCG-AgNPs); Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET), que determinou a morfologia das AgNPs nos hidrogéis formados, observando-se a formação de AgNPs triangulares, duplos triângulos e hexágonos para  NCG-AgNPs além de nanos esféricas, quadradas e agregados de esferas irregulares para PhCG-AgNPs; e espectroscopia por energia dispersiva (EDS) que confirmou a presença da prata e a formação das nanopartículas. Para estudar o efeito antimicrobiano dos hidrogéis foi utilizado o teste de contato direto e a determinação das concentrações inibitórias e bactericidas mínimas (CIM e CBM) sobre as bactérias Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. Constatou-se excelente atividade antimicrobiana pela observação de inibição de crescimento bacteriano sob ambos os géis, inclusive com formação de halos de inibição, além de reduzidos valores de CIM e CBM. Por exemplo, o gel de PhCG-AgNPs sobre P. aeruginosa promoveu uma CBM de 0,84 µgAg/mL. Para a avaliação da atividade cicatrizante, foi utilizado um modelo de ferida cirúrgica em dorso de ratos, sob as quais foram aplicados os hidrogéis com NCG-AgNPs ou PhCG-AgNPs . Um gel de CMC e glicerina foi utilizado como controle. Foram realizadas medidas do ferimento (altura e largura) no 0°, 4°, 7° e 14° dias. A formulação com PhCG-AgNPs  mostrou significante efeito cicatrizante no 4°, 7° e 14° dias. Já a formulação com NCG-AgNPs promoveu uma tendência à cicatrização no 4° dia e um resultado significativo em relação ao grupo controle no 7° dia. As caracterizações dos hidrogéis produzidos com AgNPs sintetizadas in situ atestaram a eficiência desta rota de síntese. Os hidrogéis com AgNPs promoveram excelente atividade antibacteriana além de apresentarem potencial efeito cicatrizante.

O câncer de mama é a neoplasia maligna mais comum em mulheres de países ocidentais após o câncer de pele não melanoma. No mundo, há mais de 1,5 milhão de casos novos diagnosticados anualmente e mais de 500 mil mortes pela doença, sendo que no Brasil foram estimados 57.960 novos casos de câncer de mama e cerca de 14.206 mortes em mulheres pela doença. A mamografia é o exame diagnóstico padrão que permite a descoberta precoce que reduz a mortalidade em cerca de 30%. Todavia, os sistemas computacionais podem melhorar a acurácia da imagem mamográfica na detecção das neoplasias. O presente estudo deve por objetivo desenvolver um software para otimização de imagens mamográficas e auxilio ao diagnóstico médico. Esta tese foi estruturada em quatro capítulos. O capítulo I trata de uma prospecção sobre os software para processamento de imagem, buscando indícios do estado atual da técnica via cenário de patentes depositadas relacionadas a softwares de diagnóstico e processamento de imagens mamográficas no Brasil e no mundo. Foram encontrados 107 registros de patentes, sendo 72 resultantes da busca relacionadas ao termo “Software diagnosis breast câncer“, 32 relacionadas ao termo” Software mammography” e 3 ao termo “Software processing images“, demonstrando a necessidade de desenvolvimento do softwares para processamento de imagens mamográficas. O capítulo II mostrou as técnicas de treinamento e aprendizado de máquina com uso de redes neurais artificiais, para detectar massas em imagens mamográficas, utilizando extração de características de texturas. Os resultados obtidos comprovaram que o algoritmo Random Forest obteve o melhor índice de acerto, no que diz respeito à sensibilidade, especificidade e acurácia, atingindo 92.10%, 93.50% e 92.90%, respectivamente. O capítulo III  trata de um mapeamento sistemático sobre algoritmos utilizados nas etapas de processamento de imagens mamomográficas. As buscas foram realizadas nas bases de dados Web of Science, Engineering Village e Scopus. Os resultados obtidos foram 199 artigos dos quais, após uma seleção rigorosa realizada por três especialista em processamento de imagens, apenas 14 artigos foram indicados como estudos relevantes para o mapeamento. Os algoritmos Otsu e o PSO destacaram-se na etapa de segmentação, os quais foram utilizados em 9 dos 14 artigos aceitos, já na etapa de extração das características obteve destaque o algoritmo de Haralick, utilizado em 7 das 14 publicações e por fim na etapa de classificação por aprendizagem supervisionada, destacou-se como melhor classificador  o algoritmo de Support Vector Machines, utilizado em 5 dos 14 artigos aceitos. O capítulo IV trata do Certificado de Registro de Programa de Computador.

Este trabalho iniciou-se com um estudo prospectivo a partir dos artigos científicos e patentes depositadas os quais abordassem as palavras-chave relacionadas ao desenvolvimento de filmes finos empregando corante na construção de sensores eletroquímicos. Os artigos científicos foram analisados e filtrados na Base Web of Science e Scopus enquanto o estudo prospectivo foi realizado com base nos pedidos de patentes depositadas no Instituto Nacional de Propriedade Industrial - INPI, Escritório Europeu de Patentes - EPO, na base Derwent e no Escritório Norte- americano de Marcas e Patentes (USPTO). Como resultado desse estudo foi possível observar que o uso do corante, por exemplo, o Vermelho de Alizarina S na construção de filmes finos, do tipo Layer-by- Layer (LbL), como plataforma para sensores eletroquímicos para detecção de peróxido de hidrogênio (H 2 O 2 ) é inovador até o presente momento, visto que não foram encontradas patentes e nem artigos científicos nas bases pesquisadas. Em um segundo momento, o VAS foi imobilizado em eletrodos de ITO (Óxido de Estanho dopado com Ìndio, um vidro condutor) empregando-se a técnica LbL de automontagem. A formação do filme de VAS sobre ITO foi possível a partir da conjugação do corante com os polímeros ágar e PAH ((poli(alilaminahidroclorada). Nanotubos de carbono de parede simples (NTC) funcionalizados com -COOH foram utilizados para aumentar o sinal eletroquímico do sistema LbL. Os filmes foram desenvolvidos em arquiteturade tricamadas de ágar/PAH/VAS ou ágar(NTC)/PAH(NTC)/VAS e caracterizados por Voltametria de Pulso Diferencial (VPD), Espectroscopia na região do UV-Visível (UV- Vis) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Após sua caracterização o filme de ágar(NTC)/PAH(NTC)/VAS foi testado para detecção do H 2 O 2 . Sob potencial constante de -0,5 V vs SCE, o filme exibiu rápida resposta e o limite encontrado foi 0,15 µmol L -1 . A terceira etapa desta pesquisa, foi a solicitação do pedido de patente, intitulada: Plataforma sensora à base de corantes e polissacarídeos, junto ao NINTEC-UFPI. Finalmente, em uma segunda etapa experimental, foram produzidos filmes (LbL) de nanopartículas de ouro, estabilizadas com a carragenana, (carr-AuNPs) as quais foram intercaladas com a Polianilina (PANI), um polímero condutor. Os filmes LbL de carr- AuNPs e PANI foram preparados em eletrodos flexíveis de ouro (EFAu), de baixo custo e fácil fabricação. Os filmes foram caracterizados por Voltametria Cíclica (VC), Espectroscopia na região do UV-Visível (UV-Vis) e Microscopia de Força Atômica (AFM). ) O sinergismo encontrado entre as carr-AuNPs e a PANI foi capaz de melhorar a resposta eletroquímica e estabilidade do polímero condutor em meio fisiológico (PBS 0,1 mol L -1 , pH 7,1) em até três vezes. A presença das carr-AuNPs no filme promoveu um aumento significativo na rugosidade do eletrodo de EFAu modificado quando comparado ao eletrodo sem modificação.A partir dos estudos de UV-Vis observou-se que os filmes produzidos envolvem processos autorregulados, para ambas sequencias propostas. O filme de PANI/carr-AuNP apresentou melhoria considerável na estabilidade e condutividade da PANI em meio fisiológico, surgindo como material potencial para aplicação em biossensoriamento.

A elevada prevalência de infecções causadas por bactérias resistentes aos antibióticos tem estimulado o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Materiais poliméricos vêm despertando o interesse de muitos pesquisadores devido ao seu grande campo de aplicações. A quitosana é um polímero natural obtido a partir da reação de desacetilação da quitina. Por apresentar propriedades específicas vêm se manifestando como uma nova classe de materiais com funções fisiológicas altamente aprimoradas. Modificações na cadeia da quitosana são feitas a fim de melhorar ou conferir novas propriedades para quitosana. Este trabalho teve por objetivo a obtenção de derivados de quitosana com base de Schiff, bem como avaliar a atividade antibacteriana da quitosana dos derivados associados com ceftazidima. A identidade da base de Schiff formada e os derivados associados com fármaco foram caracterizados através de Análise Elementar, espectroscopia na região do infravermelho (FTIR), Ressonância Magnética Nuclear de Carbono 13 (RMN 13C), Difração de raios (DRX) e Análise Térmica (TG). Os resultados das caracterizações mostraram a eficácia das modificações e das interações entre a quitosana e derivados com ceftazidima (CFZ), e que os grupos incorporados na estrutura dos derivados melhoraram a estabilidade térmica dos materiais, bem como os dados da cristalinidade dos mesmos uma vez que estes dados estão associados aos resultados do RMN 13C. A modificação da quitosana (Q) com acetilacetona (Qac) apresentou um menor efeito inibitório para S. aureus (33,3% e 51,8%) quando comparada com Q (58,2% e 80,8%) e um aumento contra cepa de E.coli (68,0% e 91,2%) para Qac em relação a Q (52,3% e 81,5%) após 48 e 72h de preparo da solução. Modificações subsequentes da Qac com etilenodiamina (Qacen) e dietilenotriamina (Qacdien) aumentaram o efeito inibitório da Qacen (90,9% e 90,4%) e Qacdien (91,1% e 92,0%) quando comparadas com Qac (33,3% e 68,0%) contra cepas de S. aureus e E. Coli respectivamente, indicando um amplo espectro de ação destes novos materiais inibindo tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas. Os materiais associados com fármaco mostraram que um maior tempo de contato dos materiais em solução potencializaram a ação bacteriana dos mesmos, quando comparados com o fármaco sozinho. As modificações feitas nos materiais mostraram que os mesmos não apresentaram toxicidade para as células testadas. Os resultados podem revelar-se como uma promissora alternativa do uso dos derivados de quitosana com base de Schiff e dele associado com fármaco sugerindo que os mesmos poderiam ter uma ampla aplicabilidade no desenvolvimento de novos materiais visando o controle de microrganismos.

A biotecnologia está ganhando cada vez mais espaços nas indústrias e instituições de pesquisas, justificado pela diversidade de aplicações e benefícios que essa área pode trazer para a sociedade. Dessa forma, esse trabalho tem como principal objetivo a obtenção, caracterização e aplicação de produtos e processos biotecnológicos de grande potencial para o mercado industrial. Nesse sentido, foi feita a coleta de sementes de faveleira e posteriormente realizado o processo de extração do óleo, onde foram determinadas suas propriedades para aplicação em reações de hidrólise catalisada por lipases. O extrato enzimático, usado como catalisador, foi obtido por meio do processo fermentativo em substrato líquido peptonado com fungo Rhizopus sp. e posteriormente foi feita a caracterização por técnicas químicas, espectroscópicas e cromatográficas para detecção de lipases. Em seguida foram realizados testes de atividade enzimática com óleo de faveleira e óleo de oliva, apresentado resultados catalíticos satisfatórios. Em uma segunda etapa, os resíduos provenientes da extração do óleo de faveleira foram reaproveitados e aplicados como substrato sólido para o desenvolvimento do fungo Rhizopus sp., obtendo-se um novo extrato lipolítico que foi testado em óleos vegetais para avaliar seu potencial catalítico, apresentando alta atividade hidrolítica em óleos de faveleira e babaçu, demonstrando assim o grande potencial para utilização de resíduos sólidos de sementes vegetais como substrato para obtenção de lipases.

As plantas e os produtos do seu metabolismo secundário foram e continuam sendo de grande relevância na área farmacêutica. Os óleos essenciais, produto desse metabolismo, são misturas naturais muito complexas que podem conter cerca de 20-60 componentes em concentrações muito diferentes, inclusos em dois grupos de origem biosintética distinta. O grupo principal é composto por terpenos e terpenóides e outro de componentes aromáticos e alifáticos. Os terpenos constituem o grupo mais abundante e estruturalmente mais diversificado de metabólitos secundários de plantas, representados principalmente pelos monoterpenos e sesquiterpenos. Os monoterpenos e seus derivados apresentam várias propriedades farmacológicas, como gastroprotetora, cicatrizante, antinociceptiva, anti-inflamatória, antioxidante e antidepressiva. O monoterpeno (-)-linalol presente no óleo essencial do orégano e em diversas espécies de plantas teve seus efeitos anti-inflamatórios e analgésicos amplamente sugeridos por vários estudos. Já o monoterpeno carvacrol presente no óleo essencial do orégano e em diversas espécies de plantas apresentou em estudos anteriores atividade anti-inflamatória, gastroprotetora e anti-ulcerogênica. O presente trabalho teve como objetivo investigar o potencial farmacológico do (-)-linalol e do carvacrol na forma livre ou complexado em β-ciclodextrina, com a finalidade de buscar maior estabilidade e segurança, melhorando sua atividade gastroprotetora e diminuindo suas eventuais toxicidades, através da sua investigação em diferentes modelos experimentais, agudos e crônicos de úlceras gástricas e no modelo de feridas cirúrgicas, bem como desenvolver uma formulação farmacêutica de uso tópico a partir desses bioprodutos. Nossos resultados sugerem que o (-)-linalol incorporado em β-ciclodextrina (LIN-βCD) revelou um efeito gastroprotetor significativamente melhorado, quando comparado com (-)-linalol (LIN) na forma não complexada (livre), sugerindo que essa melhora esteja relacionada ao aumento da sua solubilidade e estabilidade, bem como pela potencialização do perfil antioxidante deste monoterpeno. O carvacol complexado (CARV-βCD) apresenta atividade gastroprotetora superior, possivelmente por potencializar sua atividade antioxidante e cicatrizante quando comparado aos seus resultados na gastroproteção na forma não complexada (CARV), provavelmente por sua incorporação em β-ciclodextrina melhorar seu perfil gastroprotetor. Grande parte das pesquisas que estudam patologias cutâneas em prol do tratamento e da cura de feridas, utilizam modelos animais que se assemelham com a pele humana. A formulação tópica à base de carvacrol a 5% mostrou boa estabilidade, bem como reduziu significamente a área da ferida cirúrgica induzida em ratos, sendo gerado uma patente onde a referida invenção pode ser utilizada nas diversas áreas da saúde para o tratamento de afeccões cutâneas da pele. Em conjunto, os nossos resultados sugerem que a β-CD pode representar uma ferramenta importante para a melhoria da atividade gastroprotetora do (-)-linalol e do carvacrol e outros compostos insolúveis em água, potencializando suas respostas, bem como a solubilidade, a estabilidade e segurança.

A goma de cajueiro (GC) é um heteropolissacarídeo aniônico natural com potencial uso na indústria farmacêutica e alimentícia, além de promissora aplicação em (nano)biotecnologia. Alterações químicas na estrutura desse polímero vêm sendo executadas no intuito de se obterem novas propriedades, no entanto, ainda não foram realizadas modificações por introdução de grupos funcionais com objetivo de torná-la catiônica, o que poderia alterar, por exemplo, suas atividades farmacológicas, como a antimicrobiana. Este trabalho objetiva modificar quimicamente a GC por reação de quaternização, avaliar o efeito da goma de cajueiro quaternizada (GCQ) sobre bactérias do gênero Staphylococcus, bem como sua biocompatibilidade celular. Para a produção de três derivados quaternizados de goma de cajueiro (derivados GCQ), adicionou-se a uma solução de GC, cloreto de trimetilamônio e hidróxido de sódio, em três diferentes proporções de razões molares. Após uma reação de 14 h sob aquecimento em banho-maria; ajustou-se o pH e procedeu-se a precipitação de cada goma modificada utilizando-se acetona, seguindo-se por diálise e liofilização. Os derivados obtidos (GCQ-1, GCQ-2 e GCQ-3) foram caracterizados por: espectroscopia na região de infravermelho, análise elementar, potencial Zeta e espectroscopia de ressonância magnética nuclear 2D (correlação heteronuclear ¹H−¹³C). Também foi calculado o grau de substituição do grupo químico introduzido na estrutura desses modificados. A atividade antiestafilocócica dos derivados GCQ foi avaliada pela determinação das concentrações inibitórias e bactericidas mínimas (CIM e CBM) e por microscopia de força atômica. A biocompatibilidade sobre eritrócitos, queratinócitos e fibroblastos também foi verificada, por meio dos testes de hemólise e de citotoxicidade. Os métodos de caracterização selecionados para este estudo confirmaram a modificação da GC. Os três derivados GCQ apresentaram promissora atividade antiestafilocócica, com potência crescente relacionada ao aumento do grau de substituição do grupamento amônio quaternário introduzido na estrutura da goma. Destacou-se, por exemplo, o efeito do derivado GCQ-3 sobre uma linhagem de S. aureus resistente à meticilina, com obtenção de CIM em valor de 31,25 μg/mL e CBM igual a 62,5 μg/mL. Os derivados GCQ também apresentaram biocompatibilidade sobre as células testadas, sugerindo, deste modo, que os mesmos possam ser aplicados como ferramenta para o desenvolvimento de biomateriais com ação antisséptica.

O dimetil-octanol (3,7-dimethyl-1-octanol), estragol (1-allyl-4-methoxybenzene) e nerol (cis-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-ol), são monoterpenos oxigenados, cuja classe é conhecida por ser derivada de óleos essenciais de plantas medicinais. O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio bioensaios in vitro, in vivo e ex vivo, o perfil tóxico, citotóxico e asatividades farmacológicas: antioxidante, antimicrobiana e antihelmíntica destes monoterpenos. Foi realizada revisão de literatura, seguida de prospecção científico-tecnológica em bases eletrônicas de dados direcionada para aplicação destas substâncias em doenças negligenciadas, tendo sido revelada uma ampla variedade de aplicações farmacológicas e relevantes utilizações comerciais como em fragrâncias, cosméticos e flavorizantes alimentícios. Contudo, o baixo número de registro de depósito de patentes encontrado sugeriu a necessidade de maiores investimentos para impulsionar o desenvolvimento de produtos derivados a partir destes bioativos. A avaliação da capacidade antioxidante in vitro destes terpenos contra os radicais 2,2-difenil-1-picrilhidrazila e 2,2’-azenobis-3-3etilbenzolina-6-sulfônico indicaram que os mesmos apresentaram atividade antioxidante nos ensaios que utilizaram os radicais DPPHŸ e ABTSŸ+, contudo não foram capazes de reduzir o íon Ferro. As substâncias demonstraram não serem citotóxicas em nível de hemácias, enquanto o bioensaio de A. salina mostrou-se com baixa toxicidade na leitura de 24 horas. Em S. cerevisiae os monoterpenos confirmaram atividade antioxidante na modulação pelo dano oxidativo induzido por H₂O₂. Na avaliação antimicrobiana, os terpenos foram avaliados quanto à ação antibacteriana (cepas de S. aureus e E. Coli) e antifúngica (cepas de C. albicans). Os monoterpenos foram inativos contra S. aureus, no entanto, o nerol foi ativo contra E. coli e C. albicans. A adição dos compostos no meio de crescimento, em concentrações subinibitórias aumentou a atividade de norfloxacina contra S. aureus SA1199-B. Este resultado mostra que os bioativos testados, especialmente o nerol, são capazes de inibir a bomba de efluxo de S. aureus NorA. Foi realizada triagem biológica in vitro dos terpenos quanto à atividade contra o verme adulto de Schistosoma mansoni. O dimetil-octanol foi o terpeno mais ativo, a microscopia confocal de varredura a laser revelou que o dimetil-octanol induziu fortemente danos no tegumento do verme adulto e foi observada a correlação entre mudanças de viabilidade e modificações tegumentares. Esses resultados indicam o potencial deste monoterpeno como um agente antiparasitário. Foi delineado, obtido e caracterizado complexo de inclusão (CI) a partir do nerol com B-ciclodextrina por análise térmica e absorção espectrofotométrica no infravermelho (FTIR). Os resultados sugerem uma complexação de nerol com β-CD. A curva termogravimétrica do CI encontrado indicam uma saída de moléculas de solvatação de água a partir da cavidade do complexo formado por substituição a moléculas de droga, provavelmente incluída.

O (-)-Borneol (1,7,7-Trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-2-ol) é um monoterpeno bicíclico, presente nos óleos essenciais de numerosas plantas. O mesmo apresenta baixa solubilidade em água diminuindo assim sua absorção por via oral. Uma possível alternativa para minimizar esses problemas seria a inclusão deste monoterpeno em um complexo de ciclodextrina, pois a mesma é reconhecida na literatura por melhorar a biodisponibilidade e o aumento da solubilidade aquosa e estabilidade de fármacos. Neste estudo, realizou-se a preparação e caracterização físico-quimica do (-)-borneol complexado em β-CD pelos métodos de mistura física (MF) e co-evaporação (CE). Para tal, foram utilizadas as técnicas de calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria/termogravimetria derivada (TG/DTG), teor de umidade por titulação de Karl Fisher, espectrofotometria de absorção na região do infravermelho (FTIR), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e Difratometria de Raios X (XRD). O método de CE indicou a ocorrência da formação do complexo de inclusão entre o monoterpeno e a β-CD, sendo este escolhido para a realização dos testes in vivo. Avaliou-se, então, a atividade gastroprotetora e cicatrizante do Borneol livre (BOR) e do Borneol complexado em ciclodextrina (BOR-CD) no modelo de lesões gástricas induzidas por etanol absoluto em camundongos, isquemia/reperfusão e ácido acético em ratos, além do seu papel sobre a secreção de muco e parâmetros bioquímicos gástricos. Avaliou-se também o papel da enzima catalase (CAT), pela reação com o peróxido de hidrogênio, da enzima sintase do óxido nítrico (NOS), através do bloqueador L-NAME e da enzima mieloperoxidase (MPO), pela reação com o brometo de hexadeciltrimetilamônio (HTAB 0,5%). Além disso, foram avaliados os níveis de glutationa reduzida (GSH) através da reação com o 5,5’-ditiobis (2-nitrobenzóico), os níveis de malondialdeído (MDA), reagindo como ácido tiobarbitúrico (TBA), a concentração de nitrito (NO^-), com o reagente de Griess e o papel dos canais de potássio sensíveis ao ATP (K_ATP) na atividade gastroprotetora evidenciada (Protocolos experimentais aprovados pelo CEEA/UFPI: 008/12). Os resultados foram expressos como média ± E.P.M. (ANOVA, seguida do teste de Tukey e valores de p<0,05 foram considerados significativos). No modelo lesões gástricas por isquemia e reperfusão e por etanol absoluto, BOR e BOR-CD nas doses de 25 e 50 mg/kg reduziram as lesões gástricas quando comparados ao grupo controle. A atividade da catalase, uma enzima que degrada H₂O₂ em água e oxigênio, foi aumentada nos animais pré-tratados com BOR 25 mg/kg. Os níveis de MPO (marcador de infiltração/agregação de neutrófilos) foram reduzidos e os de nitrito foram aumentados por BOR e por BOR-CD 25 mg/kg quando comparados ao controle. BOR‑CD 25 mg/kg foi capaz de aumentar os níveis de GSH e reduzir os níveis de MDA, mostrando seu papel na redução de substâncias oxidantes e na regulação da lipoperoxidação. O mesmo não foi observado no grupo tratado com BOR  25 mg/kg. BOR e BOR-CD 25 mg/kg mostraram reversão do efeito protetor ao utilizar-se o bloqueador da NO sintase (L-NAME) ou o bloqueador dos canais K_ATP (Glibenclamida). Esses resultados sugerem a importância do óxido nítrico (NO) e também dos canais K_ATP no efeito evidenciado. No modelo de lesões provocadas por ácido acético, a administração diária (14 dias), nas doses 50 e 100 mg/kg de BOR e de BOR-CD, reduziu significativamente a área da lesão em comparação ao controle. No modelo de ligadura de piloro, BOR e BOR-CD não mostraram alterações significativas nos parâmetros bioquímicos e na produção de muco. Através desses resultados, evidenciam-se que o Borneol apresenta atividade gastroprotetora e cicatrizante, envolvendo mecanismos antioxidantes e antiperoxidativos e a complexação do mesmo em β-CD melhora suas propriedades químicas e farmacológicas.

A compatibilidade HLA (Human Leukocyte Antigen)entre o par doador e um candidato a transplante de órgãos ou tecidos depende da identidade da molécula HLA, considerada como o principal antígeno no transplante. O doador ideal, portanto, é aquele cujas moléculas HLA expressas em suas células são também compartilhadas pelo receptor. Entretanto,essa condição é rara e, na maioria das vezes, o transplante é realizado com grandes diferenças, acarretando ativação do sistema imune do receptor, tornando-o sensibilizado para os antígenos HLA, favorecendo a ocorrência de rejeição do enxerto, menor sobrevida e dificuldade para identificar um novo doador compatível. Assim, mais do que identificar uma combinação perfeita entre doador e receptor, pode-se usar o conceito de compatibilidade HLA entre os pares, pois, embora não haja identidade total, as regiões HLA do doador, que são passíveis de reconhecimento pelo sistema imune do receptor,são compartilhadas e não são capazes de ativar uma resposta imune, logo são moléculas adequadas para o transplante. Essas estruturas moleculares responsáveis pela interação com os receptores de linfócitos T e B e/ou interação com anticorpo pré-formado são denominadas de epítopos estruturais e o processo de identificação desses epítopos para determinar a formação do par doador-receptor mais adequado para o transplante denomina-se: análise da reatividade epitópica e tem como componente essencial, o eplet. Devido à sua complexidade, tem-se encontrado muita resistência para inserir a análise da reatividade epitópica na rotina clínica laboratorial. Neste sentido, muitos esforços têm sido despendidos para minimizar esse impacto. Com base noprimeiro algoritmo para facilitar a análise da reatividade epitópica (HLAMatchmaker),  o grupo de pesquisa do LIB – UFPI vem desenvolvendo, desde 2008, ferramentas que facilitam o processo de análise e contribuem para a universalização e uso do conceito de análise epitópica, culminando, em 2013, com o desenvolvimento do softwareEpViX. O EpViX é um importante programa facilitador do uso do conhecimento da compatibilidade epitópica, contudo, a fase de análise da reatividade epitópica de todos os potenciais receptores em lista de espera permanece laboriosa, repetitiva e manual. Além disto, não se dispõe de recursos humanos qualificados para sua execução, bem como para o treinamento de novos usuários nos laboratórios de histocompatibilidade, o que nos fez propor um sistema especialista, denominado EpAssistant, capaz de identificar automaticamente a especificidade epitópica do anticorpo anti-HLA pré-formado no soro de candidatos a transplante de órgãos e tecidos e, assim, acelerar essa importante etapa na fase do pré-transplante, sendo útil, também, como um elemento para educar e ensinar novos usuários nesse campo do conhecimento.

A abelha Melipona subnitida (conhecida por jandaíra) possui grande importância econômica e ecológica em sua área de ocorrência. No entanto, já apresenta problemas relacionados à sua população pois colônias silvestres vem sendo reduzidas consideravelmente afetando de forma direta sua estrutura genética populacional pela eliminação de genótipos. Ferramentas moleculares vem auxiliando trabalhos de conservação por acessar diretamente ao nível de DNA a variabilidade genética das espécies. Dessa forma, objetivamos o sequenciamento do genoma da M. subnitida para o descrição de marcadores microssatélites visando o estudo da diversidade genética e estrutura populacional da espécie, além da montagem e anotação do genoma mitocondrial para o futuro isolamento de marcadores e uso em estudos genéticos e investigações das relações filogenéticas entre as diferentes espécies do gênero Melipona. Uma biblioteca Illuminapaired-end foi criada seguindo o protocolo padrão do Kit Illumina Nextera Preparação de Amostras de DNA e em seguida as amostras foram sequenciadas por meio de um MiSeq Benchtop. As sequências contíguas (contigs) foram montadas de novo a partir das sequências paired-end resultantes usando o software CLC Genomics Workbench 7.0.4. Os contigs no formato FASTA foram submetidos ao software Msatcommander para a busca de possíveis repetições. Optou-se por examinar apenas os locos trinucleotídeos e tetranucleotídeos. 52 locos foram adequados para o desenho de primers. O genoma mitocondrial (mitogenoma) foi quase completamente montado por abordagens in silico usando corridas iterativas de software MIRA e MITObim. Como resultados, foram identificados 5.574 locos de microssatélites perfeitos, sendo os dinucleotídeos a classe mais abundante com 89,7% do total, seguido de trinucleotídeos (6,4%), tetranucleotídeos (2,7%), pentanucleotídeos (0,7%) e hexanucleotídeos (0,5%). 23 locos de microssatélites foram isolados e caracterizados onde 17 apresentaram polimorfismos e seis foram monomórficos. Sobre o mitogenoma parcial da M. subnitida, o mesmo contém 12.740 pares de bases de comprimento. Os genes encontrados conservam a estrutura esperada na maioria dos invertebrados. Estrutura do genoma, a ordem dos genes e orientação foi semelhante às mitocôndrias descritas anteriormente para as abelhas Melipona.

Este Trabalho foi realizado com o biopolímero natural celulose, ele foi modificado quimicamente para a aplicação na adsorção/dessorção do fármaco amitriptilina (AMI) de meio aquoso. A celulose pura e seus derivados foram caracterizados por diferentes técnicas de caracterizações, tais como: IV, DRX, TG/DTG/DSC, MEV, EDS e RMN ³¹P. A celulose foi modificada pelos seguintes procedimentos sintéticos: (I) modificação com trimetafosfato de sódio, biomaterial PC (6,82% de fósforo incorporado); (II) modificação com ácido fosfórico e tripolifosfato de sódio na presença de ureia, biomaterial CP (7,30% de fósforo incorporado); (III) modificação com (3-aminopropil)trimetoxisilano na ausência de solvente, biomaterial CSiN (8,16% de silício e 0,48% de nitrogênio incorporados) e (IV) modificação com etilenodiamina na ausência de solvente, biomaterial CN (1,10% de nitrogênio incorporado).  O biomaterial puro e seus derivados foram aplicados em estudos de adsorção (variando tempo, pH, temperatura, concentração e força iônica) e dessorção (variando pH e tempo) do fármaco AMI de meio aquoso. Por fim, os dados experimentais foram ajustados a diferentes modelos físico-químicos de cinéticos, isotermas e termodinâmicos. Os resultados destes experimentos mostraram que os biomateriais modificados apresentam uma capacidade de adsorção da AMI superior ao biomaterial puro, onde a temperatura de 298 K o biomaterial puro apresentou uma capacidade máxima de adsorção de q_e = 20,23 ± 0,80 mg g^-1em pH 5, o biomaterial PC em pH 7 de q_e= 41,02 ± 0,68 mg g^-1, o biomaterial CP em pH 7 de q_e = 40,52 ± 0,72 mg g^-1, o biomaterial CSiN em pH 7 de q_e = 57,56 ± 1,31 mg g^-1 e do biomaterial CN em pH 7 de 57,31 ± 1,00 mg g^-1. Diante disso, os biomateriais modificados se mostraram promissores para a sua utilização como suportes para a adsorção/dessorção de fármacos com estrutura química semelhante a AMI.

A epilepsia é um conjunto de distúrbios neurológicos resultantes de um elevado número de funções cerebrais desordenadas que desenvolvem alterações neuronais. Nos últimos anos as células-tronco têm sido alvo de pesquisas com a análise do potencial terapêutico para diversos processos patológicos. A ausência de um tratamento farmacológico apropriado para a epilepsia incentiva o estudo da utilização das células-tronco neurais na reparação das lesões neurais por essa doença. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial terapêutico das células-tronco neurais, provenientes da região subventricular do cérebro de ratos, na reparação de lesão tecidual em ratos epilépticos. Uma prospecção científica e tecnológica foi realizada nas bases de dados INPI, Latipat, Spacenet e Science Direct sobre a temática. O isolamento e cultivo de células-troncos neurais para a obtenção das neuroesferas foram realizados para posterior caracterização por meio de teste com azul de tripan, marcação com Qtracker^® 655 Cell Labeling Kit e proteína glial fibrilar ácida, além da avaliação do estresse oxidativo em cultura por meio das atividades glutationa reduzida, superóxido dismutase e catalase. Utilizou-se 24 ratos para a indução da epilepsia por pilocarpina, pentilenotetrazol e picrotoxina, dos quais 12 receberam a infusão de neuroesferas marcadas com Qtracker^® para rastreamento celular. Os encéfalos foram submetidos à análise do estresse oxidativo e histopatológica. Na prospecção tecnológica foram observados 10042 pedidos de depósito de patente e 42879 artigos científicos publicados, ambos não relacionados diretamente as neuroesferas e terapia da epilepsia. Em relação ao isolamento e cultivo de células-tronco neurais foi observado que a cultura apresentou 95% de células viáveis, com morfologia e características específicas para esse tipo celular, além de não apresentarem estresse oxidativo entre o 7º e 30º dia de cultivo celular. Após 30 dias da infusão celular pela veia da cauda dos ratos, as neuroesferas foram rastreadas nos encéfalos. A dose dos fármacos indutores de epilepsia comprometeu o microambiente cerebral, visto que não foi observado estresse oxidativo na cultura celular a ser infundida, mas as regiões encefálicas com e sem infusão das neuroeferas apresentaram estresse oxidativo. Na análise histopatológica foi visto processo inflamatório, necrose, desmielização e vacuolizações na região cerebral provocada pela epilepsia, e apesar de persistirem no grupo tratado com neuroesferas, foi verificado que as células se distribuiram por todo o tecido cerebral, diferenciando-se principalmente no grupo epiléptico por pilocarpina. Portanto, as células-tronco neurais sinalizam potencial promissor na reparação de lesões e uma estratégia para a melhora de danos ocasionados pela epilepsia.

A biotecnologia desempenha um papel importante no desenvolvimento de diversos produtos fundamentais a sociedade. Desde aditivos para combustíveis/concretos, os fármacos e etc.. Todavia, alguns produtos necessitam de constante melhorias. No caso do concreto, que é um material intrinsecamente poroso, pode apresenta patologias decorrentes dos vazios, que facilitam a penetração de fluidos no seu interior, e permitir a degradação por corrosão. O grande desafio da tecnologia de concreto atualmente parece ser aumentar a durabilidade das estruturas.  Uma das alternativas é a redução da permeabilidade e consequentemente, através da diminuição da porosidade, preservando as características superficiais. Nesse contexto, o trabalho foi desenvolvido com o objetivo de agregar valores a cadeia produtiva do agronegócio da cultura do caju, utilizando um subproduto, o Líquido da castanha de caju (LCC técnico), com a finalidade de reduzir a porosidade dos concretos aparentes. Isto se tornou possível porque o LCC pode ser polimerizado através da síntese de condensação, utilizando-se o formaldeído, para obter-se uma resina termofixa, que dissolvida em um solvente adequado foi aplicada sobre a superfície do concreto curado a 28 dias. A resina foi caracterizada por diversas técnicas físico-químicas e finalmente aplicada pura e dissolvida em biodiesel, em corpos-de-prova cilíndricos de 10x20 cm. Sobre esses foram realizados ensaios de absorção de água e índice de vazios, resistência à compressão e análise de microscopia eletrônica de varredura. Os resultados obtidos para os ensaios de absorção de água foram 1,87 e 0,81 e índice de vazios 4,58 e 1,98, para resina pura e solução de resina/biodiesel respectivamente, de acordo com a norma NBR 9778/2005, mostrando redução da permeabilidade à água e porosidade, obtendo um concreto durável.  O rendimento da aplicação da resina pura foi 3,5 m²/Kg, já a da solução resina/biodiesel foi 5 m²/Kg, sugerindo um produto de alto valor agregado e com viabilidade econômica.

As espécies de Combretaceae são de relevante interesse devido ao histórico de potencialidades farmacológicas, já conhecido, em especial dos gêneros Combretum Loeft. e Terminalia L. O presente trabalho teve como objetivo investigar a quimiodiversidade e o possível potencial biológico dos extratos das folhas de Combretum duarteanum Cambess, C. mellifluum Eichler e Terminalia actinophylla Mart. coletadas nos Cerrados Setentrional e Meridional do estado do Piauí. Foi analisado o número de registros de depósitos de pedidos de patentes por meio de bancos de inovação e tecnologia nacionais e internacionais e o perfil de produção científica disponível na área de química e farmacologia para as espécies C. duarteanum e C. mellifluum, sendo evidenciado a carência de estudos com as espécies. Foi também desenvolvido um trabalho com os aspectos morfológicos e a distribuição geográfica das espécies, resultando na construção de chave analítica, descrições da família e dos gêneros, interpretação fitossociológica, elaboração do mapa de distribuição das espécies e apresentação de um glossário dirigido. Para realização dos testes de atividades biológicas e obtenção dos perfis cromatográficos, extratos hexânico, etanólico e aquoso das folhas das três espécies das duas regiões de cerrado foram preparados. A atividade antioxidante foi avaliada pelos ensaios dos radicais 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH), hidroxila e óxido nítrico, substâncias reagentes ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e redução do Fe³⁺ à Fe²⁺. A determinação do teor de fenóis e flavonoides totais foi realizada pelo método de Folin-Ciocalteu e por redução com cloreto de alumínio, respectivamente. A atividade anticolinesterásica foi pelo método de Ellman e a citotoxicidade pelo método MTT (brometo de 3-(4,5dimetildiazol-2-il)-2,5 difeniltretrazolium), frente as linhagens de células tumorais humanas: cólon, ovário e glioblastoma. O fator de proteção solar (FPS) foi realizado com T. actinophylla por método espectrofotométrico, na faixa de 260 a 400 nm. O extrato aquoso de C. duarteanum do Cerrado Setentrional mostrou boa atividade antioxidante frente ao radical oxido nítrico (1,94 µg/mL) e na redução do Fe³⁺ à Fe²⁺ (1,50 µg/mL). O extrato aquoso de C. mellifluum do Cerrado Setentrional apresentou alta atividade antioxidante na redução dos radicais oxido nítrico (0,47 µg/mL) e hidroxila (0,76 µg/mL) e o etanólico apresentou atividade antioxidante no ensaio de redução do radical hidroxila igual ao padrão trolox. Os extratos etanólicos e aquosos de T. actinophylla das duas áreas demonstraram forte atividade antioxidante, sendo maior que o controle positivo em pelo menos dois ensaios. Os maiores FPS foram dos extratos etanólico (Setentrional, 15,1) e aquoso (Meridional, 15,0). Os extratos etanólico e aquoso de C. duarteanum do Cerrado Setentrional e etanólico do Meridional apresentaram citotoxicidade. O extrato etanólico de C. mellifluum do Cerrado Setentrional foi fortemente ativo frente as linhagens testadas. T. actinophylla se destaca pelo alto teor de fenois e flavonóides totais. Todos os extratos apresentaram atividade anticolinesterásica, execeto o etanólico de C. duarteanum (Meridional), os aquosos de C. mellifluum e todos de T. actinophylla (Setentrional). Os testes realizados demonstraram que há uma diferença no potencial químico e biológico dos espécimes das três espécies, sugerindo que as relações ecológicas devem ser levadas em consideração em estudos químicos e farmacológicos.

Os peptídeos potencializadores de bradicinina (BPPs) foram relatados pela primeira vez ao demonstrar-se que o veneno de Bothrops jararaca promove potencialização da contração do músculo liso intestinal induzida por bradicinina e foram os primeiros inibidores da enzima conversora de angiotensina (ECA) descritos. Os BPPs fazem parte de uma família denominada “peptídeos ricos em prolina” (PRO) devido à presença de resíduos do aminoácido prolina na região C-terminal. Essa descoberta deu início a diversos estudos que visam o desenvolvimento de agentes úteis no tratamento da hipertensão arterial sistêmica, levando ao desenvolvimento do captopril. Estes estudos mostram que os PROs agem não somente sobre a ECA, mas também sobre diferentes alvos farmacológicos, ressaltando a importância na elucidação de novos mecanismos de ação envolvidos. O presente estudo descreve o isolamento e a caracterização químico-farmacológica de um novo PRO isolado a partir da secreção cutânea do anfíbio Brachycephalus ephippium denominado BPP-Brachy e sua forma amidada, BPP-BrachyNH₂, ambas encontradas na forma natural. Este peptídeo inibe eficientemente a atividade da ECA in vitro em soro de ratos causando bloqueio do acesso do substrato ao sítio ativo do domínio C, assim como induz uma potente vasodilatação dependente de endotélio em anéis de artéria aorta torácica de ratos. A presença de L-NAME, um inibidor da óxido nítrico (NO) sintetase, assim como a remoção mecânica do endotélio vascular abolem a vasodilatação induzida por BPP-BrachyNH₂. Em anéis de aorta previamente carregados com a sonda DAF-FM DA, BPP-BrachyNH₂ promoveu aumento de fluorescência observado por microscopia confocal, indicando aumento na liberação de NO. A viabilidade celular de linhagens de células endoteliais de veia umbilical humana, de músculo liso vascular de aorta de ratos e macrófagos murinos na presença de BPP-BrachyNH₂ foi avaliada pelo método do MTT, que demonstrou ausência de citotoxicidade nas concentrações testadas. A avaliação toxicológica aguda in vivo do BPP-BrachyNH₂ não apresentou morte ou sinal de toxicidade. Em conclusão, o peptídeo BPP-BrachyNH₂ apresenta uma sequência primária inédita nos bancos de dados internacionais e é o primeiro BPP isolado a partir da secreção cutânea em toda a família Brachycephalidae. Estes achados abrem a possibilidade para se bioprospectar os anfíbios como fontes de novas biomoléculas e com ação cardiovascular, assim como para suas potenciais aplicações no tratamento de disfunções endoteliais.

As inovações tecnológicas da computação científica têm promovido um desenvolvimento sem precedentes na história da sociedade humana. Salienta-se que, como a saúde é um campo rico em conteúdo e em volume de dados armazenados, muitas técnicas computacionais têm sido propostas para que problemas reais da área sejam solucionados. Neste sentido, o uso da simulação computacional pode ser vista como uma ferramenta interessante para agilidade na geração de informações e implementações nos diagnósticos na área da saúde.Outra vertente na atualidade é o emprego da bioinformática aliada a química computacional, que utiliza-se da modelagem molecular que é uma ferramenta de planejamento racional que envolve a compreensão da interação ao nível molecular de uma substância com seu receptor, sob os pontos de vista quali e quantitativo. Este estudo teve como objetivos desenvolver um software simulador dos parâmetros clínicos da mulher que influenciam nas possíveis alterações que caracterizam o climatério; determinar através de cálculos teóricos, as propriedades eletrônicas e estruturais das isoflavonas bioativas com o receptor 17β-estradiol, utilizando a isoforma 1FDS e usar a docagem molecular para verificar os resíduos de aminoácidos responsáveis pela interação proteína ligante, visando a identificação dos descritores responsáveis pelo potencial farmacológicos desses compostos. O processo de simulação de dosagem de isoflavona, aplicada a mulheres no climatério, inicia-se a partir da análise de parâmetros clínicos observados através de exame físico e laboratoriais. Para prototipação do software foram identificados os valores dos indicadores para posteriormente serem modelados em aplicativo de diagramação de banco de dados junto a uma aplicação codificada em linguagem Java. Para a realização da docagem molecular as estruturas das isoflavonas bioativas daidzina, genistina, gliciteína, glicitina, daidzeína, genisteína e o estrogênio foram otimizadas, em nível de teoria DFT (Teoria do Funcional da Densidade), utilizando o pacote computacional Gaussian 09 e o funcional híbrido B3LYP foi combinado com o conjunto de base 6-31+G (d,p). Como resultado foi obtido um software aplicativo com rotinas organizadas em classes e posteriormente compiladas para objetos executáveis que utilizou os parâmetros clínicos, físicos e laboratoriais para sugestão de dosagens de isoflavona. Foram realizados coletas de dados em mulheres identificando que seria recomendado 40 mg/dia para 13% das mulheres, 30,4% receberia 50 mg/dia e 56,5% teria uma dose diária de 60 mg de um total de 23 pacientes pesquisadas. Foi possível implementar um aplicativo móvel de simulação de dosagem de isoflavona conforme avaliação de critérios sintomatológicos das usuárias pesquisadas. Mediante a docagem molecular a histidina (HIS221) se apresentou como o principal resíduo de aminoácido que interage com o estrogênio através da formação de ligação de hidrogênio dentro do sítio ativo. Foi identificado ainda que das isoflavonas bioativas estudadas a genisteína se destaca devido à similaridade de interação com o resíduo de aminoácido histidina (HIS221) quando comparado com a região de interação enzimática do estrogênio no sítio ativo do receptor beta.

O gama terpineno (1-metil-4-isopropil ciclohexadieno 1,4) é um monoterpeno de cadeia cíclica, presente em diversas espécies de plantas aromáticas farmacologicamente ativas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito antinociceptivo do gama terpineno em modelos de dor aguda, inflamatória e neuropática em roedores, bem como os possíveis mecanismos de ação envolvidos nos efeitos observados. Uma prospecção científica e tecnológica foi realizada e revelou poucas variedades de aplicações farmacológicas do gama terpineno. Dessa forma, é necessário explorar esse monoterpeno na área científica e tecnológica, devido ao número reduzido de patentes e publicações. No teste de toxicidade aguda, os animais tratados com gama terpineno não apresentaram sinais de toxicidade aguda até a dose de 2000 mg/kg, por via oral. Na dor aguda, o gama terpineno, por via oral, mostrou efeito antinociceptivo nos testes de formalina nas doses de 12,5 e 25 mg/kg, capsaicina nas doses de 25 e 50 mg/kg e glutamato nas doses de 1,56 a 6,25 mg/kg. Gama terpineno também possui ação antinociceptiva quando administrado pelas vias intratecal (10 e 20 µg/local), intracerebroventricular (10 e 20 µg/local) e intraplantar (20 µg/local) no teste de glutamato. Nos testes de rota rod e campo aberto, o gama terpineno nas doses 12,5 e 25 mg/kg, v.o. não mostrou atividade relaxante muscular ou efeito depressor central. A antinocicepção do gama terpineno foi inibida na presença de naloxona (2 mg/kg, i.p.), glibenclamida (3 mg/kg, i.p.), atropina (1 mg/kg, i.p.) e mecamilamina (2 mg/kg, i.p.), sugerindo o envolvimento dos sistemas colinérgico e opióide. Na dor inflamatória, o gama terpineno (50, 100 e 200 mg/kg, por via oral) reduziu a hipersensibilidade em modelos de hipernocicepção aguda induzida por carragenina a 1% e prostaglandina E₂ (100 ng/pata). Na hipernocicepção aguda induzida por Adjuvante Completo de Freund, o gama terpineno (50, 100 e 200 mg/kg, por via oral ou 200 mg/kg, via transdérmica) foi efetivo. O tratamento crônico com o gama terpineno reduziu significativamente a hipersensibilidade mecânica induzida pelo adjuvante. A estratégia de mutidose não causou tolerância. A antinocicepção do gama terpineno foi inibida na presença de naloxona (3 mg/kg, s.c.), sugerindo o envolvimento do sistema opióide na dor inflamatória induzida por prostaglandina E₂. O gama terpineno (100 mg/kg, por via oral) não mudou significativamente o limiar da resposta basal dos animais, mostrando que esse monoterpeno não tem ação no sistema nervoso central. Na dor neuropática induzida por ligadura parcial do nervo ciático, o tratamento agudo com o gama terpineno (100 e 200 mg/kg, via oral)  foi efetivo e o tratamento prolongado com o gama terpineno (100 e 200 mg/kg, via oral) reduziu significativamente a hipersensibilidade mecânica e a alodinia térmica. Dessa maneira, este monoterpeno apresentou efeito antinocecipetivo na dor aguda, inflamatória e neuropática, com possível envolvimento dos sistemas opióide e colinérgico.

A leishmaniose visceral (LV) é uma das doenças tropicais mais negligenciadas, mais de 12 milhões de pessoas estão infectadas em todo mundo O surgimento da pandemia de HIV/AIDS no último quarto de século modificou substancialmente o espectro clínico e epidemiológico da LV. Métodos para o diagnóstico não invasivo podem acelerar o diagnóstico e reduzir a letalidade. O objetivo deste estudo foi investigar a importância da reação em cadeia de polimerase quantitativa para estimativa da quantidade de Leishmania infantum e infectividade da saliva de pacientes com calazar e infeção pelo HIV e a correlação da transmissão do parasita com sua presença na saliva. Para tanto, realizou-se estudo transversal que avaliou 64 pacientes distribuídos entre (a) pacientes do Instituto de Doenças Tropicais Natan Portela, com LV e com e sem infecção por HIV e (b) pessoas assintomáticas que fizeram o teste anti-HIV e que tiveram o teste anti-L.infantum reagente; e 154 pessoas que residiam com pacientes com infecção por L. infantum. Foram comparadas as proporções de pessoas com infecção por L. infantum entre os grupos domésticos de pessoas com L. infantum/HIV e sem HIV, utilizando para esta análise a Real time PCR na quantificação do parasita, PCR qualitativa na detecção da Leishmania e reação de Montenegro para identificar a transmissão do parasita dos pacientes para seus coabitantes. Os resultados demonstraram associação estatística significativa entre ter pelo menos um coabitante infectado e as variáveis sexo, CD4, carga viral, idade, qPCR saliva e qPCR sangue. Observou-se que a chance de um paciente com carga viral maior que 50 cópias virais∕mm³ é 0,9734 vezes maior em relação aos pacientes com carga viral menor que 50 cópias virais∕mm³, assim como de ter uma maior carga parasitária na saliva. Verificou-se a prevalência do sexo masculino entre os coinfectados e de pacientes com idades entre 21-45. Encontrou-se um coeficiente de Spearman de 0,64, com valor de p < 0,001 na correlação entre a qPCR da saliva com a qPCR do sangue. Os pacientes coinfectados com LV∕HIV possuem mediana de 2793,6 parasitas∕ml na saliva e mediana de 2302,4 parasitas∕ml no sangue, enquanto os pacientes sem HIV e com LV sintomática apresentaram um valor mediano de 1821,2 parasitas∕ml na saliva, com média de 10234,4 parasitas∕ml e mediana e média de 320,4 parasitas∕ml e 2649,6 parasitas∕ml respectivamente no sangue, já os pacientes sem HIV e assintomáticos apresentaram valor mediano de 829,2 parasitas∕ml na saliva e 43,2 parasitas∕ml no sangue. Os pacientes com LV∕HIV apresentaram elevada carga parasitária em relação àqueles que possuíam a LV sem HIV, evidenciando a importância da influência do HIV na dinâmica da coinfecção. Os resultados mostraram maior quantidade do parasita na saliva do que no sangue, bem como a utilidade da saliva como método de diagnóstico não invasivo e possível fonte de transmissão do parasita.

Psidium guajava L. é uma das espécies da família Myrtaceae cultivada nos países de clima tropical cujo fruto é a goiaba. A goiaba pode apresentar polpa de cor branca e vermelha. Na goiaba vermelha são encontrados antioxidantes importantes como o licopeno. Este carotenoide que tem recebido atenção especial nos últimos anos devido ao potencial em neutralizar os radicais livres. Portanto, este trabalho teve como objetivo o estudo da quantificação, caracterização, avaliação da capacidade antioxidante e antimicrobiana do licopeno extraído da goiaba. Para a caracterização do licopeno as técnicas de Espectrofotometria UV-vis, Cromatografia Liquida de Alta Resolução (CLAE), Espectrometria de Massas (EM) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN) foram empregadas. Uma curva de calibração foi construída em UV-vis e CLAE para a quantificação do licopeno obtido por diferentes métodos de extração. Um estudo comparativo da atividade antioxidante por ABTS e ORAC (Capacidade de Absorção do Radical Oxigênio) foi realizado com os extratos de carotenoides de goiaba (ECG) e de tomate (ECT), também com licopeno purificado a partir destes extratos. O licopeno purificado da goiaba (LPG) apresentou as mesmas bandas de absorbância do padrão de licopeno do tomate (LP) com λ_máx = 445, 472 e 503 nm. Os resultados obtidos por CLAE, EM e RMN mostram que o método aplicado de maior rendimento durante a extração do licopeno de goiaba tende a isomerizá-lo em 5-cis licopeno o 13-cis licopeno, por ação da temperatura e pelo uso de solventes orgânicos. Na CLAE, ambos LPG e licopeno purificado do tomate (LPT) apresentaram o mesmo tempo de retenção (t_R), porém foi diferente do t_R do LP, provavelmente, são isômeros do trans licopeno. Além disso, o perfil cromatográfico do ECG apresenta os mesmo picos do ECT com intensidades diferentes que pode ter influenciado no potencial antioxidante dos extratos. O ECG apresentou maior atividade antioxidante para o radical ABTS^+. - 2,2’-azino-bis (3-etilbenzotiazolin) 6-ácido sulfônico) e ORAC. Para os ensaios antimicrobianos o ECG e o ECT apresentaram MIC (15mgml^-1) e MBC (30mgml^-1) contra bactérias Gram positivas (Staphylococcus aureus e Listeria innocua) e Gram negativa (Echerichia coli). Portanto, estes ensaios mostram que o extrato produzido a partir do resíduo da cadeia da goiaba tem potencial para o uso nas indústrias de alimentos, cosmética e farmacêutica.

Platonia insignis Mart (Clusiaceae) é popularmente conhecida como bacuri, sendo bastante utilizada na medicina popular para o tratamento de diversas doenças, como problemas dermatológicos, cicatrização de feridas e inflamação. A fração hexânica extraída das suas sementes apresenta uma composição química com alto teor de ácidos graxos. Entretanto, desta fração foi isolado o composto garcinielliptona FC, uma benzofenona poliisoprenilada. O objetivo do presente estudo foi investigar a toxicidade e o efeito antiepiléptico em camundongos machos e fêmeas tratados com garcinielliptona FC, bem como seu potencial anti-helmíntico in vitro contra o Shistossoma mansoni para contribuir com o desenvolvimento de fitomedicamentos. Para tanto, uma prospecção científica e tecnológica foi realizada em bases de dados. No estudo toxicológico em dose única, os camundongos (n = 5/dose e sexo) foram tratados por via oral (v.o.) e intraperitoneal (i.p.) com garcinielliptona FC nas doses de 500, 1000 e 2000 mg/kg. Durante 14 dias após o tratamento foram observados a toxicidade geral, taxa de letalidade, evolução do peso corporal, consumo de água e alimentos, e ainda produção de excretas. Após este período, os animais foram anestesiados com pentobarbital sódico (40 mg/kg; i.p.) para coleta de sangue para análises hematológicas e bioquímicas, bem como dissecação dos principais órgãos (fígado, coração, rins, pulmão,  baço e cérebro) para estudo morfológico e macroscópico. Também foi avaliada a atividade locomotora e coordenação motora dos animais tratados com garcinielliptona FC nos testes do campo aberto e da barra giratória, respectivamente. Já no estudo com administração em doses repetidas os camundongos foram tratados com doses de 25, 50 e 75 mg/kg durante 30, 90 e 120 doses consecutivos (n = 10/dose e sexo). Nestas doses também foi verificada a atividade antiepiléptica de garcinielliptona FC, no modelo de crises epilépticas induzidas por pilocarpina. Por sua vez, os efeitos anti-helmínticos foram determinados in vitro contra o S. mansoni nas concentrações (0,78; 1,56; 3,12; 6,25; 12,5; 25 e 50 μM). Durante o tratamento em dose única e repetidas foram evidenciados baixa toxicidade durante o período de observação e não foi possível determinar a Dose Letal 50%. Entretanto, como os animais foram tratados com doses até a 2000 mg/kg e não foi registrada nenhuma morte durante o período de observação é possível sugerir que a garcinielliptona FC apresenta perigo relativamente baixo de toxicidade aguda sendo classificada na categoria 5 segundo The Organisation of Economic Cooperation Development. Com relação aos parâmetros fisiológicos, bioquímicos e hematológicos não foram observadas alterações e nem efeitos sobre a atividade locomotora e coordenação motora entre animais após tratamento com garcinielliptona FC nos diferentes protocolos. Além disto, não foi visto mudanças quanto aos aspectos macroscópicos e morfológicos dos órgãos analisados. Na atividade antiepiléptica foi observada uma redução no número de animais que apresentaram crises epilépticas e estado de mal epiléptico e também reduziu a taxa de mortalidade, especialmente para a dose 75 mg/kg no modelo de crise epiléptica induzida por pilocarpina. Já o efeito anti-helmíntico in vitro foi observado a partir da concentração de 6,25 μM, demonstrando melhor atividade na concentração de 50 μM durante o período de incubação de 120 h. Os resultados sugerem que garcinielliptona FC pode ser segura em ensaios não clínicos, e que demonstra potencial farmacológico que precisa ser melhor explorado para esclarecer seu mecanismo de ação para as atividades antiepiléptica e anti-helmíntica conforme demonstrado neste estudo. Como forma de contribuir para o desenvolvimento tecnológico da garcinielliptona FC foi solicitado um pedido de depósito de registro de patente junto ao Instituto Nacional da Propriedade Industrial. Os resultados do presente estudo ampliam as perspectivas para a realização de outros testes que possam corroborar com o uso seguro e eficaz da garcinielliptona FC, como produto de importância biotecnológica.

Do fruto verde da Aniba riparia (Nees) Mez (Lauraceae), foram isolados alguns alcalóides, do tipo alcamidas, as riparinas (I, Il e III), com atividades farmacológicas. Foram preparados novos derivados da riparina, denominadas riparinas A, B, C, D, E e F. O presente estudo realizou a otimização da síntese dessas substâncias e avaliações pré-clínicas de atividades farmacológicas: antioxidante “in vitro” e “in vivo” com avaliação do estresse oxidativo, testes de citotoxicidade, antimicrobiana, antihelmíntica e estudos comportamentais. A prospecção científica e tecnológica foi realizada em bases de dados, encontrando dezesseis artigos publicados na última década nenhum registro de depósito de patentes nas bases tecnológicas sugerindo a necessidade de um investimento cientifico e tecnológico, que, com base nas propriedades atribuidas à A. Riparia estimulem o desenvolvimento de produtos derivados desta espécie. A avaliação da atividade antioxidante “in vitro” sugere que, as riparinas A-F, por meio da capacidade de remoção de nitrito e de radicais hidroxila, bem como pela redução da peroxidação lipídica, são fontes promissoras de compostos biologicamente ativos com propriedades antioxidantes. As riparinas C,D, E e F foram citotóxicas para as linhagens de células tumorais testadas. Nos testes antitrombóticos as Rip E e Rip A, apresentaram uma significativa capacidade de lise de coágulos, quando avaliado a percentagem de lise nas doses de 25 e 50 µg/tubo. Nos testes antibacterianos e antifúngicos as amostras de Rip E e F foram as mais ativas, aumentando o halo de inibição obtido no cultivo de fungos e bactérias gram positivas e negativas, por meio do método de cup-plate e de difusão em disco, chegando a superar os resultados do cultivo com os controles positivos (fluconazol, ciprofloxacina e azitromicina). A riparina E e F foram as mais efetivas quando avaliadas quanto à atividade antihelmintica pelo efeito “in vitro” sobre vermes adultos do Schistossoma mansoni. A Rip E apresentou os melhores resultados nas atividades farmacológicas testadas, sugerindo uma possível relação entre aestrutura e a atividade. A atividade antioxidante “in vivo” e o estresse oxidativo mitocondrial, foi avaliado em camundongos expostos à Riparina A, uma molécula formada, basicamente, pelo núcleo fundamental das demais substâncias. Em relação ao controle negativo houve redução da concentração de TBARS e de nitrito nas mitocondrias isoladas do cérebro e fígado dos camundongos, houve redução dos níveis de GSH no tecido hepático e cerebral, a atividade da SOD e da catalase aumentaram no cerebro nquanto no fígado SOD permaneceu inalterada e catalase teve atividadereduzida. O potencial antioxidante estruturalmente proposto, foi confirmado nos testes “in vitro” e sugerido “in-vivo” pela promoção da redução do conteúdo de TBARS e nitrito. As dicotomias que surgem pela redução das atividades enzimáticas necessitam ser melhor elucidadas e relacionadas à possibilidade de uma modulação enzimática pró-oxidante. Os resultados obtidos configuram como estimulo e subsidio à pesquisas congêneres e fomentam a formulação de fármacos e a bioprospecção de produtos derivados das riparinas, além de permitir a otimização da síntese destes compostos de forma o obter mLéculas que atendam a demanda crescente por substâncias estruturalmente inovadoras.

A criptococose é uma importante micose que afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Globalmente, quase 1 milhão de casos de meningite criptocócica em indivíduos infectados pelo HIV são estimados para ocorrer a cada ano e mais de 600.000 mortes. O diagnóstico da criptococose é feito através de microscopia, cultura, seguido por teste bioquímicos, e detecção de antígeno capsular (Crag) por ensaio imunoenzimático, ou de aglutinação de látex ou ensaio lateral flow. A aplicação de peptídeos sintéticos com o objetivo de melhorar o diagnóstico de doenças infecciosas tem sido relatada, mais pouco tem sido feito com relação a micoses sistêmicas. Este estudo teve com objetivo testar peptídeos sintéticos com novos alvos antigênicos para o desenvolvimento de teste diagnóstico para Cryptococcus spp. Sessenta e três epítopos de células B a partir de proteínas imunorreactivas de C. gattii previamente identificados foram sintetizados e avaliados como antígeno em ensaio imunoenzimático (ELISA). Dos sessenta e três peptídeos sintéticos, seis foram identificados como bons candidatos a antígenos para o desenvolvimentode novos teste diagnósticos para a criptococose. Destes, 3 são da HSP70 (H18, H21 e H26), 2 da proteína hipotética CGNB 1302 (Hy49 e Hy50), e 1 da proteína de Sks2 (S4). Estes seis peptídeos sintéticos foram reconhecidas por anticorpos em imunoensaios, alcançando: 100% de especificidade e sensibilidade de 78%. O reconhecimento por anticorpos de soros provenientes de outras patologias mostrou-se heterogêneo e com valores de densidade óptica muito menor do que as observadas para a criptococose (valor p variou de p<0,0001 para p=0,0007), exceto H18. A nossa descoberta demonstra que as técnicas de imunoproteômica e bioinformática foram capazes de identificar novos alvos antigênicos para o desenvolvimento de testes de diagnóstico para a criptococose e, neste estudo seis peptídeos sintéticos mostraram ser promissores antígenos no imunodiagnóstico da criptococose.

Os antioxidantes são substâncias adicionadas em pequenas proporções a produtos, objetivando o impedimento da oxidação de outras substâncias, conferindo melhor funcionalidade ao produto e requisitos de qualidade. Buscando diminuir o uso de antioxidantes sentéticos na indústria de alimentos e visando minimizar os custos e os danos causados pelos mesmos, vários estudos têm sido desenvolvidos. Este trabalho utilizou sub-produtos naturais agroindustriais, a torta do babaçu e o líquido da castanha de caju, que foram misturados e submetidos à reação eletroquímica para testes antioxidantes in vitro e in vivo. A eletrossíntese proporcionou modificações estruturais que melhoraram a AA do produto obtido. O ETBL foi estudado por FTIV, GM-EM, RMN ¹³C e TGA. O estudo da atividade antioxidante foi realizado frente à remoção de radicais DPPH, nitrito, hidroxila e TBARS. Foram realizados testes de toxicidade frente à Artemia Salina L. e aguda em camundongos. O antioxidante ETBL apresentou resultados satisfatórios quanto à eficiência na remoção/inibição da produção de radicais livres, quando comparado com o CNSL, em todos os testes realizados, bem como não apresentou toxicidade na dose estudada e não causou mortes nos testes in vivo realizados neste trabalho.

Neste trabalho, a ciano-carvona, obtida por síntese da substância R-(-)-carvona, foi estudada em tratamento agudo ou agudo com doses repetidas por 30 dias nas doses de 25, 50 e 75 mg/kg/dia, v.o., em camundongos. As bioprospecções científica e tecnológica realizadas sobre o uso do ciano-carvona mostraram um depósito de patente e três artigos científicos nos últimos 3 anos. Em tratamento agudo com doses repetidas, foi avaliada a toxicidade em parâmetros comportamentais, bioquímicos, hematológicos e morfológicos em órgãos internos, além de investigados efeitos na atividade locomotora (teste de campo aberto), na coordenação motora (teste de rota rod), ansiolítico (teste de claro-escuro) e antioxidante em áreas cerebrais (córtex frontal, hipocampo, corpo estriado e cerebelo). O tratamento com ciano-carvona não causou nenhuma morte ou toxicidade, e não apresentou nenhuma alteração bioquímica, hematológica e morfológica clinicamente significativa. Os animais tratados com ciano-carvona apresentaram atividade locomotora diminuída, sem alteração na coordenação motora e mostraram efeito ansiolítico. Nos testes antioxidantes, a ciano-carvona inibiu significativamente a peroxidação lipídica e o conteúdo de nitrito e aumentou significativamente a concentração de glutationa reduzida. A ciano-carvona mostrou aumento significativo na atividade das enzimas catalase e superóxido dismutase em algumas áreas cerebrais. A ciano-carvona, na maior dose estudada, aumentou significativamente a atividade das enzimas Na+, K+-ATPase e delta-aminolevulinato desidratase nas quatro áreas cerebrais. Foi investigado o efeito antiepiléptico da ciano-carvona em tratamento agudo com doses repetidas nos modelos de epilepsia induzidos por pilocarpina, pentilenotetrazol e picrotoxina. A ciano-carvona promoveu aumento significativo da latência para a instalação de estado de mal epiléptico induzido, bem como diminuiu significativamente as percentagens de animais que apresentaram crise epiléptica e que foram a óbito, sem antagonismo pelo flumazenil. Foi avaliado o efeito anti-inflamatório agudo da ciano-carvona nos testes de edema de pata induzidos por carragenina, bradicinina, histamina, prostaglandina E2 e serotonina. A ciano-carvona diminuiu significativamente o edema de pata em todos os modelos utilizados. A ciano-carvona mostrou também inibição significativa na atividade da enzima mieloperoxidase em homogenato da pata e nas dosagens de IL-1β e TNF-α no lavado peritoneal dos camundongos após indução de inflamação por carragenina. Foi avaliado o efeito antinociceptivo agudo da ciano-carvona pelos testes de contorções por ácido acético e de formalina. A ciano-carvona mostrou efeito antinociceptivo por reduzir o número de contorções no teste de contorções pelo ácido acético e diminuir o tempo de lambedura no teste de formalina. Foi submetido pedido de patente do uso da ciano-carvona no tratamento de doenças que envolvem dor e/ou inflamação ao Núcleo de Inovação e Transferência de Tecnologia (NINTEC) da UFPI.

Essa pesquisa foi desenvolvida com o objetivo de caracterizar a variabilidade fenotípica e genética de galinhas naturalizadas da sub-região Meio-Norte do Brasil e determinar marcadores moleculares que possam ser associados com características de desempenho muscular. Assim, quatro grupos genéticos no Sistema Alternativo de Criação de Aves Caipiras (SACAC) foram definidos conforme os municípios de origem: Teresina (Teresina, Piauí), Nordestina (Regeneração, Piauí), Brejeira (Brejo de Anapurus, Maranhão) e Graúna Dourada (Itapecuru Mirim, Maranhão). Um estudo preliminar de caracterização genética foi concluído fazendo uso de marcadores moleculares e com os quatro ecótipos. Vinte marcadores microssatélites mostraram-se eficientes na amplificação do DNA, com evidente presença de polimorfismo. Neste estudo, foi constatada grande variabilidade genética entre os grupos onde os maiores valores foram encontrados nos grupos genéticos, Nordestina e Brejeira, sendo, portanto, estes dois grupos base para seleção de aves mais produtivas quanto à produção de carne. A partir de variáveis morfológicas e utilização de técnicas de análise multivariada os quatro ecótipos de galinhas naturalizadas foram caracterizados e os machos comparados a um grupo de galos de briga. As análises de agrupamento organizaram as galinhas naturalizadas em apenas dois grupos. Essa mesma análise foi capaz de distinguir os galos dos ecótipos naturalizados dos galos de briga. Pela análise de componentes principais mais de 90% da variação para ambos os sexos estava contida nos primeiros componentes principais. O peso corporal foi a variável que influenciou o primeiro componente de ambos os sexos. Para os machos, a altura da crista teve influência no segundo componente principal. Por esse estudo foi observada grande variabilidade fenotípica entres que os ecótipos naturalizados e galos de briga,’ sendo os primeiros mais adaptados às regiões quentes. Para a verificação da atual diversidade genética de galinhas naturalizadas, 10 marcadores microssatélites foram utilizados para comparação de entre 60 aves coletadas no município de São João do Piauí, que não se encontram sob nenhum programa de conservação, e 95 aves de uma linhagem de frango comercial. Os resultados mostram claramente que a variabilidade genética das populações locais de galinhas já se encontra sob forte influência de linhagens comerciais. Um estudo mais abrangente foi conduzido para caracterizar os ecótipos de galinhas naturalizados sob conservação e compará-los aos grupos de São João do Piauí, galos de briga e uma linhagem de frango comercial. Por essa pesquisa foi possível constatar que os ecótipos naturalizados mantidos em programa de conclusão, dez microssatélites são indicados para o monitoramento da diversidade genética melhorada em gerações subseqüentes para o desempenho muscular, à situação atual da variabilidade genética das populações de galinhas naturalizadas merece atenção em virtude da influência de cruzamentos com linhagens melhoradas. Um teste de associação entre estas variáveis, morfológica e molecular está em fase de conclusão.

 A energia é considerada questão estratégica de uma nação e a proporção de seu uso sempre esteve diretamente associada ao desenvolvimento dos povos. Com a descoberta do petróleo no início do século XIX, intensifica se ainda mais o processo de industrialização, ocasionando uma intensa modificação do espaço ocupado pelo homem. Porém, com sua eminente escassez, a geração de energia através de combustíveis fósseis, como o petróleo, não poderá fornecer indefinidamente a energia requerida pela população mundial. Neste contexto, o biodiesel surge como substituto promissor dos combustíveis fósseis, sendo um biocombustível derivado de oleaginosas ou gorduras animais composto por ésteres alquílicos que pode substituir total ou parcialmente o diesel. Entretanto, o mesmo apresenta em sua composição química uma quantidade significativa de ácido graxos insaturados, por exemplo, linoléico, é susceptível a degradação oxidativa através de reações mediadas por calor e traços de metais, principalmente na presença de oxigênio, os quais podem afetar negativamente a estabilidade do biodiesel. Na busca por inovações para sanar esse problema, nesse trabalho utilizou-se compostos fenólicos, (líquido da castanha de caju – LCC técnico, submetido à reação eletroquímica para testes antioxidantes no biodiesel de soja. Através da reação eletrolítica buscou-se fazer modificações estruturais que melhorassem a atividade antioxidante do LCC técnico, utilizando metanol como solvente e hidroquinona como eletrólito (LCCHQ). Afim, de medir a eficiência do LCCHQ foram feitas formulações (biodiesel/antioxidante) e submetidas ao “Schaal Oven Storage Stability Test”– método de oxidação acelerada e posteriormente, analisadas por espectroscopia de absorção molecular na região UV (240 a 300 nm) e determinação do índice de acidez e ensaio pelo método Rancimat. O antioxidante LCCHQ  apresentou resultados satisfatórios quanto à eficiência no retardo da evolução do processo de oxidação, quando comparado com o LCC técnico em todo os testes realizados.

Há uma importante associação de distúrbios urinários e câncer de mama em mulheres na pós- enopausa. O tratamento endócrino de escolha para o carcinoma de mama nestas mulheres é o  amoxifeno, que consoante alguns estudos também poderia melhorar as queixas urinárias por atuar nos tecidos uretrais. Objetivos: Avaliar os efeitos do tamoxifeno na espessura epitelial e na ativação dasquinases reguladas por sinais extracelulares (ERKs) 1 e 2 na uretra de ratas castradas.Material e Métodos: Este estudo envolveu 52ratas castradas Wistar Hannover que foram divididas leatoriamente em grupos controles, I (n=20) e II (n=6), e grupos experimentais, III (n=20) e IV (n=6). Os animais controles receberam apenas veículo (0,5 ml de propilenoglicol) enquanto os animais experimentaisreceberam 250 µg de tamoxifenodiluídos em 0,5 ml de propilenoglicol diariamente por gavagem durante 28-30 dias.No 31º dia, após o tratamento, os animais dos gruposcontrole I e experimental IIIforam sacrificados para remoção das uretras, que foram divididas em segmentos proximais e distais e fixadas em formoltamponado a 10% para estudo histológico da espessura epitelial. No 29º dia, após o tratamento, os animais dos grupos controle II e experimental IV foram sacrificados e as uretras removidas para extração de proteínas e análise por Western blot com anticorpos específicos para fosfo-ERK1 e 2. Os dados foram analisados pelo teste t de Student (p<0,05).Resultados: A espessura epitelial média da uretra distal dos animais nos grupos controle I e experimental III foi 36,6 ± 1,5 µm e 42,8 ± 2,0 µm (p<0,001), enquanto que da uretra proximal foi 40,4 ± 2,0 µm e 42,1 ± 1,6 µm(p=0,514), respectivamente. Houve aumento de 146,7% nos níveis médios de fosfo-ERK1 e 15,2% nos níveis médios de fosfo-ERK2no grupo experimental IV comparado ao grupo controle II (p<0,01 ep=0,313, respectivamente).Conclusões: Os presentes resultados indicam que, na dose e no tempo de tratamento usados, o tamoxifeno aumentou significativamente a espessura do epitélio distal e os níveis de fosfo-ERK1 na uretra de ratas castradas.

Os produtos naturais tem servido à humanidade como ferramenta para o desenvolvimento de novos medicamentos, já que destas fontes pode-se obter com feições estruturais únicas e propriedades farmacológicas desejáveis . A espécie Cenostigma macrophyllum Tul. var. acuminata Teles Freire (Leguminosae-Caesalpinioideae) ocorre em abundância na região de Teresina-PI e é popularmente
conhecida como caneleiro, canela-de-velho, fava do campo e maraximbé. É uma árvore de porte ereto ou subereto que pode atingir até 20 metros de altura. O presente trabalho teve por objetivos analisar a espécie Cenostigma macrophyllum Tul. var. acuminata Teles Freire como fonte de insumos biotecnológicos úteis para a industria farmacêutica e cosmética; quantificar os flavonóides diméricos nas folhas da espécie para fins de viabilização de aproveitamento comercial; identificar variações de sazonalidade na biossíntese dos flavonóides diméricos nas folhas de forma a garantir perenidade na produção comercial dos mesmos; Determinar a composição do óleo das sementes da espécie; Propor formas de aplicação para os flavonoides diméricos das folhas e o óleo das sementes de C.  acrophyllum na forma de protótipos de produtos com aplicação farmacêutica e cosmética. Para tanto material vegetal constituído de folhas e sementes foram coletados e extraídos com solventes, concentrados sob pressão reduzida e submetidos a procedimentos cromatográficos (Gel de sílica, CLAE-UV, CLAE-DAD, CG-EM, CG-DIC, CLAE-IE-EM) e análise por técnicas espectroscópica (RMN 1H E 13C). As sementes da espécie C. macrophyllum rendem um óleo com alto rendimento para uma
Leguminosae (25,68±0,45 g/100 de sementes) e com perfil químico que o torna uma fonte relevante de ácido linoleico, tocoferóis e fitoesteróis. As folhas da espécie renderam 5 biflavonas tipo iapigenina, as duas majoritárias foram agatisflavona e amentoflavona. A os perfis cromatográficos da espécie definem que a biossíntese das biflavonas ocorre ao longo de todo o ano sem interrupções. Tal condição aliada relativa facilidade de separação, purezas superiores a 99,0%, fazem da espécie uma fonte em potencial de biflavonas em especial de amentoflavona que possui atividades biológicas com forte potencial de aplicação comercial. Desta forma, o estudo realizado com a espécie C. macrophyllum, habilita a planta como fonte de insumos na forma óleo vegetal rico em metabólitos úteis e como fonte de amentoflavona para todas as aplicações a que se destine.

A Leishmania chagasi é o protozoário responsável pela Leishmaniose Visceral (LV) nas Américas. A LV é uma doença que cursa em febre, anemia e hepatoesplenomegalia, sendo fatal se não for tratada devidamente. Nas ultimas décadas a LV vem aumentando sua letalidade ao infectar indivíduos jovens e/ou com comorbidades. As coinfecções com HIV tornaram a LV ainda mais fatal. Dentre os fatores que se destacam como risco de morte na leishmaniose visceral grave estão o sangramento e as infecções bacterianas.  

As complicações oriundas da infecção por Leishmania ainda não estão bem esclarecidas. Acredita-se que a gravidade da doença possa estar associada à susceptibilidade e resposta imune do hospedeiro, ou a expressão diferenciada de genes do parasita.

Nós desenvolvemos um estudo onde comparamos quantitativa e qualitativamente o extrato proteico total de formas promastigotas infectantes de L. chagasi obtidos por inoculação de formas amastigotas isoladas de medula óssea de pacientes com leishmaniose visceral clássica e leishmaniose visceral fatal. Foi construido também um biossensor nanoestruturado para avaliação da atividade leishmanicida de peptídeo antimicrobiano sintético Dermaseptina 01 (DS01).

A técnia proteomica de análise de dados independentes livre de etiquetas (Label-free nanoLC-MS^E) foi usada para detecção de proteínas de Leishmania chagasi. Foram identificadas 66 proteínas, 31 delas comuns aos dois desfechos estudados, 15 associadas somente com a forma clássica e 20 únicas para a forma grave. Uma análise de expressão revelou aumento de regulação em uma proteína hipotética (LinJ.36.0380), Alfa tubulina (LinJ.13.0330), ATPase subunidade beta (LinJ.25.2580), Histona H2B (LinJ.19.0040) e Triparedoxina citosólica (LinJ.15.1140) nos isolados de desfechos graves da doença. Fatores de virulência já descritos como EIF 4a, HSP70, HSP83-1, EF-1α, Cinesina, KMP-11e Cisteina peptidase foram encontrados. Essa é, até o momento, a primeira abordagem proteômica por Label-free nanoLC-MS^E que compara desfechos clínicos de LV com a expressão de proteínas de promastigotas de Leishmania chagasi. Os achados aqui descritos podem contribuir para o melhor entendimento sobre os fatores associados a casos graves de LV além de dar suporte à elaboração de métodos de diagnóstico e controle da leishmaniose visceral.

As Leishmanioses compreendem um espectro de doenças infecciosas, causadas por parasitos pertencentes à ordem Kinetoplastida, família Trypanossomatidae, gênero Leishmania que agrupa espécies de protozoários intracelulares obrigatórios, unicelulares, heteroxenos, encontrados nas formas promastigota (flagelada, alongada e losangular, livre ou aderida ao trato digestivo dos hospedeiros invertebrados) e amastigota (aflagelada, ovalada, que normalmente habita o interior de células do sistema retículo endotelial, reproduzindo-se por divisão binária dentro dos fagolisossomos) (MICHALICK E GENARO, 2005).Os parasitos são transmitidos pela picada de fêmeas de insetos dípteros da família Psychodidae do gênero Lutzomya no Novo Mundo e Phlebotomus no Velho Mundo. São insetos de pequeno porte (1 a 3 mm de comprimento), possuem corpo revestido por pelos e coloração clara (castanho claro ou cor de palha), facilmente reconhecidos pelo seu comportamento, ao voar em pequenos saltos e pousar com as asas entreabertas. São conhecidos como mosquito palha, asa-dura, cangalha, birigui, entre 20 outros. No Brasil, o principal vetor responsável pela transmissão da LV é o Lutzomyia longipalpis, mas recentemente o L. cruzi foi incriminado como vetor no estado do Mato Grosso do Sul. Estes insetos são capazes de invadir casas e abrigos de animais, adaptando-se a vários tipos de ambientes, inclusive o peridomicílio, onde o cão tem sido identificado como a principal fonte de infecção em regiões urbanas, já no ambiente silvestre, destacam-se as raposas e os marsupiais (BRASIL, 2006). A infecção por Leishmania causa diferentes manifestações clínicas que estão relacionadas ao desenvolvimento de resposta imune do hospedeiro e com a espécie da Leishmania (GRIMALDI, 1982). A resposta imune protetora contra leishmaniose é mediada por células T, manifestada por uma forte resposta proliferativa por linfócitos do sangue periférico aos antígenos do parasita e mediada por citocinas, como o interferon-gama, e o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), aos quais são necessários à ativação de macrófagos e posterior destruição do parasito intracelular (MURRAY, 1997). Os diferentes padrões de reação e desenvolvimento da doença dependem da resposta das células T. As complexas interações entre um patógeno e seu hospedeiro são diversas, coreografadas e reguladas, constituindo a base que delineia o curso de uma doença infecciosa. A maioria dos patógenos desenvolveu mecanismos muito bem adaptados para interromper e alterar funções celulares e cada qual desenvolveu estratégias particulares para a manipulação  do hospedeiro e otimização de sua sobrevivência e transmissão (Cummings &  Relman, 2000; Manger & Relman, 2000; Diehn & Relman, 2001).  A infecção de um hospedeiro por microrganismos patogênicos envolve mudanças drásticas na fisiologia tanto dos microrganismos invasores quanto das células hospedeiras. Essas mudanças fisiológicas são transmitidas por sistemas de transdução de sinal e espelhadas por mudanças na expressão gênica do patógeno e do hospedeiro (Diehn & Relman, 2001).As diferentes manifestações clínicas dependem de vários fatores, tais como, a espécie de Leishmania envolvida, sua virulência e aspectos relacionados ao hospedeiro, como status imunológico e nutricional, podendo estar relacionados a polimorfismos de genes associados à interação hospedeiro-parasita.           Por essa razão, estudos baseados na quantificação da carga parasitária e identificação de regiões de polimorfismo dos genes KMP-11(proteína de membrana dos Kinetoplastida de 11 kDa), PSA (Antígeno de superfície de promastigotas) e A2, presentes nos diferentes desfechos clínicos apresentados pelos pacientes, podem ajudar na busca da cura da doença e de vacinas mais eficientes e com menores efeitos colaterais.

A criptococose, ocasionada por Cryptococcusgattii ou Cryptococcusneoformans, coloca-se entre as infecções fúngicas humanas de grande letalidade, principalmente sob a forma de meningoencefalite. C.gattii acomete essencialmente pacientes imunocompetentes e tem emergido em países de clima temperado, como na América do Norte. No Brasil, C.gattii genótipo VGII atua predominantemente como patógeno primário, acometendo hospedeiros imunocompetentes, incluindo crianças e adultos jovens, sendo considerado endêmico no Norte e Nordeste deste País, apresentando significativa letalidade e morbidade. Sendo assim, a identificação de antígenos para desenvolvimento de novos testes diagnósticos, estratégia de prevenção e o entendimento da patogênese desta micose sistêmica têm sido uma busca constante. No presente estudo, abordagem de imunoproteômica foi utilizada para mostrar proteínas imunorreativas de C.gattii contra soro de pacientes com criptococose. Além disso, foram identificados epítopos para células B que possam ser investigados como potenciais alvos para desenvolvimento de testes diagnósticos e estratégia de prevenção. Nós utilizamos uma combinação de eletroforese bidimensional, western blot e espectrometria de massa para identificar proteínas do lisado total de células de C.gattii genótipo VGII. Perfil imunoproteômico do extrato total de quatro cepas de C.gattii identificou um total de 68 proteínas imunorreativas, correspondendo: (i) 12 proteínas da cepa CG01; (ii) 12 proteínas da cepa CG02; (iii) 18 proteínas da cepa CG03 e (iv) 26 proteínas da cepa R265. Todas as proteínas selecionadas por western blot foram mapeados para epítopos de célula B pelos programas ABCPred e BCPreds.  A sobreposição de peptídeos entre estes programas resultou um total de 374 peptideos concordantes. Em particular, este trabalho destaca a heterogeneidade de imunorreatividade das quatro cepas C.gattii usando soro de pacientes com criptococose e que hsp (proteina choque térmico), thiol-specific antioxidante e GrpE parecem ser importantes na patogênese da criptococose. É o primeiro estudo no qual um repertório de peptídeos para células B foram indentificados e novas proteínas imunorreativas de C.gattii encontradas por meio de imunoproteômica. Futuros estudos sobre estas proteínas recentemente identificadas em C.gattii contra soro de pacientes com Criptococose, não só notavelmente contribui para a descoberta de novos biomarcadores de diagnóstico e subunidade de vacinas, mas também fornece uma visão detalhada sobre os mecanismos de imunidade humoral humana contra Criptococose. 

Introdução: Combretum leprosum Mart & Eich (Combretaceae) é encontrada na região Nordeste do Brasil onde é conhecido como mufumbo. Objetivos:O estudo foi desenvolvido com o objetivo de observar o efeito antinociceptivo da fração hidroalcoólica (FH) das cascas de Combretum eprosumMart & Eich e a (-)-epicatequina (EPI), flavonóide isolado a partir desta fração, administrados por via oral em camundongos Swiss machos (20-30 g; n=6-10). Metodologia: Para avaliar o efeito antinociceptivo foram utilizados os testes da capsaicina, formalina, glutamato e contorção abdominal, sendo o modelo da contorção abdominal e do glutamato utilizados para avaliação dos mecanismos de ação
envolvido no efeito de FH (62,5-500mg/kg) e EPI (12,5-50 mg/kg) respectivamente. Resultados:Foi observado que tanto a FH como a EPI apresentaram efeitos significativos em todos os modelos testados, demonstrando assim que a EPI pode está envolvida no efeito observado, além disso, houve reversão do efeito quando a FH foi associadacom cetanserina (0.03 mg/kg), ioimbina (0.15 mg/kg) e L:Arginina (600mg/kg), evidenciando assim a participação do sistema serotoninérgico, adrenérgicoe nitrérgico. No modelo do glutamato, os possíveis mecanismos da EPI (50 mg/kg) foram
avaliados. Houve reversão pelo pré tratamento com cetanserina (0.03 mg/kg), ioimbina (0.15 mg/kg), pindolol (1 mg/kg), atropina (0,1 mg/kg), naloxona (2 mg/kg) e glibenclamida (2 mg/kg), porém não com cafeína(3mg/kg), L: arginina (600 mg/kg) e ondansetrona (0,5 mg/kg), Demonstrando assim a participação dos sistemas serotoninérgico, adrenérgico, colinérgico e opióide
no efeito da EPI. No teste do campo aberto e rota Rod, a FH e a EPI não apresentou significância demonstrando ausência de efeito depressor no sistema nervoso central. Conclusão:No presente estudo, foi demonstrado o efeito antinociceptivo de Combretum leprosum e de suafração hidroalcoólica, assim como do seu componente a (-)-epicatequina.