Objetivos: O presente estudo visou o desenvolvimento e caracterização físico-química de um hidrogel injetável composto por Laponita (LAP) e Xiloglucano (XG), bem como avaliação da citocompatibilidade e potencial bioativo em linhagens de osteoblastos murinos. Materiais e métodos: Trata-se de um estudo experimental in vitro, no qual foram formulados hidrogéis LAP/XG nas concentrações 2%, 3% e 4% (m/v%) para as análises físicas. A caracterização físico- química do hidrogel compreendeu os ensaios de injetabilidade (agulha 30G), estabilidade em solução aquosa de cloreto de cálcio (CaCl₂) a 37 °C e determinação do potencial Zeta. Para avaliação biológica, a linhagem de osteoblastos murinos (OFCOLL II) foi exposta a diferentes concentrações dos componentes isolados (LAP e XG) e compostos (LAP/XG) variando entre 0,03%, 0,3% e 3%, a fim de determinar a dose-resposta sobre a viabilidade (MTT) e proliferação celular (Ki67). A análise estatística foi realizada considerando nível de significância de 5% (p < 0,05). Resultados: A formulação a 3% de LAP/XG apresentou melhor desempenho mecânico, caracterizado por fluxo contínuo em agulha 30G e pressão de injeção de aproximadamente de 0,6 MPa. Em meio aquoso, o hidrogel apresentou aglutinação em CaCl₂, indicando estabilidade estrutural. Os ensaios biológicos revelaram que todas as variações testadas são citocompatíveis. A combinação LAP/XG a 0,03% (p=0,0244) promoveram um aumento significativo na atividade metabólica celular. A análise de Ki67 confirmou a progressão do ciclo celular em 24 h, com destaque para a concentração de 0,3% de LAP/XG que apresentaram intensidade de fluorescência significativamente superior ao controle (p<0,05). Conclusão: O hidrogel a 3% de LAP/XG atingiu os requisitos técnicos de injetabilidade e estabilidade, mostrando-se uma plataforma biocompatível e bioativa. Embora o estímulo biológico máximo (viabilidade e proliferação) tenha sido observado em concentrações mais diluídas dos componentes (0,03% e 0,3%), o hidrogel desenvolvido demonstrou ser um suporte seguro e citocompatível, com potencial de atuar na regeneração de tecido ósseo.